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大肠杆菌ATCC25922化学感受态细胞

发布时间：2025/8/15 10:18:06 阅读次数：82

CAT#:JW-26-034
干冰运输、-80℃保存

大肠杆菌ATCC25922化学感受态细胞

产品及特点
本产品是大肠杆菌ATCC25922菌株的化学感受态细胞，它具有下列特点：
1.大肠杆菌ATCC25922菌株是最常用的药敏质控菌株，主要用于药物的敏感度测试；也可用于培养基、染色剂、生化试剂和各种大肠杆菌相关试剂盒的性能测试。
2.大肠杆菌ATCC25922菌株未经人工改造，为野生型菌株，是头孢氨苄、卡那霉素、庆大霉素、氯霉素、四环素、新霉素等抗生素的敏感型标准菌种。
3.大肠杆菌ATCC25922菌株不含核酸酶endA1突变，体内核酸酶含量较高，提取质粒时推荐使用质粒提取试剂盒中去蛋白液以去除菌体内大量的核酸酶。
4.大肠杆菌ATCC25922感受态细胞经特殊工艺制作，pUC19质粒（2686bp，AmpR）检测转化效率>1E7 cfu/μg DNA。
5.本产品足够10次100μL的转化实验。
6.本产品只能用于科研。
规格及成分
本产品采用十二孔盒包装
成分                                编号            规格        包装
大肠杆菌ATCC25922
化学感受态细胞            26-034a    100mL×10    1.5mL压盖管
使用手册                       26-034sc    1 份                无

运输及保存
干冰运输、-80℃保存，有效期半年；

自备试剂
筛选培养基

使用方法
1.取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100μL，可以根据实际情况分装使用。以下实验以50μL感受态细胞为例。
2.待感受态细胞融化后，向感受态细胞悬液中加待转化的DNA溶液（质粒DNA或连接反应液），如果是纯化好的质粒DNA，可以加1ng，如果是连接反应液，可以加1-3μL。
3.用移液器轻轻吹打混匀后冰浴30分钟。
4.42℃热击45-60秒。此步对转化非常重要，时间长短也需要准确。
5.迅速将离心管转移到冰浴中，冰上静置2-3分钟。
6.每个离心管中加入1mL无菌的2YT或LB液体培养基（不含抗生素）混匀。
7.37℃摇床200rpm振荡培养60分钟使抗菌素基因表达。
8.取100μL涂盘到含有氯霉素和质粒抗菌素基因对应的抗生素的2YT或LB固体培养皿上。剩下的900μL菌液可以放4℃，等转化结果出来后再处理。如果转化菌落数过少，可以将剩下的菌液离心弃800μL上清（培养基），用剩下的100μL培养基重悬细菌后再涂盘。
9.将平板平放于37℃直至液体被吸收（一般需要10分钟）。
10.倒置培养，37℃培养12-16小时。

关联产品
即用型LB培养基（含各种抗生素）