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发布时间:2025/9/2 9:26:36 阅读次数:0
CAT#:JW-220213
常温运输和保存
PAGE胶DNA回收试剂盒(过柱法)
产品及特点
聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)是目前分离小片段DNA的主要方法,但是目前市场上没有专门的产品用于从聚丙烯酰胺凝胶中回收DNA片段。为此本公司开发了从PAGE凝胶中回收DNA片段的试剂盒,它具有如下特点:
1.高效,采用高效的溶液使DNA快速从PAGE中扩散出来,使回收效率50-90%(跟片段大小和胶浓度等因素有关)。
2.可回收50 bp-500 bp的DNA片段(如果片段长度超过5100bp,建议使用琼脂糖分离回收方法)。
3.既可以回收单链DNA,也可以回收双链DNA。
4.操作简单,整个过程只需要离心机,不需要其他设备。
5.纯度高,采用能专一结合DNA的硅胶膜是杂质和DNA分离,回收的DNA可直接用于酶切、连接、PCR登等多种分子生物学实验。
6.储存方便,试剂盒可以在室温放置数月,不影响其质量。
7.本产品足够50次微量DNA纯化。
8.本产品只能用于科研。
规格及成分
本产品采用大扁盒包装
成份 编号 规格 包装
PAGE胶DNA回收溶液A 220213a 25 mL 30 mL本色瓶
PAGE胶DNA回收溶液B 220213b 25 mL 30 mL本色瓶
通用溶胶液 60202A 50 mL 60 mL本色瓶
通用洗柱液 220143 50 mL 60 mL本色瓶
离心吸附柱 220144 50 套 塑料袋
DNA洗脱液(胶回收专用) 170603 10 mL 10 mL本色瓶
使用手册 220213sc 1份 无
运输及保存
常温运输,4℃保存(长期)或室温保存(短期),有效期一年。
自备物品
待回收样本,PAGE胶,1.5mL离心管。
使用方法
1.切取含DNA片段的PAGE凝胶(100 mg左右,尽可能多地把多余的胶切除,否则会影响回收效率),放入1.5 mL离心管中,用移液枪头尽可能捣碎(最好先在酒精灯上将枪头的口烧密闭再用于捣碎),捣得越细越好。
2.按重量比为1:2的比例加入PAGE胶DNA回收溶液A(100 mg PAGE凝胶需要加入200 μL PAGE胶DNA回收溶液A)。
3.将离心管水平放置并室温摇晃1-10小时时,使DNA从PAGE凝胶中扩散出来。如果DNA片段超过500 bp,摇晃时间应适当延长。提高温度到45-65℃,DNA扩散速度会增加。
4.12000-15000 g室温离心2分钟,将含DNA的上清液转移到新的离心管中。
5.再用100 μL的PAGE胶DNA回收溶液A洗涤凝胶一次并与上步得到的上清合并。
6.加入900 μL通用溶胶液和0.3 mL PAGE胶DNA回收溶液B,混合均匀后将离心管中的溶液分两次转移到离心吸附柱中,每次转移后都先静置3分钟,然后再12000-15000 g离心1分钟,倒掉收集管中的液体。
7.加入600-800 μL通用洗柱液于离心柱中。
8.12000-15000 g离心1分钟,倒弃收集管中的废液。
9.12000-15000 g离心半分钟以去除离心吸附柱中的残留液体。
10.将离心吸附柱置于一新的干净的离心管中,加入25-50 μL通用洗脱液,静置3分钟。
11.12000-15000 g离心1分钟,离心管底部所得溶液即为纯化的DNA溶液,可立即用于后续实验或者放冰箱长期保存。
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