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永生化人心肌成纤维细胞说明书

发布时间：2025/7/14 11:49:59 阅读次数：20

永生化人心肌成纤维细胞说明书

产品信息
细胞名称：永生化人心肌成纤维细胞
产品货号：JW-Y043
产品规格：5×105cells/T25 培养瓶
组织来源：原代人心肌成纤维细胞
生长特性：贴壁生长
细胞形态：成纤维细胞样
培养体系：永生化人心肌成纤维细胞专用培养基
传代比例：1:2
消化时间：2-3min
冻存条件：无血清细胞冻存液（科研级）
培养环境：气相：空气，95%；二氧化碳，5% 。温度：37℃。
注意事项：收集细胞瓶中完全培养基做过渡对比培养

细胞介绍
永生化人心肌成纤维细胞分离自心脏组织；心肌由心肌细胞构成的一种肌肉组织成纤维细胞是结缔组织中最常见的细胞，可合成和分泌胶原纤维、弹性纤维、网状纤维及有机基质，并且在外伤等因素刺激下，部分纤维细胞可重新转变为幼稚的成纤维细胞，其功能活动也得以恢复，参与组织损伤后的修复。心肌成纤维细胞较心肌细胞更容易贴壁且具有分裂很强的增殖能力，很容易生长成优势细胞。心脏成纤维细胞构成心肌层绝大多数的非心肌细胞，对心肌功能的正常运作起着重要作用。

常温细胞收货后处理方法
1.    收到细胞后，首先观察培养瓶是否完好，若发现培养瓶有破裂，培养基外溢、浑浊等现象，请及时拍照并与我们联系。
2.    用 75%酒精对培养瓶表面进行消毒处理，将培养瓶置于细胞培养箱中静置培养 2~4 h，以恢复细胞状态。
3.    静置完成后，取出培养瓶，显微镜下观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照保存（40 × , 100× ,200×各一张）前三天照片为重要售后依据。如发现细胞异常请及时与我们联系，如果细胞签收三天内未与我们联系，则默认为收货良好。
4.    若细胞密度超过 80% ，则可以根据提供的细胞培养步骤进行传代；若细胞密度未达到 80% ，收集瓶中完全培养基，留 6mL 培养基，放入细胞培养箱中继续培养。

细胞培养步骤
1.    复苏细胞：从液氮灌中或-80℃冰箱中查找到需要复苏的细胞，水浴锅提前打开预热 37℃。
1)    将查找到的冻存细胞在 37℃水浴中迅速摇晃解冻；
2)    将冻存管中的细胞移至含 5ml 完全培养基的离心管中，1000rpm 离心 5min；
3)    弃去上清液，补加 4-6mL 完全培养基后吹匀，接种于 T25 培养瓶中（或6cm 皿中），培养过夜，第二天换液并检查细胞密度。
2.    细胞传代：如果细胞密度达80%-90% ，即可进行传代培养。
1)    弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次；
2)    加 1-2mL 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于 37℃培养箱中消化2-3min ，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后，加 5ml 以上含 10%血清的完全培养基终止消化；
3)    轻轻吹打细胞，完全脱落后吸出至离心管中，1000rpm 离心 5-8min，弃去上清液，补加 1-2mL 完全培养基后吹匀；
4)    按 5-6mL/瓶补加完全培养基，将细胞悬液按 1:2 到 1:3 的比例分到新的含 5-6 mL 完全培养基的培养皿中或者培养瓶中。
（即 1 个 T25 传代接种至 2~3 个 T25 或者 2~3 个直径为 6cm 的培养皿）
3.    细胞冻存：细胞收集参照传代步骤 1~2 ，按冻存数量加入无血清冻存液后直接放-80℃ 冰箱过夜，后续可转入液氮罐中长期保存。

注意：在技术部标准操作流程下，永生化人心肌成纤维细胞可传20代左右；建议您收到细胞后尽快进行相关实验。
细胞发货及鉴定图片
1.细胞状态照片：细胞发货时发送至少 3 张细胞发货前电子照片；
2.细胞鉴定照片：若增加鉴定服务，提供 3 套鉴定照片；

关于细胞株售后服务
1.培养基于4℃条件下可保存3-6个月；
2.在细胞培养过程中，请注意保持无菌操作；
3.细胞从收货之日起（若冻存细胞，复苏3日内，收到请尽快复苏），出现任何问题，请提供相应的图片，免费重发；
4.若重发后，细胞除下述四种情况外，再免费重发，其他情况不予免费重发。若仍出现问题，建议客户把细胞相关实验委托我方完成，不再收取细胞共享费用。
u 细胞运输途中遭遇的各种问题，细胞丢失、瓶身破损、培养液漏液等，重发；
u 细胞污染问题，给我们提出真实的实验图片和结果，重发；
u 冻存的细胞复苏后或常温细胞静置后，绝大多数细胞未存活（提供清晰的细胞照片），重发；
u 存活细胞，静置24小时后，绝大多数细胞未存活，重发；
5.人源细胞（STR）或大小鼠细胞系（种属鉴定）鉴定结果存在争议，可以在收到细胞3个月内提供真实有效的检测证明，本公司承诺无条件退还细胞款项以及产生鉴定费用。
6.客户在细胞培养过程中，有任何技术问题可以联系技术售后，我们随时给予解答。
7.售后需要提供资料：收到时整体培养瓶拍照、静置后细胞照片、3日内细胞照片等；
图片尽量清晰。

温馨提示：
客户收到细胞后请务必仔细阅读细胞注意事项，确保细胞的培养条件一致；
台盼蓝染色法鉴定细胞活力；
细胞培养瓶中的培养液约为70mL ，收到细胞后，把培养方瓶里的培养基收集放置于4℃备用（传代后1瓶用发货瓶里面的培养液、一瓶用户自备的，进行对比培养，使细胞逐渐适应培养条件，以免因不适应而造成生长状态不佳。）

由于使用所用试剂、操作环境、操作手法不同，以上仅供各实验室参考！