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血液DNA纯化试剂盒（过柱法）

发布时间：2025/8/29 13:41:12 阅读次数：0

CAT#:JW-220151-50
常温运输和保存

血液DNA纯化试剂盒（过柱法）

产品及特点
本产品是基于硅胶膜离心吸附柱原理的、专门用于从新鲜或冷冻的动物(包括人和禽类)抗凝全血中提取基因组DNA的试剂盒。它具有下列特点：
1.提取的基因组DNA纯净，OD260/280在1.8-2.0之间，无蛋白质和RNA污染。
2.可直接用于后续的PCR、酶切、杂交等实验。
3.产量高，一般为1-10 μg/mL全血(对哺乳动物血液)。
4.操作简单，整个过程约20分钟，全室温操作，适合大规模样品处理。
5.用量广泛，每次可以处理少达20 μL（对禽类动物血液）或多达1 mL的血液(对哺乳动物血液)。
6.安全无毒，本试剂盒对人体无毒，无腐蚀性和刺激性气味。
7.本产品只能用于科研。

规格及成分
本产品使用大扁盒包装
成份                                                编号        规格    包装材料
红细胞裂解液（DNA纯化用）      220171   25 mL    30 mL本色瓶
血液DNA纯化溶液A                  220151a   25 mL    30 mL本色瓶
离心吸附柱                                220144    50套   塑料袋
通用洗柱液                              220143    50 mL    60 mL本色瓶
DNA洗脱液（基因组纯化专用）     220125    10 mL    10 mL本色瓶
使用手册                                     220151sc    1份        1份

运输及保存
常温运输和保存，有效期一年

自备试剂
抗凝血样本

使用方法
1.将0.5 mL红细胞裂解液（DNA纯化用）加入到0.02-1 mL新鲜或抗凝血液中，如果是冷冻血液，需要先37℃水浴融化再加入红细胞裂解液（DNA纯化用），吹打混匀。注意：红细胞裂解液（DNA纯化用）非常容易长菌，取用需要在无菌条件下进行。
a)哺乳动物，血液使用量以300 μL以下为宜，使用量越大产量越高，但产率会降低。如果血液多于300 μL，重复1-2步两次可以提高产率。
b)禽类动物，血液使用量以20 μL以下为宜，可以从第3步做起。
2.室温12,000-15,000 rpm离心5分钟，沉淀呈粉红色，小心倾去上清。
3.再短暂离心30秒，吸弃残留的液体。此步有利于后面的细胞裂解，但一般可以省略。
4.向有沉淀的离心管内加入0.5 mL血液DNA纯化溶液A（血液DNA纯化溶液A有少量晶体沉淀，用前需要摇晃均匀），用移液枪吹打使沉淀充分悬浮起来。此步目的是裂解细胞，释放DNA，所以吹打越充分越好。
5.静置2分钟待溶液变清亮后，将液体转移到离心吸附柱中并静置2-5分钟，以使DNA与硅胶膜充分结合。
6.12,000 rpm离心30秒，DNA将吸附到膜上，弃收集管中的废液。
7.加入0.7 mL的通用洗柱液，12,000 rpm离心30秒，弃收集管中的废液。
8.加入0.3 mL的通用洗柱液，12,000 rpm离心30秒，弃收集管中的废液。
9.12,000 rpm离心30秒，甩干残留液体。此步很重要，以去除膜上残留通用洗柱液，否则会影响后续反应。
10.将离心吸附柱置于一新的1.5 mL塑料离心管（自备）中，加入适量50 μL DNA洗脱液（基因组纯化专用），室温放置2分钟。如果将DNA洗脱液在65℃预热后再使用，洗脱DNA的效果会更好。
11.12,000 rpm离心30秒，离心管底溶液即DNA溶液。可以立即使用或放冰箱长期保存。

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