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DNA胶回收试剂盒（过柱法）

发布时间：2025/9/30 15:49:30 阅读次数：20

CAT#:JW-220850
常温运输及保存

DNA胶回收试剂盒（过柱法）

产品及特点
本试剂盒用于从琼脂糖凝胶中或DNA反应体系中（如PCR反应体系或DNA连接体系）回收DNA片段。本产品的特点如下:
1.高效，回收效率最高可达90%，回收效率片段大小和胶浓度等因素有关。
2.快速，30分钟左右即可完成回收。
3.洗脱液不需要额外加乙醇。
4.用途广泛，既可用于DNA片段胶回收，也可以用于PCR或其他酶反应回收。
5.范围广，回收DNA的长度范围为50 bp-40 Kb。
6.能回收单链、双链及环状DNA。最大吸附量为10μg双链DNA。
7.回收的DNA可直接用于酶切、连接、PCR、测序等多种分子生物学实验。
8.本试剂盒足够纯化50片含DNA的琼脂糖凝胶条，每片胶条重量不超200 mg。可以纯化50次酶反应，包括PCR反应，反应体积不超过200 μL。
9.本产品只可用于科研。

规格及成分
成份                                      编号          规格        包装
通用溶胶液                          220850      25 mL    30 mL本色瓶
吸附柱活化液                      170602       25 mL    30 mL本色瓶
通用洗柱液                          220143       50 mL    60 mL本色瓶
离心吸附柱                            220144       50 套    塑料袋
DNA洗脱液（胶回收专用）    220125    10 mL    10 mL本色瓶
使用手册                                220850sc   1份        无
本产品使用小扁盒包装

运输及保存
常温运输及保存，有效期为一年。由于通用溶胶液是高盐溶液，因此在低温时容易产生沉淀。如果产生沉淀，需要60℃加热溶解后才可以使用。

自备物品
异丙醇

使用方法
一：琼脂糖胶回收：
1.用干净的刀片切取含DNA片段的琼脂糖凝胶（100 mg左右，尽可能多地把多余的胶切除，否则会影响回收效率），放入一个自备的1.5 mL塑料离心管中称重，按重量比为1：2的比例加入通用溶胶液(0.1 g的琼脂糖凝胶需要加入0.2mL的通用溶胶液)。如果琼脂糖凝胶的浓度大于2%，则需要按1：3的比例加入通用溶胶液溶解胶块。电泳缓冲液可以用TAE、TBE或其他电泳液。回收效果TAE胶一般好于TBE胶。
2.颠倒10分钟使胶完全溶化，每隔2-3分钟振荡数次以促进琼脂糖凝胶的溶化。如果在10分钟内凝胶溶化不完全，可以60℃金属浴以使胶充分溶化。
3.在等待期间，活化离心吸附柱。在离心吸附柱中加入0.5 mL吸附柱活化液，套上收集管后室温放置2分钟，然后12,000 rpm离心半分钟，倒弃穿透液，再将吸附柱套上收集管后待用。活化后的离心吸附柱必须在当天使用。
4.在上柱前，在溶化的胶中加入相当于胶块体积1/2的异丙醇（对100 mg胶块，加50 μL），快速振荡10秒混匀。
5.将溶液转移到离心吸附柱中。
6.将离心吸附柱套在收集管上，静置3分钟。本产品提供的离心吸附柱的最大上样体积为0.8 mL，若溶胶液的总体积大于0.8 mL，一次加不完，可以分多次将溶液加入到吸附柱中。
7.12000 g离心1分钟，倒掉收集管中的穿透液。
8.加入0.7 mL通用洗柱液于离心柱中，12000 g离心1分钟，倒弃收集管中的废液。
9.12000 g离心半分钟以去除离心柱中的残留液体。洗脱DNA前的空甩很重要，其目的是去除膜上残留酒精，否则残留酒精会影响后续DNA反应。
10.将离心柱吸附置于一个自备的塑料离心管中，悬空加入50 μL DNA洗脱液于离心吸附柱硅胶膜的中央。
11.静置3分钟。
12.室温12000 g离心1分钟，离心管底部所得溶液即为纯化的DNA片段，可立即用于后续实验或者放-20℃长期保存。
13.用电泳方法或测OD方法确定回收所得DNA的浓度。
二：PCR或其他酶反应回收
14.按上节第3步活化离心吸附柱。
15.直接在PCR或其他酶反应管中加2倍体积的通用溶胶液，振荡10秒混匀。
16.在反应液和溶胶液的混合液中加入相当于反应体积1/2的异丙醇（对100μL的反应液，加50μL），快速振荡10秒混匀。
17.直接进入上面胶回收操作的第5步并进行后面的操作。

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