关于商城

商城指南

支付方式

配送方式

售后服务

改良Lowry法蛋白定量试剂盒

发布时间：2025/9/1 14:02:53 阅读次数：9

CAT#:JW-220168-1000
常温运输和保存

改良Lowry法蛋白定量试剂盒

产品及特点
Folin酚（福林酚）试剂（磷钼酸和磷钨酸混合物）跟蛋白质中含酚氨基酸（色氨酸和酪氨酸）发生颜色反应，可用于测定蛋白质浓度，但灵敏度较低。Lowry在此基础上加入Biuret（双缩脲）反应步骤，即先在碱性条件下使蛋白质和Cu+形成复合物，再使其与Folin酚试剂发生显色反应，产物在750nm检测。Lowry法使不含酚的蛋白质也能被检测出来，灵敏度是单独使用Folin酚的10倍左右，是双缩脲反应的200倍，因此成为早期检测蛋白浓度的主要方法。Lowry法检测原理图如下：

传统Lowry法受到很多常用的试剂（如DTT、糖、甘油、Triton等）干扰，步骤繁琐。本公司对Lowry法进行改良，具有下列特点：
1.即开即用，不需要单独购买每个成分再配制。
2.能抵抗部分干扰物（如一定浓度SDS或其他去污剂）的干扰。
3.检测线性范围广，在2-100 mg，检测上限比经典Lowry法高30%-40%。
4.本产品只能用于科研。

规格及成分
本产品采用大扁盒包装
成分                                            编号                规格            包装
改良Lowry法蛋白定量溶液A1    220168a1        208 mL    250 mL本色瓶
改良Lowry法蛋白定量溶液A2    220168a2        16 mL      30 mL本色瓶
改良Lowry法蛋白定量溶液A3    220168a3        16 mL    30 mL本色瓶
改良Lowry法蛋白定量溶液B      220168b          80 mL      125 mL本色瓶
改良Lowry法蛋白定量溶液C      220168c       80 mL   125 mL本色瓶
福林酚                                 11-S221147       10 mL      10 mL棕色瓶
BSA标准品，2 mg/mL          220565          1 mL         1.5 mL本色管
使用手册                                    220168sc        1份            无

运输及保存
常温运输和保存，但BSA标准品需要-20℃保存，有效期12个月。

自备试剂
去离子水，蛋白样品，样品缓冲液。

使用方法
一、工作液的制备
1.制备溶液A：将16 mL改良Lowry法蛋白定量溶液A2和16 mL改良Lowry法蛋白定量溶液A3加入到装改良Lowry法蛋白定量溶液A1的塑料瓶中，混合均匀得到240 mL改良Lowry法蛋白定量溶液溶液A。
2.制备改良Lowry法蛋白定量工作液：将改良Lowry法蛋白定量溶液A、改良Lowry法蛋白定量溶液B和改良Lowry法蛋白定量溶液C按3：1：1的体积比混合得到改良Lowry法蛋白定量工作液。此工作液可以室温放置2-3周，所以最好用多少配多少。如果发现改良Lowry法蛋白定量溶液B或改良Lowry法蛋白定量溶液C有沉淀，需37℃溶解并摇匀后再使用。
3.制备福林酚工作液：在装有10 mL福林酚的棕色塑料瓶中加入90 mL去离子水，摇晃混匀待用。此工作液在避光条件下可以放置6个月。
二、试管法
4.先用去离子水将BSA标准品，2 mg/mL稀释到50 mg/mL，然后在标记的试管中加入下列成分（单位：mL）。注意：每个样品最好做三个稀释度，每个稀释度最好设置三次重复，阴性对照和标准品也最好做三次重复。
标准品（每个做三次重复，此处只列出一个）
编号            BSA标准，50 mg/mL       水      总体积
阴性对照      0                                         0       200
1                    0                                        200      200
2           25                                       175      200
3                 50                                       150      200
4                   100                                     100      200
5                  150                                      50      200
6                 200                                      0   200
样品（以1个样品、3个稀释度为例，
每个稀释度三个重复，此处只列出一个）
编号                     样品                                                                       总体积
1                     200（稀释度1）                                                200
阴性对照1    200（用稀释度1稀释的溶解蛋白样品的缓冲液）         200
2                     200（稀释度2）                                                        200
阴性对照2       200（用稀释度2稀释的溶解蛋白样品的缓冲液） 200
3                     200（稀释度3）                                                         200
阴性对照3       200（用稀释度3稀释的溶解蛋白样品的缓冲液）      200
5.每管中加入200 mL改良Lowry法蛋白定量工作液，振荡混匀后室温反应10分钟。
6.每管中加入100 mL福林酚工作液，振荡混匀后室温反应30分钟。
7.用容量为0.5 mL、光径为1 cm的玻璃比色杯或聚苯乙烯比色杯测定750nm的光吸收。测定时，先空白（即阴性对照）后样品，测定样品和BSA标准品时，先低浓度后高浓度。测定未知样品前需要将杯子清洗干净，必要时可以用甲醇清洗吸附到比色杯壁上的染料。
8.根据标准品三个重复的平均值绘制标准曲线，然后根据未知样品的光吸收从标准曲线中查得其对应的浓度。

三、96微孔板法
9.同上，只是反应用96微孔板设置，用酶标测试仪750 nm测定光吸收。
四、样品中干扰物质的去除
10.如果样品中有干扰Lowry法蛋白定量的物质，可用自备试剂按下法去除：用水将样品调到体积为200 mL,加入20 mL的0.15%去氧胆酸钠，混匀，室温放置10分钟。加入20 mL的72%的TCA，室温放置5分钟。3000 g离心15分钟，小心去除上清。用200 mL水溶解蛋白沉淀后以用于Lowry法测定。

关联产品
总蛋白含量测定试剂盒（双缩脲法）