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发布时间:2025/8/22 10:17:29 阅读次数:23
CAT#:JW-220107-1
低温运输,-20℃保存
单细胞裂解液(RNA专用)
产品及特点
单细胞裂解液(RNA专用)是单细胞RNA提取专用裂解液,产品经过多次优化,含有多种去污剂、变性剂和盐,可有效抑制核酸酶在裂解过程中对核酸的破坏,维持核酸的稳定性。单细胞裂解物可以直接用于测序和RT-PCR等试验。本产品足够使用200次以上,一次可以处理1-1000个细胞。
规格及成分
本产品采用塑料袋包装
成份 编号 规格 包装
单细胞裂解液(RNA专用) 220107 1 mL 1.5 mL白盖管
使用手册 220107sc 1份 1份
运输及保存
低温运输,﹣20℃保存,有效期一年。
自备物品
PBS溶液
使用方法
如何制备单个细胞取决于实验样品和实验者所拥有的仪器设备,此处所列步骤仅针对培养细胞、实体组织、淋巴细胞和卵裂球(2-8细胞胚胎)等材料,对其他材料(如干细胞克隆、胚囊、胚胎组织等),用户需自行选用合适的方法制备单细胞。对已经处于单细胞悬浮状态的细胞(如FACS分离细胞、卵细胞等)则可以跳过制备过程而直接进入单细胞裂解步骤。
按下面手册,本产品1次可以处理1-1000个细胞。下面的步骤是以制备单个细胞/裂解反应为例,如果要制备N个细胞/裂解反应的悬浮液,浓度需要相应调整。
一、用培养细胞或实体组织制备单细胞
1.按常规胰酶方法处理培养细胞或组织(一般是用PBS洗涤两次,再用0.25 % Trypsin-EDTA处理2分钟),将细胞重悬于自备的液体细胞培养基中。
2.按常规方法对细胞进行计数。
3.转移100-4000个细胞到新离心管中,400×g离心4分钟沉淀细胞,小心弃上清(培养基)。
4.将细胞沉淀重悬于50 μL自备的PBS溶液中,使其终浓度为2-80个细胞 /μL。
5.在干净的培养皿上点加数个含5 μL PBS溶液的小液滴,也可以在96孔板或0.2 mL PCR管中进行。
6.在第一个小液滴中加入5 μL细胞悬浮液,然后再从第一个小液滴中转移5
μL到第二个小液滴,如此系列稀释样品数次,使得其浓度接近每2.5 μL液
体中含1个细胞,放冰上待用。
二、用单细胞裂解液裂解细胞
7.在显微镜下用显微注射仪取2.5 μL样品,确认含一个细胞后,将其转移到一个含2.5 μL本产品的PCR管中。最好同时设置无样品的阴性对照(2.5 μL样品中不含细胞)。
8.细胞将在5分钟内裂解。
9.裂解液可以立即用于后续实验(如PCR或RT-PCR),也可以放冰上数小时待用。如果长期不用,需要放-80℃保存。使用时从-80℃中取出后,放冰上融化后即可使用。
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