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菌体内毒素清除剂

发布时间：2025/8/26 16:53:52 阅读次数：29

CAT#:JW-211217-250
常温运输及保存

菌体内毒素清除剂

产品及特点
内毒素(即lipopolysaccharides，LPS)是E.coli细胞壁的主要成分，传统的去除内毒素的方法是将内毒素和DNA一起纯化出来，然后再用各种方法去除其中的内毒素，操作繁琐，DNA回收率低。本产品可以直接把E.coli表面的内毒素去除，从根本上避免了内毒素对后续操作（如质粒DNA提取，重组蛋白质提取）的污染。本产品具有下列特点：
1.首个在菌体收集阶段去除内毒素的产品，从源头上避免了内毒素跟DNA和胞浆蛋白的接触，从根本上防止了可能产生的污染。
2.操作简单快速，用酶溶液温和清洗菌体3-4次即可去掉细菌表面的内毒素，只需要10分钟左右时间，不需要复杂仪器设备。
3.高效，能去除99%以上的内毒素。
4.跟各种质粒DNA提取、基因组DNA提取和蛋白质提取等操作兼容，DNA丢失率只有10%左右（其他方法DNA丢失率可以高达50%）。
5.不影响DNA和绝大部分蛋白质的活性，处理过的质粒DNA可用于转染实验。
6.既可小规模使用(在1.5 mL离心管内)，也可放量用于大规模无内毒素质粒DNA提取和无内毒素蛋白质纯化。

规格及成分
本产品采用大立盒包装
成份        编号    规格    包装
菌体内毒素清除剂    211217    250 mL    250 mL本色瓶
使用手册        211217sc    1份    无

运输及保存
常温运输和保存，有效期一年。

自备试剂
无

使用方法
一：用于菌液小于3 mL的样品
1.收集1.5-3 mL E.coli饱和菌液，12,000 rpm离心1分钟，弃上清，得到细菌沉淀。
2.加入1 mL本产品温和混匀后10,000-12,000 rpm离心1分钟，弃上清（含内毒素）。
3.再重复上述操作3-4次，得到的菌体可以直接进入后续的无内毒素质粒DNA提取或无内毒素蛋白质提取程序。
二：用于菌液多于3 mL的样品
整个操作同上，只是在15或50 mL 塑料离心管中进行，离心速度不能超过离心管的承受力，本产品的用量按比例增加。

背景资料
内毒素的分子结构
外毒素vs.内毒素

区别要点    外毒素（Exotoxin）                                                                                                              内毒素（Endotoxin）
存在部位    由活的细菌释放至细菌体外,为细菌的代谢产物                                                                    为细菌细胞外壁结构成份，细胞破裂后释出
细菌种类    以革兰氏阳性菌多见                                                                                                               革兰氏阴性菌多见
化学特性    蛋白质（分子量27～900 KDa），易被分解破坏，热不稳定（60℃以上能迅速破坏）        磷脂一多糖一蛋白质复合物（毒性主要为类脂A），不易被分解破坏，耐热（60℃耐受数小时）
毒性作用    强，微量对实验动物有致死作用（以ug计量）。各种外毒素有选择作用，引起特殊病变，不引起宿主发热反应。抑制蛋白质合成，有细胞毒性、神经毒性、紊乱水盐代谢等                                                               稍弱，对实验动物致死作用的量比外毒素为大。各种细菌内素的毒性作用大致相同。引起发热、弥漫性血管内凝血、粒细胞减少血症、施瓦兹曼现象等
抗原性    强，可刺激机体产生高效价的抗毒素。经甲醛处理可脱毒成为类毒霉，仍有较强的抗原性，可用于人工自动免疫    弱，刺激机体对多糖成份产生抗体，不形成抗毒素，不能经甲醛处理成为类毒素而使毒性消失
其他    几乎无发热性，对肿瘤细胞无影响                                                           很强的发热性，破坏肿瘤细胞
例子    白喉毒素，肉毒毒素，破伤风毒素厌氧菌毒素，溶血性链球菌毒素等                     大肠杆菌，霍乱绿脓菌，沙门氏菌，赤痢菌等。

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