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病毒DNA纯化试剂盒（沉淀法）

发布时间：2025/8/28 15:50:19 阅读次数：15

CAT#:JW-220139-50
常温运输和保存

病毒DNA纯化试剂盒（沉淀法）

产品及特点
本产品是专门用于从血清、血浆、脑脊液等液体样品中提取病毒DNA的产品，它具有下列特点：
1.回收率高，可以达到90%以上，高于绝大部分基于离心柱的提取方法。
2.灵敏度高，通过PCR检测到的最终灵敏度可以达到30-50拷贝/mL。
3.一管式操作，不使用离心柱，整个操作过程均在室温下完成。
4.安全无毒，不需要使用苯酚和氯仿等有机溶液。
5.可以处理各种液体样品，包括血清、血浆、尿液、脑脊液、唾液、眼泪、培养基等，还可以处理拭子，粪便，实体组织等（但需要前处理）。
6.处理量大，如果加上病毒离心富集步骤，最多可以处理1.5 mL液体病毒样品。
7.与PCR、荧光PCR、LAMP等后续扩增技术兼容。
8.本产品足够50次微量提取，每次微量提取可以处理0.2 mL（不需要离心浓缩）或1.5 mL的样品（需要离心浓缩）。
9.本产品只能用于科研，不能用于临床。

规格及成分
本产品采用塑料袋包装
成份        编号    规格    包装
DNA病毒裂解液    220139    30 mL    30 mL本色瓶
使用手册        220139sc    1份    1份

运输及保存
常温运输和保存、有效期一年。

自备试剂
异丙醇，75%乙醇

使用方法
1.在1.5 mL螺旋盖塑料离心管(不要使用压盖式塑料离心管)中加入0.2 mL液体样品（血清、血浆、尿液、脑脊液、唾液、眼泪等等）。
a)如果是口腔拭子、咽喉拭子等各种拭子样品，则将拭子放入0.2 mL自备生理盐水中挤压出液体，然后取0.2 mL进行DNA提取。
b)如果是粪便等半固定样品，则取约0.3 mL的样品，加入0.3 mL自备生理盐水，震荡重悬，离心取0.2 mL上清进行DNA提取。
c)如果血液，细胞培养液等含细胞的液体，可以离心用上清，也可以直接取用，但后者提取的DNA中有细胞的基因组DNA。
d)如果样品是实体组织或培养细胞，则需要在自备生理盐水中匀浆后离心，用0.2 mL上清液（含病毒）进行DNA提取，但此种情况下最后得到的DNA不可避免的会含有基因组DNA。
e)如果液体样品中的病毒需要富集，可以使用1.5 mL上述方法得到的液体在4℃ 24,000×g冷冻离心60分钟，移弃1.3 mL、用剩下的0.2 mL继续操作。
2.在0.2 mL样品中加入0.6 mL DNA病毒裂解液，振荡30秒混匀后室温放置10分钟。
3.振荡30秒混匀后加入0.7 mL自备的异丙醇，振荡30秒混匀后，15,000×g室温离心15分钟。
4.移弃上清，注意不要触及管底的DNA沉淀，加入1.0 mL 75%乙醇，振荡数秒后15,000×g室温离心5分钟。
5.移弃上清，注意不要触及管底的DNA沉淀。再短暂离心数秒，移弃残留液体（残留的乙醇会影响后续反应）。
6.如果此时离心面的管壁上有可见的膜状沉淀，属于正常现象（常见于血清血浆样品）。加入20 μL自备的TE缓冲液，用移液枪仔细吹打离心管管底和管壁的膜状沉淀，使其溶解。溶解液混浊或有少量不溶物是正常现象。不要离心只取上清使用，因为不溶沉淀物中含有DNA，必须取混合液使用（哪怕很浑浊）。
7.样品可以直接取适量用于PCR，也可保存于-20℃长期保存。

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