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悬浮细胞收集的处理方法

发布时间：2025/7/10 11:36:42 阅读次数：2

悬浮细胞收集的处理方法：

注意：瓶中运输培养基不能继续使用，请换用按照说明书培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。培养悬浮细胞建议用未经TC处理的培养瓶。

STEP1
静置4h后，请将瓶内所有细胞收集至6个15ml 的离心管110g(1000rpm) 离心3min, 将所有离心后的细胞沉淀收集到一个T25 培养瓶内，平放10分钟，镜下观察细胞密度，拍照记录后放入培养箱中继续培养，第二天密度达到80%即可传代；
STEP2
悬浮细胞半换液处理：将培养瓶竖立在培养箱中静置1小时左右，轻轻吸掉瓶内3ml 培养基，然后补给3ml 的细胞完全培养基，传代的时候可以直接补给5ml 细胞完全培养基，分两个培养瓶培养，一般这样传代3次左右可以离心传代一次，去掉死细胞；

STEP3
悬浮细胞传代方法：观察细胞无碎片无死细胞的情况下，建议直接加入新鲜的细胞完全培养基直
接分瓶即可。

关于售后
1.常温细胞为 T25 培养瓶发货，若收到细胞后状态差，活率低，请当天拍照记录，发给技术支持或者销售人员；根据情况，不能调整或者调整培养一周后，状态没好转的，可给予重发细胞。
2.收到细胞24小时内出现细菌、真菌、霉菌污染给于免费重发。 48小时检测支原体阳性无条件重发。 (吸取上清至冰箱保存48小时之后检测的不算准确结果)收到细胞有污染现象，请于收货当天及时拍照记录，提供清晰的照片(照片为原培养瓶未拆封外观照和显微镜下细胞状态的照片);在培养瓶未开封的情况下，可给予重发细胞。
3.若收到细胞有漏液现象，请于收货当天及时拍照记录(照片为原培养瓶未拆封外观照和显微镜下细胞状态的照片);请保留原瓶培养基，并将原瓶培养基转移到一个无菌的容器内培养，培养3天内出现细胞污染现象，可给予重发细胞。
4.收到常温细胞时状态无异常，用户自身操作导致细胞污染、细胞状态不佳、细胞冻存后复苏不活的，不予免费重发。
5. 细胞培养时，使用其他非细胞培养体系外源试剂处理导致细胞出现问题，不予免费重发。
6.非细胞出厂质量问题，客户自身操作导致的细胞死亡，自收货日起一个月内可以申请低价二次购买折扣(原代细胞除外)。
7.细胞相关实验受多种因素影响，非细胞鉴定问题，实验数据不理想的，不予退/换细胞。

常温细胞收货注意事项

一、悬浮细胞：
1、观察是否有异常现象
收到货后如发现有任何异常现象，如污染，漏液，细胞漂浮等，请拍照记录，并及时联系我们销售人员或者技术支持。

2、将培养瓶放置培养箱中静止
用75%酒精擦拭瓶身，封口膜可以不用撕去，将 T25 瓶置于培养箱中静置2~4h 后进行操作， (注意：悬浮细胞请将培养瓶竖立在培养箱中静置),在此期间，请查看说明书以确定细胞属性。

3、观察细胞密度是否超过80%
◎观察细胞密度，若超过80%则可正常传代处理(有些原代细胞不可传代，请仔细查阅细胞说明书并根据实际情况决定),首次传代推荐比例1:2。
注意：传代比例指的是同等大小容器的前提下，如需更换培养容器，则需换算培
养容器贴壁面积，例如：一个T25瓶的贴壁面积相当于1个6cm 的皿，1个10cm
的皿的贴壁面积相当于3个T25瓶，1个T75瓶的贴壁面积相当于3个T25瓶。

◎观察细胞密度，若细胞密度不到80%, 建议吸出运输培养基，加入5ml 细胞完全培养基，培养到可传代密度。