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发根农杆菌C58C1化学感受态细胞

发布时间：2025/8/20 10:33:17 阅读次数：18

CAT#:JW-26-088
干冰运输、-80℃保存

发根农杆菌C58C1化学感受态细胞

产品及特点
本产品是由发根农杆菌（Agrobacterium rhizogenes）C58C1菌株制备化学感受态细胞，可用于DNA转化。
发根农杆菌（Agrobacterium rhizogenes）是根瘤菌科(Rhizobiaceae)农杆菌属(Agrobacterium)的一种革兰氏阴性土壤细菌，它能够感染大多数双子叶植物和少数单子叶植物以及个别裸子植物。C58C1发根农杆菌菌株含有pRiA4b农杆碱型Ri质粒，具有广泛的宿主范围（蔷薇科，夹竹桃科，豆科，茄科，黄芩，烟草等），同时具有链霉素，利福平抗性。
本产品基因型是：
Agrobacterium rhizogenes (strR,rifR ) pRiA4b (agropine type）
本产品具有以下特点：
1.使用pCAMBIA2301质粒检测转化率＞1×10E4 cfu/μg DNA。
2.本产品具有链霉素和利福平抗性。
3.本产品足够10次100mL的转化实验。
4.本产品只可用于科研。
规格及成分
本产品采用11孔盒包装
成分                      编号          规格              包装
发根农杆菌C58C1
化学感受态细胞    26-088a    100 μL×10    1.5mL本色管
使用手册              26-088sc    1 份                 无

运输及保存
干冰运输、-80℃保存，有效期半年。

自备物品
TY液体培养基

使用方法
1.1.取-80℃保存的C58C1发根农杆菌感受态于室温或手心片刻待其部分融化，处于冰水混合状态时插入冰中。
2.每 100μl 感受态加入0.01-1μg质粒DNA（转化效率较高，第一次使用前最好做预实验确定所加质粒的量），用手快速、剧烈拨打管底混匀或用枪吹吸混匀，依次放于冰中静置5分钟、液氮5分钟、37℃水浴5分钟、冰浴5分钟。
3.冰浴中拿出放室温，加入700μl无抗生素的TY液体培养基，于28℃振荡培养2小时。46000rpm离心一分钟收菌，留取100μl左右上清轻轻吹打重悬菌块涂布于含相应抗生素的TY平板上，倒置放于28℃培养箱培养2-3天。
注意：
4.加入质粒时体积不应大于感受态体积的1/10；质粒不纯或存在乙醇等有机物污染，转化效率急剧下降；质粒增大一倍，转化效率下降一个数量级。
5.混匀质粒时应用手指快速拨打管底或用枪吹吸混匀，务必使质粒快速、均匀分散开，与感受态细胞充分接触。转化高浓度的质粒可相应减少最终用于涂板的菌量。
6.平板上阳性克隆密度过大时，由于营养不足，阳性克隆生长变慢，菌落变小，为了获得大的菌落，应减少质粒用量或降低涂板的菌量。
7.C58C1具有链霉素、利福平抗性，不可用于具有链霉素抗性或利福平抗性质粒的转化。

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