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细胞总胆固醇（酯酶法）菲律宾（FILIPIN）荧光染色试剂盒产品说明书

发布时间：2025/7/3 9:46:43 阅读次数：23

细胞总胆固醇（酯酶法）菲律宾（FILIPIN）荧光染色试剂盒产品说明书

主要用途
细胞总胆固醇（酯酶法）菲律宾（FILIPIN）荧光染色试剂是一种旨在通过使用胆固醇酯酶和荧光染料菲律宾（FILIPIN）特异性与胆固醇结合，形成复合体，并产生蓝色荧光现象，以此检测总胆固醇的权威而经典的技术方法。该技术经过精心改良、成功实验证明的。主要适用于各种细胞（动物、人体等）或培养细胞中总胆固醇分布的检测。广泛用于细胞病理生理的研究。产品严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定，荧光清晰。

技术背景
胆固醇（cholesterol）是一类称之为固醇类（sterols）或聚类异戊二烯（polyisoprenoid）或三萜皂甙元（triterpene）的多环化合物（polycyclic compound）。其分子式为 cholest-5-en-3β-ol。胆固醇以游离（free form）和脂化结合（ester）两种形式广泛存在于所有动物组织中，主要以非脂化形式存在于细胞膜中。在膜功能和脂代谢以及激素合成中起着重要作用。菲律宾（FILIPIN）是一类由四种同分异构体的多烯抗生素（polyene   antibiotics）或多马霉素（polyene macrolide）的总称。源自于 S. FILIPINENSIS 细菌的培养液中。其分子式为 C35H58O11，分子量为 654.8。首先在胆固醇酯酶（cholesterol esterase）的水解下，酯化胆固醇（cholesterel   ester）转化为游离胆固醇，然后使用菲律宾与所有游离胆固醇结合形成聚集体或复合物，产生荧光。

产品内容
清理液（Reagent A）        毫升
固着液（Reagent B）        毫升
水解液（Reagent C）        毫升
抗干扰液（Reagent D）    毫升
染色液（Reagent E）        毫升
产品说明书        1 份

保存方式
保存水解液（Reagent C）和染色液（Reagent E）在－20℃冰箱里，避免光照；其余的保存在 4℃冰箱里；有效保证 6 月

用户自备
荧光显微镜：用于样品染色后观察分析

实验步骤
一、样本固着处理
1 ．准备 1 个 48 孔细胞培养板的细胞或载波片的细胞
2 ．小心抽去 48 孔细胞培养板里的培养液
3 ．小心加入 xx 微升清理液（Reagent A），铺满整个样品表面
4 ．小心移去清理液（Reagent A）
5 ．重复实验步骤 3 至 4 二次
6 ．小心加入 xx 微升固着液（Reagent B），铺满整个样品表面
7 ．室温下孵育30 分钟
8 ．小心移去固着液（Reagent B）
9 ．小心加入 xx 微升清理液（Reagent A），清洗样品表面
10 ．小心移去清理液（Reagent A）
11．重复实验步骤 9 至 10 二次

二、样本染色处理
1 ．小心加入 xx 微升水解液（Reagent C），铺满整个样品表面
2 ．室温下孵育 1 小时（注意：可以延长至 4 小时，避免干枯）
3 ．小心移去水解液（Reagent C）
4 ．小心加入 xx 微升清理液（Reagent A），清洗样品表面
5 ．小心移去清理液（Reagent A）
6 ．重复实验步骤 4 至 5 一次
7 ．小心加入 xx 微升抗干扰液（Reagent D），铺满整个样品表面
8 ．室温下孵育 10 分钟
9 ．小心移去抗干扰液（Reagent D）
10 ．小心加入 xx 微升染色液（Reagent E），铺满整个样品表面
11．室温下孵育 30 分钟，避免光照
12 ．小心移去染色液（Reagent E）
13 ．小心加入 xx 微升清理液（Reagent A），清洗样品表面
14 ．小心移去清理液（Reagent A）
15 ．重复实验步骤 13 至 14 二次
16 ．小心加入 xx 微升清理液（Reagent A）
17 ．即刻在荧光显微镜下观察：激发波长：340nm；散发波长：430nm――胆固醇阳性呈现蓝色荧光

注意事项
1 ．本产品为 20 次（48 孔细胞培养板）操作
2 ．操作时，须戴手套
3 ．操作时，避免污染母液
4 ．试剂溶液在样品表面时，避免有气泡存在，同时确保铺满样品表面
5 ．样品染色完成后，即刻进行荧光显微镜观察
6 ．荧光容易受到光漂白（photobleach），建议使用抗淬灭剂Ⅰ-12058.2
7 ．本产品使用载玻片细胞染色后，可用于电镜分析
8 ．本产品适合各种规格的培养细胞：载玻片，载玻片培养皿，35mm 培养皿，和各种培养孔板，须相应调整处理液：

操作容器        建议处理液规格
载玻片        100 微升
载玻片培养皿    1 毫升
35mm 培养皿    1 毫升
96 孔培养板    100 微升
48 孔培养板    200 微升
24 孔培养板    500 微升
12 孔培养板    1 毫升
6 孔培养板        2 毫升
25cm2 细胞培养瓶    3 毫升

9 ．本公司提供系列组织细胞生物化学成分染色试剂产品

质量标准
1 ．本产品经鉴定性能稳定
2 ．本产品经鉴定荧光清晰

使用承诺
极威生物秉着“信誉至上、客户满意、质量承诺”的宗旨为我们的用户提供优质产品和服务。用户收到货后，应按照产品说明书上的规定妥善保管并在有效期内使用。我们的产品在销售前已作严格的质量鉴定，保证说明书所述的使用效果。在货到后 10 天内若发现确属本产品的质量问题，请立即以书面形式（实验报告）与本公司联系，并将该产品退回，经检验确系产品质量所致，本公司负责更换产品。如系使用者错误操作所致，本公司不承担由此造成的损失。

友情提醒
IF IT DOESN’T WORK ， RECHECK YOUR EXPERIMENT TO SEE WHAT YOU DID WRONG。

订购信息
单组份订购信息
编号                           名称                    规格
G&VS80079. 1         细胞总胆固醇（酯酶法）菲律宾荧光染色试剂盒    20 次
G&VS80079. 1A     清理液（Reagent A）                毫升
G&VS80079. 1B     固着液（Reagent B）                毫升
G&VS80079. 1C     水解液（Reagent C）                毫升
G&VS80079. 1D    抗干扰液（Reagent D）             毫升
G&VS80079. 1E    染色液（Reagent E）                毫升
G&VS12058.2    抗淬灭剂Ⅰ                毫升

试剂盒订购信息
产品编号        名称                            规格
G&VS80059.1    细胞总游离胆固醇菲律宾（FILIPIN）荧光染色试剂盒            50 次
G&VS80059.2. 1    特殊石蜡切片总游离胆固醇菲律宾（FILIPIN）荧光间接染色试剂盒        10 次
G&VS80059.2.2    特殊石蜡切片总游离胆固醇菲律宾（FILIPIN）荧光直接染色试剂盒        50 次
G&VS80059.3    冰冻切片总游离胆固醇菲律宾（FILIPIN）荧光染色试剂盒        50 次
G&VS80079.1    细胞总胆固醇（酯酶法）菲律宾（FILIPIN）荧光染色试剂盒        20 次
G&VS80079.2. 1    特殊石蜡切片总胆固醇（酯酶法）菲律宾（FILIPIN）荧光间接染色试剂盒    10 次
G&VS80079.2.2    特殊石蜡切片总胆固醇（酯酶法）菲律宾（FILIPIN）荧光直接染色试剂盒    20 次
G&VS80079.3    冰冻切片总胆固醇（酯酶法）菲律宾（FILIPIN）荧光染色试剂盒        20 次