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发布时间:2025/9/5 15:56:41 阅读次数:29
CAT#:JW-220332-1000
常温运输及保存
超快蛋白质银染试剂盒
产品及特点
蛋白质银染的原理是银离子(Ag+)可与蛋白质等大分子有机物形成稳定的复合物,然后用还原剂如甲醛在碱性环境下使 Ag+还原成银颗粒,可把蛋白电泳带染成黑褐色。它主要用于聚丙烯酰胺凝胶电泳染色,其灵敏度比考马斯亮蓝高 100 倍。但常规的银染方法由固定、氧化、染色、显影、终止等步骤组成,操作十分繁琐,尤其不适用于大批量实验。为解决此问题,本公司推出本产品,其特点如下:
1.超快,整个过程只需要不到 60 分钟。
2.操作简单,只有固定(30 分钟)、染色(10 分钟)和显影(10 分钟)三步。
3.灵敏度比考马斯亮蓝染色高 100 倍,能检测到 10ng 的蛋白质条带。
4.三个成分中的两个都是现用现配,可重复性好。
5.本规格可配制 1000mL 蛋白银染溶液 A(染色液),实际使用次数根据 PAGE
胶大小不同而不同。
6.只可用于科研。
规格及成分
本产品采用大扁盒包装
成份 编号 规格 包装
蛋白银染溶液A 组分一(干粉) 220332a1 2 g 10mL棕色瓶
蛋白银染溶液A 组分一 220332a2 100 mL 100 mL本色瓶
蛋白银染溶液 A 组分三,10× 220332a3 100 mL 100 mL本色瓶
蛋白银染溶液 B 组分一,10× 220332b1 100 mL 100 mL本色瓶
蛋白银染溶液 B 组分二 220332b2 5 mL 5 mL本色瓶
使用手册 220332sc 1 份 无
运输及保存
常温运输及保存,有效期一年。
自备试剂
去离子水,乙醇和乙酸。
使用方法
一:配制银染固定液100 mL(对mini PAGE 胶)
1.将自备的40mL无水乙醇、10mL乙酸和50mL去离子水充分混合即可使用。本试剂盒不含这些成分。
二:配制蛋白银染溶液 A
2.需要配制的蛋白银染溶液 A(染色液)的体积完全跟 PAGE 胶的大小相关,一般的mini-PAGE 胶需要 20-30mL。下面的用量是针对配制100mL蛋白银染溶液A。如果配制的蛋白银染溶液A的体积不是100mL,则需按比例改变各成分用量。在一干净烧杯中加入下列成分搅拌混匀即可。蛋白银染溶液A需要新鲜配制。
成分 用量
自备的去离子水 80 mL
蛋白银染溶液A成分一 0.2 g
蛋白银染溶液A成分二 10 mL
蛋白银染溶液A组分三 10 mL
三:配制蛋白银染溶液 B
3.需要配制的蛋白银染溶液 B(显色液)的体积完全跟 PAGE 胶的大小相关,一般的mini-PAGE胶需要 20-30mL。下面的用量是针对配制100mL蛋白银染溶液 B。如果配制的蛋白银染溶液B的体积不是100mL,则需按比例改变各成分用量。在一干净烧杯中加入下列成分搅拌混匀即可。蛋白银染溶液B需要新鲜配制。
成分 用量
自备的去离子水 89.5 mL
蛋白银染溶液B成分一 10 mL
蛋白银染溶液B组分二 0.5 mL
四:银染
4.PAGE电泳或SDS-PAGE电泳结束后,将胶转移到装有100 mL银染固定液的瓷盘中,摇晃30分钟以去除干扰银染的成分(如甘氨酸、SDS、DTT、甘油等)。注:此步很重要,否则银染背景很高。
5.用100 mL自备的去离子水漂洗2次,每次2分钟。
6.将PAGE胶转移到适当体积的蛋白银染溶液A中,使蛋白银染溶液A在轻柔摇晃过程中能够淹没PAGE胶。室温摇晃处理10分钟。
7.倒掉蛋白银染溶液A,用100 mL自备的去离子水快速漂洗2次,每次半分钟。
8.将PAGE胶转移到适当体积的蛋白银染溶液B中,使蛋白银染溶液B在轻柔摇晃过程中能够淹没PAGE胶。室温摇晃直到蛋白电泳条带显现(一般需要10分钟左右)。
9.迅速将PAGE胶置于适当背景下照相留存。胶的颜色肯能会逐渐加深,如果有
必要保存胶,可以用自备的5%的乙酸终止显色。
关联产品
质谱兼容型蛋白质银染试剂盒,脱银试剂盒。
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