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发布时间:2025/7/11 11:04:20 阅读次数:1
人骨髓间充质干细胞说明书
Catalog:JW-CL-2124
一. 产品简介
1 、产品名称:人骨髓间充质干细胞
2 、组织来源:骨髓组织
3 、产品规格:25cm2 培养瓶/5×105cells
4、细胞简介:
人骨髓间充质干细胞(BMSC)分离自骨髓;骨髓是机体的造血组织,位 于身体的许多骨骼内。成年动物的骨髓分两种:红骨髓和黄骨髓。红骨髓能制 造红细胞、血小板和各种白细胞。血小板有止血作用,白细胞能杀灭与抑制各 种病原体,包括细菌、病毒等;某些淋巴细胞能制造抗体。因此,骨髓不但是 造血器官,它还是重要的免疫器官。骨髓是存在于长骨(如肱骨、股骨)的骨 髓腔和扁平骨(如髂骨)的稀松骨质间的网眼中,是一种海绵状的组织,能产 生血细胞的骨髓略呈红色,称为红骨髓。出生时,红骨髓充满全身骨髓腔,随 着年龄增大,脂肪细胞增多,相当部分红骨髓被黄骨髓取代,最后几乎只有扁 平骨骨髓腔中有红骨髓。骨髓基质系统内存在的骨髓间充质干细胞是一种除造 血干细胞以外的、具有高度自我更新能力和多向分化潜能的干细胞,可以向骨、 软骨、肌组织、皮肤、脂肪、神经等多种组织分化,因此可以作为组织工程中 的种子细胞。在骨髓中,BMSC 占骨髓有核细胞总数的 0.001%-0. 1% ,含量极 低。骨髓间充质干细胞的体外培养条件要求较高,在培养过程中,受贴壁时间、 种植密度、血清含量、培养温度和培养基 pH 值等条件的影响。
本公司生产的人骨髓间充质干细胞采用冲洗骨髓、密度梯度离心、差速贴 壁法结合培养基筛选制备而来,细胞总量约为 5×10^5cells/瓶;细胞经 CD34、 CD90 免疫荧光鉴定,纯度可达 90%以上,且不含有 HIV-1 、HBV 、HCV 、支 原体、细菌、酵母和真菌等。
5 、培养基信息:
培养基内容:MSCM 基础培养基、FBS 、 Penicillin、Streptomycin 等
我们推荐使用人骨髓间充质干细胞专用培养基(PYH094)作为体外培养 人骨髓间充质干细胞专用培养基。
二.细胞发货及鉴定图片
(1)细胞状态照片:细胞发货时发送至少3 张细胞发货前电子照片;
(2)细胞鉴定照片:若增加鉴定服务,提供 3 套鉴定照片;
三.使用方法
在极威技术部标准操作流程下,人骨髓间充质干细胞可传 3-5 代左右;
建议您收到细胞后尽快进行相关实验。
客户收到细胞后,请按照以下方法进行操作。
1 、取出 25cm2 培养瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入 37℃ , 5%CO2 细胞 培养箱中静置 3-4h ,以稳定细胞状态;
2 、待细胞达到 80%汇合时准备进行传代培养;
3 、细胞传代
1) 吸出 25cm2 培养瓶中的培养基,用 PBS 清洗细胞一次;
2)添加 0.25%胰蛋白酶消化液约 1ml 至培养瓶中,37℃温浴 3min 左右;倒置 显微镜下观察,待细胞回缩变圆后吸弃消化液,再加入完全培养液终止消化;
3) 用吸管轻轻吹打混匀,按 1 :2 适当的比例进行接种传代,然后补充新鲜的 完全培养基至 5ml ,放入 37℃ , 5%CO2 细胞培养箱中培养;
4)待细胞完全贴壁后,培养观察。之后每隔 2-3 天更换新鲜的完全培养基。
四.售后注意事项
1. 培养基于4℃条件下可保存3-6个月;
2. 在细胞培养过程中,请注意保持无菌操作;
3. 细胞从收货之日起(若冻存细胞,复苏3日内,收到请尽快复苏),出现 任何问题,请提供相应的图片,免费重发;
4. 若重发后,细胞除下述四种情况外,再免费重发,其他情况不予免费重 发,若需要二次购买,按照市场价的65折优惠,若需要三次购买,按照 市场价的5折优惠。若仍出现问题,建议客户把细胞相关实验委托我方完 成,不再收取细胞共享费用。
l 细胞运输途中遭遇的各种问题,细胞丢失、瓶身破损、培养液漏 液等,重发;
l 细胞污染问题,给我们提出真实的实验图片和结果,重发 ;
l 冻存的细胞复苏后或常温细胞静置后,绝大多数细胞未存活(提 供清晰的细胞照片),重发;
l 存活细胞,静置24小时后,绝大多数细胞未存活,重发;
5. 人源细胞(STR)或大小鼠细胞系(种属鉴定)鉴定结果存在争议,可以 在收到细胞3个月内提供真实有效的检测证明,本公司承诺无条件退还细 胞款项以及产生鉴定费用。
6. 客户在细胞培养过程中,有任何技术问题可以联系技术售后,我们随时 给予解答。
7. 售后需要提供资料:收到时整体培养瓶拍照、静置后细胞照片、3日内细 胞照片等;图片尽量清晰。
温馨提示:
l 客户收到细胞后请务必仔细阅读细胞注意事项,确保细胞的培养 条件一致;
l 台盼蓝染色法鉴定细胞活力;
l 细胞培养瓶中的培养液约为100ml ,收到细胞后,把培养方瓶里 的培养基收集放置于4℃备用(路上运输培养基营养会有所损耗 建议使用时补加2%血清,待细胞状态恢复后,培养液一半用瓶内 的,一半用户自备的,使细胞逐渐适应培养条件,以免因不适应 而造成生长状态不佳。)
由于使用所用试剂、操作环境、操作手法不同,以上仅供各实验室参考!
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