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发布时间:2025/8/26 16:36:11 阅读次数:15
CAT#:JW-220116-50
常温运输及保存
血清血浆RNA提取试剂盒
产品及特点
本产品是基于离心柱层析法的用于从血浆/血清中方便、快速、可靠地提取RNA的产品。它具有下列特点:
1.操作简单,整个过程只需要20分钟左右。
2.不需要额外在洗柱液中补加乙醇。
3.安全无毒,不需要使用苯酚和氯仿等有机溶液。
4.与后续的RT-PCR和RT-LAMP兼容。
5.适用于各种动物血清和血浆。
规格及成分
本试剂盒使用带垫大扁盒包装
成 份 编 号 规格 包装材料
血清血浆RNA裂解液 220116a 30 mL 30mL本色瓶
上柱结合液 990602 40 mL 60mL本色瓶
离心吸附柱 220144 50套 拉封塑料袋
通用洗柱液 220143 50 mL 60mL本色瓶
RNA洗脱液 971207 10 mL 10mL本色瓶
使用手册 220116sc 1份 无
运输及保存
常温运输及保存,柱式血清/血浆游离RNA裂解液长期(1月以上)放置时需要放4℃。有效期一年。
自备试剂
无,但需要自备RNase-free 的1.5 mL离心管(耗材)。
使用方法
1.如果有N个样品,标记N+2个1.5-2 mL螺旋盖塑料离心管(如Sarstedt CAT#:JW-782.694.006),多出的一个为样品制备阳性对照(PC),一个为样品制备阴性对照(NC)。为避免污染,建议不要使用压盖式塑料离心管。在每个管上做个标记,以在后续操作时区别向心面和离心面。
2.在离心管中分别加入0.2 mL血清或血浆,在PC管中加入已经确认有阳性RNA的血清或血浆,在NC管中加入已经确认没有阳性RNA的血清或血浆,也可用水替代。
3.加入0.6 mL血清血浆RNA裂解液到各离心管中,振荡30秒混匀后室温放置10分钟。注意:血清血浆游离RNA裂解液在4℃放置后可能会产生结晶,使用前必须放在65℃水浴使沉淀彻底溶解并充分摇匀后再取用。
4.加入0.8 mL上柱结合液到离心管中,颠倒混匀后转移一半的混合液(0.8 mL)到离心吸附柱中,室温放置2分钟。
5.12,000 rpm室温离心1分钟,弃收集管中的穿透液,把离心吸附柱放回到收集管中。
6.将剩余的另外一半裂解液(0.8 mL)转移到离心吸附柱中,室温放置2分钟。
7.12,000 rpm室温离心1分钟,弃收集管中的穿透液,把离心吸附柱放回到收集管中。
8.加入0.7 mL通用洗柱液到离心吸附柱中,12,000 rmp室温离心1分钟,弃收集管中的穿透液,把离心吸附柱放回到收集管中。
9.加入0.3 mL通用洗柱液到离心吸附柱中,12,000 rmp室温离心1分钟,弃收集管中的穿透液,把离心吸附柱放回到收集管中。此为第二次洗涤,可以跳过。
10.12,000 rpm室温离心1分钟(干甩),弃含穿透液的离心管。
11.将干甩后的离心吸附柱套入到一个自备的1.5 mL离心管中,在离心吸附柱的滤膜的中部加入30uL RNA洗脱液,然后室温放置2分钟。
12.12,000 rpm室温离心1分钟,离心管中的溶液即为纯化的RNA溶液。
13.RNA样品可以直接用于后续RT-PCR或RT-LAMP,也可放-80℃长期保存。
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