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cccDNA纯化试剂盒（沉淀法）

发布时间：2025/9/19 15:24:46 阅读次数：7

CAT#:JW-220501-50
CAT#:JW-220502-50
常温运输和保存

cccDNA纯化试剂盒（沉淀法）

产品及特点
cccDNA（covalently closed circular DNA）就是共价闭合环状DNA，它是几乎所有质粒DNA和某些病毒DNA（如HBV cccDNA）的存在形式，也常见于一些高等生物的疾病细胞中。其在人和其他真核细胞中的cccDNA又叫eccDNA（Extrachromosomal circular DNA，染色体外环状DNA) ，它们通常是从正常基因组中分离或脱落下来，游离于染色体基因组之外的环状DNA分子。对酵母、线虫、纤毛虫和哺乳动物的eccDNA进行全基因组序列分析后发现，eccDNA的大小从几十个碱基到几十万个碱基对不等，不仅携带完整或部分基因，而且还携带基因间序列，且部分包含复制起始点，能独立完成复制。eccDNA包括small polydispersed circular DNA (spcDNA)和telomeric circles (t-circles)。因此分离纯化这些DNA对后续研究具有重要的意义。为此本公司专门开发了纯化cccDNA的试剂盒，它具有下列特点：
1.即开即用，用户不用自己开发专用的试剂盒。
2.能有效分离cccDNA和非cccDNA。
3.本产品基于沉淀法，回收cccDNA效率高。
4.跟后续的酶切电泳，核酸扩增等研究兼容。
5.本试剂盒足够50次cccDNA纯化实验。
6.本产品只能用于科研，不能用于临床。
规格及成分
220501-50包装：塑料袋包装
成份                              编号                    规格       包装材料
cccDNA纯化溶液A    220501-50            50次      30 mL棕色玻璃瓶
220502-50包装：小扁盒包装
成份                         编号                    规格包装材料
cccDNA纯化溶液A    220502a         30 mL    30 mL棕色玻璃瓶
cccDNA纯化溶液B    220502b           10 mL    10 mL棕色玻璃瓶
cccDNA纯化溶液C    220502c           30 mL    30 mL本色瓶

运输及保存
常温运输和保存，有效期一年。

自备试剂
75%乙醇

使用方法
1.在0.2mL含有cccDNA的液体样品中加入0.6mL cccDNA纯化溶液A，充分吹打或振荡2分钟。
2.加入0.2mL cccDNA纯化溶液B，振荡1分钟。
3.室温14000 rpm离心3分钟，小心将上清液（约0.6mL）转移到新的塑料离心管中。
4.在离心管中加入等体积（0.6mL） cccDNA纯化溶液C，充分颠倒混匀。
5.室温14000rpm离心15分钟，小心弃上清，不要吸走管底微量的沉淀。
6.加入1mL 自备的75%乙醇后，立即室温14000rpm离心1分钟，小心弃上清，不要吸走管底微量的沉淀。
7.将离心管再次14000rpm离心半分钟，小心吸走残留的液体（约50-100uL）。
8.加入10-100uL 超纯水或TE缓冲液，轻柔吹打溶解后可以立即用于后续实验。长期放置需要放-20℃。

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