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发布时间:2025/9/28 10:21:39 阅读次数:7
CAT#:JW-220615
常温运输,有低温成分
动物和植物天然蛋白释放剂
产品及特点
本产品用于快速提取动物和植物总蛋白,直接用于SDS-PAGE凝胶电泳和Western印迹分析以及蛋白活性测定等。本产品的其主要特点是:
1.提取过程十分简便,匀浆离心即可,整个过程只需要十几分钟。
2.采用独特的温和裂解成分,蛋白保持天然活性。
3.适用于各种动植物组织材料,包括新鲜或冰冻的材料。
4.得到的提取物可以直接用于SDS-PAGE、2D电泳、Western印迹分析以及蛋白活性测定等下游实验。
5.一次可以处理100 mg左右的动物或植物样品,足够进行几十次SDS-PAGE mini胶电泳检测。
6.本产品只能用于科研。
规格及成分
成份 编号 规格 包装材料
动物和植物天然蛋白释放剂 220615a 50 mL 60 mL棕色瓶
5×SDS-PAGE上样液 220624 1 mL 1.5 mL白盖管
使用手册 220615sc 1份 1份
本产品使用小扁盒包装
运输及保存
常温运输和保存,但收到货后5×SDS-PAGE上样液需-20℃保存,频繁使用时可以放4℃保存,产品有效期为一年。
使用方法
一:匀浆法
注意:对致密的实体组织(如肌肉),最好用Polytron剪切式匀浆机匀浆处理。
1.称取动物或植物组织样品100 mg,剪刀剪成黄豆大小,转移到10-15 mL的塑料离心管中。
2.加入1 mL动物和植物蛋白释放剂,在冰上用Polytron剪切式匀浆机匀浆,直到没有肉眼可见的组织块。为了避免产热,可以分多次匀浆,其间放冰上让匀浆液冷却。
3.将匀浆液全部转移到1.5 mL的塑料离心管中。
4.4℃ 12,000×g离心10分钟,组织残渣碎片将形成沉淀。
5.将上清液转移至一新的1.5 mL塑料离心管中即得到蛋白溶液,可置于-70℃冰箱保存或立即使用。如果要立即进行SDS-PAGE电泳,可取部分到离心管中,加入5×SDS-PAGE上样缓冲液使其终浓度为1×(加入样品体积的1/4即可,40 μL样品加入10 μL 5×SDS-PAGE上样缓冲液),在沸水中水浴5分钟后立即上样电泳。
二:直接研磨法
注意:可以使用玻璃和陶瓷的研钵,也可以使用与微量离心管匹配的研磨杵
1.称取动物或植物组织样品100 mg,剪刀剪成黄豆大小,转移到预冷的研钵或离心管中。
2.加入1 mL动物和植物蛋白释放剂,用研磨杵研磨,直到没有肉眼可见的组织块。
3.将匀浆液全部转移到1.5 mL的塑料离心管中。
4.4℃ 12,000×g离心10分钟,组织残渣碎片将形成沉淀。
5.将上清液转移至一新的1.5 mL塑料离心管中即得到蛋白溶液,可置于-70℃冰箱保存或立即使用。如果要立即进行SDS-PAGE电泳,可取部分到离心管中,加入5×SDS-PAGE上样缓冲液使其终浓度为1×(加入样品体积的1/4即可,40 μL样品加入10 μL 5×SDS-PAGE上样缓冲液),在沸水中水浴5分钟后立即上样电泳。
三:液氮研磨法
注意:最好使用玻璃和陶瓷的研钵
1.取大约100 mg动物或植物组织样品,转移到预冷的研钵中。
2.加入少量液氮,用研磨杵研磨成粉。
3.加入1mL动物和植物蛋白释放剂,然后将溶液全部转移到1.5 mL的塑料离心管中。
4.4℃ 12,000×g离心10分钟,组织残渣碎片将形成沉淀。
5.将上清液转移至一新的1.5 mL塑料离心管中即得到蛋白溶液,可置于-70℃冰箱保存或立即使用。如果要立即进行SDS-PAGE电泳,可取部分到离心管中,加入5×SDS-PAGE上样缓冲液使其终浓度为1×(加入样品体积的1/4即可,40 μL样品加入10μL 5×SDS-PAGE上样缓冲液),在沸水中水浴5分钟后立即上样电泳。
注意:
1.如果4℃ 12,000×g离心10分钟后得到的上清液中还有可见的沉淀,可以将上清转移到一个新的离心管中后再4℃ 12,000×g离心10分钟,以去除可见的小碎片。
2.植物组织中存在有大量的多酚、多糖、色素、次生代谢产物,如果需要除去植物蛋白样品中残存的色素等杂质,可以在最后得到的上清液中加入5倍体积的冷丙酮或冷甲醇,混匀后-20℃放置1小时或过夜,然后4℃ 12,000 rpm离心10 min,弃上清后室温风干3-5分钟,然后将样品溶于自备的后续实验缓冲液中即可。经过此纯化处理后,部分蛋白质可能会发生变性,不能再用于活性检测。
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