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Dakiki细胞说明书介绍

发布时间：2025/4/18 10:32:44 阅读次数：11

产品说明
Dakiki(JW-CL-0926)

注意事项
储存温度：液氮中保存
生物安全等级：2
使用范围：本产品仅限于科学研究，绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用。
完全培养基配制：该细胞系培养所用基本培养基为 RPM I 1640, 配置完全培养基时需加入 10%FBS ，1%Anti-Anti。

产品描述
种属：人源（Homo sapiens）
组织来源：外周血（Peripheral blood）
疾病：癌症（Carcinoma）
年龄：未知（Unknown）
性别：未知（Unknown）
细胞类型：淋巴母细胞（Lymphoblast）
生长特性：悬浮生长（Suspension）

拆包 & 存储
1. 请立即检查包装袋是否有破损或漏液
2. 请立即将细胞培养瓶从包装盒中取出，并按照下方操作步骤进行培养传代
注意：如为冻存管，请收到后立即解冻培养。若来不及解冻，请储存于液氮中（存储于负80度，会降低细胞存活率）

培养瓶中细胞操作步骤
对于悬浮培养的细胞，寄送前，我们会将培养基充满整个培养瓶，以减少产品运输过程中细胞所受震荡。
1. 收到细胞产品后，请注意观察是否有污染。将培养瓶置于倒置显微镜下仔细检查是否浑浊、是否细菌污染。
2. 将培养瓶竖直放置于37℃培养箱中直至温度平衡，随后，在生物安全柜中，转移培养瓶中的细胞至离心管中，离心200×g / 5 -10 min ，去除上清后，用5mL培养基吹散细胞。
3. 对上述细胞悬液进行细胞计数及活力检测，调整细胞密度至 2-3×105 cells/mL，并转移至新的培养瓶中。
4. 将培养瓶竖直放置于含有5% CO2 的37℃恒温培养箱中培养。如果细胞达到传代培养的密度，则进行传代培养。

冻存细胞操作步骤
注意：为保存细胞的高存活率，请收到产品后，立即解冻培养。
1.将冻存管置于37℃ 水浴中来回晃动，迅速解冻。为避免污染，确保冻存管口置于水面之上。解冻需迅速，大约2分钟。
2. 一旦冻存管中液体融化后，立即取出，采用 70%酒精喷拭冻存管表面。从此步开始，后续操作须在生物安全柜中完成。
3.将冻存管中的液体转移到含有5mL完全培养基的离心管中，离心200×g / 5 - 10 min ，用真空泵去除含有冻存液的上清。
4. 用完全培养基重新悬浮细胞并转移到新的培养瓶中。为保证细胞复苏的存活率，请将培养基在37℃水浴预热后使用。
5. 将细胞置于含有5%CO2 的37℃恒温培养箱中培养。

悬浮细胞传代培养
悬浮细胞的传代可通过补加或置换新鲜培养基的方式来完成，具体做法如下：
1. 取出少量细胞悬液进行细胞计数及活力检测，当细胞密度达到 1.5×106 cells/mL 时，进行细胞传代培养。
2. 取足量细胞加入到盛有新鲜培养基的培养瓶中，将细胞密度维持在5×105cells/mL。
3. 将培养瓶竖直放置于含有5%CO2 的37℃恒温培养箱中培养。如果细胞达到传代培养的密度，则进行传代培养。
培养基换液: 每隔 2 至 3 天。

注意：
细胞含有疱疹病毒，请在二级生物安全柜操作；
培养瓶应使用带滤膜瓶盖，以保持培养基中的空气和CO2

细胞冻存液
细胞冻存液，请使用本公司对应产品
离心收集细胞后，加入适量冻存液（每管细胞冻存量达到10的6次方），将冻存管放入冻存盒置于负80冰箱，24h后将冻存管转入液氮长期保存。