关于商城

商城指南

支付方式

配送方式

售后服务

胞浆内钙离子浓度荧光（Fura Red）检测试剂盒产品说明书

发布时间：2025/7/10 11:05:01 阅读次数：1

胞浆内钙离子浓度荧光（Fura Red）检测试剂盒产品说明书

主要用途
胞浆内钙离子浓度荧光（Fura Red）检测试剂是一种旨在通过胞浆钙离子特异性荧光探针Fura-Red-AM，与钙离子结合后，其荧光强度显著增强，在荧光酶标仪下测量不同激发波长下相对荧光峰值的比值，来测定细胞浆总钙离子浓度的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种活体细胞（动物、人体等）或冰冻切片组织细胞浆钙离子的浓度检测。产品严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定，检测敏感。

技术背景
钙是人体中的一种重要电介质和矿物质，占1150克。其中99％的钙以氟磷灰石钙（calcium fluorophosphate apatite）形式存在于骨组织中。非骨组织钙成分主要存在于细胞内。钙具有两种主要形式：一种是非弥散型蛋白结合钙，其构成约40％至50％的血清中的总钙含量；另一种为弥散型游离钙，其进一步分成具有活性的复合钙（complexed calcium）和离子钙（ionized calcium）。钙对神经肌肉兴奋性（neuromuscular excitability）、血液凝固、酶的激活、离子跨膜运输、释放神经传导介质、信使传导等方面起着重要作用。在细胞内，钙离子主要储存在线粒体和内质网等细胞器中。其中细胞浆钙离子在调节钙离子通道，维持细胞内环境钙离子平衡方面起着重要作用。细胞浆钙的检测包括沉淀法、EDTA鳌合滴定法、火焰光度法（flame photometry）、原子吸收分光光度法等技术，但容易受到钠、钾、磷酸盐、硫酸盐的干扰，或者受限于仪器的特殊的要求，以及需要细胞浆分离。Fura-Red AM（acetoxy-methyl ester），为Fura 2衍生物，一种具有细胞膜通透性，与钙离子结合产生荧光的染料，通过其不同激发波长420nm/480nm产生的荧光信号比（散发波长550nm）来精确测定细胞浆内钙离子水平。

产品内容
清理液（Reagent A）      40毫升
染色液（Reagent B）      30微升
介导液（Reagent C）     600微升
饱和液（Reagent D）         2毫升
阴性液（Reagent E）         2毫升
裂解液（Reagent F）         200微升
产品说明书                1份

保存方式
保存染色液（Reagent B）和介导液（Reagent C）在－20℃冰箱里，避免光照；其余的保存在4℃冰箱里；有效保证6月

用户自备
1.5毫升离心管：用于工作液配制的容器
细胞培养箱：用于染色孵育
黑色96孔板：用于样品操作的容器
荧光酶标仪：用于荧光分析
（共聚焦）荧光显微镜：用于荧光染色观察

实验步骤
一、测定准备
1．设定好荧光酶标仪：激发波长420nm和480nm，散发波长550nm；增益倍数100至200
2．测定开始前，将－20℃冰箱里的试剂盒中的染色液（Reagent B）室温下融化，然后分别移出30微升介导液（Reagent C）和1.5微升染色液（Reagent B）到新的1.5毫升离心管，标记为染色工作液，并放在暗室里备用。然后进行下列操作。

二、荧光酶标仪检测
1．准备1个黑色96孔板，标记为：细胞样品孔、空白对照孔（不含细胞）、最大对照孔（含细胞）
2．小心抽去细胞样品孔和最大对照孔的培养液
3．加入100微升清理液（Reagent A）到细胞样品孔里
4．加入100微升饱和液（Reagent D）到最大对照孔里
5．加入100微升阴性液（Reagent E）到空白对照孔里
6．分别加入10微升染色工作液到所有孔里
7．轻轻摇动黑色96孔板，混匀
8．放进37℃细胞培养箱里孵育60分钟，避免光照
9．小心抽去细胞样品孔里的上清液
10．小心加入100微升清理液（Reagent A）到细胞样品孔里
11．重复实验步骤9和10一次
12．放进37℃细胞培养箱里孵育30分钟
13．加入5微升裂解液（Reagent F）到最大对照孔里
14．放进37℃细胞培养箱里孵育15分钟
15．即刻放进荧光酶标仪测读：获得相对荧光单位（relative fluorescence unit；RFU）包括样品RFU420nm、样品RFU480nm、空白对照孔RFU420nm、空白对照孔RFU480nm、最大对照孔RFU420nm、最大对照孔RFU480nm
16．计算样品细胞浆钙离子浓度

{【（样品RFU420nm/样品RFU480nm）－（空白对照孔RFU420nm/空白对照孔RFU480nm）】÷【（最大对照孔RFU420nm/最大对照孔RFU480nm－样品RFU420nm/样品RFU480nm）】}X（空白对照孔RFU480nm/最大对照孔RFU480nm） X 390（纳摩尔/升；解离常数）

三、（共聚焦）或荧光显微镜检测
1．准备1个待测的细胞爬片样品
2．小心加上500微升清理液（Reagent A），覆盖样品表面
3．小心移去样品上的清理液（Reagent A）
4．移取300微升清理液（Reagent A）到新的1.5毫升离心管
5．加入30微升染色工作液，混匀
6．小心加上上述含有染色工作液的溶液到样品上，覆盖样品表面
7．放进37℃细胞培养箱里孵育60分钟，避免光照
8．小心移去样品上的染色工作液
9．小心加上500微升新鲜的清理液（Reagent A）
10．小心移去清理液（Reagent A）
11．小心加上500微升新鲜的清理液（Reagent A）
12．放进37℃细胞培养箱里孵育30分钟
13．小心移去清理液（Reagent A）
14．盖上盖玻片
15．即刻在（共聚焦）荧光显微镜下进行观察：激发波长420至480nm，散发波长550nm（细胞浆钙离子呈现红色荧光）

四、冰冻切片检测
1．准备1个待测的冰冻切片
2．小心加上500微升清理液（Reagent A），覆盖切片样品表面
3．小心移去样品上的清理液（Reagent A）
4．移取300微升清理液（Reagent A）到新的1.5毫升离心管
5．加入30微升染色工作液，混匀
6．小心加上上述含有染色工作液的溶液到切片样品上，覆盖样品表面
7．放进37℃细胞培养箱里孵育60分钟，避免光照
8．小心移去切片上的染色工作液
9．小心加上500微升新鲜的清理液（Reagent A）
10．小心移去清理液（Reagent A）
11．小心加上500微升新鲜的清理液（Reagent A）
12．放进37℃细胞培养箱里孵育30分钟
13．小心移去清理液（Reagent A）
14．盖上盖玻片
15．即刻在（共聚焦）荧光显微镜下进行观察：激发波长420至480nm，散发波长550nm（组织细胞浆钙离子呈现红色荧光）

注意事项
1．本产品为20次（显微镜）或60次（96孔板）操作
2．操作时，须戴手套
3．可以使用荧光分光光度仪检测
4．如果细胞内酯酶缺失，则建议使用微注射（microinjection）技术
5．避免使用EDTA等处理样品
6．孵育反应完成后即刻进行荧光测定
7．如果待测样品浓度过高或过低，可以调整样品浓度
8．检测敏感度可达纳摩尔级钙浓度范围
9．本产品不适宜于细胞流式仪检测
10．本公司提供系列钙生化检测试剂产品

质量标准
1．本产品经鉴定性能稳定
2．本产品经鉴定检测敏感

使用承诺
上海极威生物科技有限公司秉着“信誉至上、客户满意、质量承诺”的宗旨为我们的用户提供优质产品和服务。用户收到货后，应按照产品说明书上的规定妥善保管并在有效期内使用。我们的产品在销售前已作严格的质量鉴定，保证说明书所述的使用效果。在货到后10天内若发现确属本产品的质量问题，请立即以书面形式（实验报告）与本公司联系，并将该产品退回，经检验确系产品质量所致，本公司负责更换产品。如系使用者错误操作所致，本公司不承担由此造成的损失。

友情提醒
IF IT DOESN’T WORK， RECHECK YOUR EXPERIMENT TO SEE WHAT YOU DID WRONG。

订购信息
单组分订购信息
编号            名称                规格
G&VS10152.2    胞浆内钙离子浓度荧光（Fura Red）检测试剂盒    20次
G&VS10152.2A    清理液（Reagent A）                40毫升
G&VS10152.2B     染色液（Reagent B）                30微升
G&VS10152.2C    介导液（Reagent C）                600微升
G&VS10152.2D     饱和液（Reagent D）            2毫升
G&VS10152.2E     阴性液（Reagent E）                2毫升
G&VS10152.2F     裂解液（Reagent F）                1毫升

试剂盒订购信息
产品编号            名称                规格
G&VS50097.1    细胞钙离子浓度比色法定量检测试剂盒        20次
G&VS50097.2    组织钙离子浓度比色法定量检测试剂盒        20次
G&VS50097.3    体液钙离子浓度比色法定量检测试剂盒        20次
G&VS50097.4    食物钙离子浓度比色法定量检测试剂盒        20次
G&VS50097.5    环境钙离子浓度比色法定量检测试剂盒        20次
G&VS70036    血清钙比色法定量检测试剂盒            50次
G&VS10152.1    胞浆内钙离子浓度荧光（Fura-2）检测试剂盒    20次
G&VS10152.2    胞浆内钙离子浓度荧光（Fura-red）检测试剂盒    20次
G&VS10152.3    细菌胞浆内钙离子浓度荧光（Fura-2）检测试剂盒    20次
G&VS10153    线粒体内钙离子浓度荧光检测试剂盒        20次
G&VS10154    细胞内钙离子水平动态变化荧光检测试剂盒        20次
G&VS10267    内质网内钙离子浓度荧光检测试剂盒        20次
G&VS10157.1    细胞钙离子浓度荧光定量检测试剂盒        20次
G&VS10157.2    组织钙离子浓度荧光定量检测试剂盒        20次
G&VS10157.3    体液钙离子浓度荧光定量检测试剂盒        20次
G&VS10157.4    食物钙离子浓度荧光定量检测试剂盒        20次
G&VS10157.5    环境钙离子浓度荧光定量检测试剂盒        20次
G&VS80045.1    石蜡样品冯库萨（VON KOSSA）钙染色试剂盒    50次
G&VS80045.2    冰冻样品冯库萨（VON KOSSA）钙染色试剂盒    50次
G&VS80045.3    细胞冯库萨（VON KOSSA）钙染色试剂盒        50次
G&VS80045.4    全组织冯库萨（VON KOSSA）钙染色试剂盒        10次
G&VS80046.1    石蜡样品茜素红（ALIZARIN RED S）钙染色试剂盒    50次
G&VS80046.2    冰冻样品茜素红（ALIZARIN RED S）钙染色试剂盒    50次
G&VS80046.3    细胞茜素红（ALIZARIN RED S）钙染色试剂盒    50次
G&VS80046.4    全组织茜素红（ALIZARIN RED S）钙染色试剂盒    10次