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发布时间:2025/10/9 14:07:51 阅读次数:1
CAT#:JW-220702-20
常温运输及保存
中草药DNA纯化试剂盒(沉淀法)
产品及特点
中药的分子鉴定是辨别中药真伪,保证药材质量,促进中药产业现代化的十分重要的手段。但由于日晒,高温烘烤等各种处理极大地破坏了中药材DNA的完整性,同时植物富含的多酚多糖及其氧化物在上述处理过程中也会与DNA发生复杂的化学反应,所以从中药材中提取DNA比从新鲜植物中提取要困难很多。为解决这一问题,本公司上开发了中草药专用核酸纯化试剂盒。其特点如下:
1.适合于大多数植物来源的中药材。
2.得到的DNA纯净,OD260/280一般都在1.6以上。
3.适用于PCR检测,一般在100倍之内的稀释液都能直接作为PCR模板。
4.操作简单,整个过程只需要三十分钟左右。
5.本产品足够20次微量提取,每次可以处理20mg中药材。
6.试剂无毒无害,环保卫生。
7.本产品只能用于科研。
规格及成分
成份 编号 规格 包装
中草药DNA纯化溶液A 220702a 15 mL 15mL本色瓶
中草药DNA纯化溶液B 220702b 15 mL 15mL本色瓶
使用手册 220702sc 1份 无
本产品使用小扁盒包装
运输及保存
常温运输及保存,有效期一年。
自备试剂
氯仿、异丙醇、75%乙醇
使用方法
1.65℃预热中草药DNA纯化溶液A,待其沉淀溶化后,充分摇晃均匀,然后取0.75 mL加入到10-15mL的塑料离心管中并放置于65℃待用。
2.称取20 mg左右的中草药,研磨成粉末(液氮研磨也可),加入到上步预热的中草药DNA纯化溶液A中。如果不能液氮研磨,也可以使用剪切式匀浆机在中草药DNA纯化溶液A中匀浆,匀浆过程中将产生大量泡沫,属于正常现象。
3.将上步所得的混合液置于65℃水浴保温5分钟。
4.将保温后的混合液全部转移到新的1.5mL塑料离心管中(此时匀浆液较为粘稠,可将枪头剪去一截以方便取液。如果有植物碎片,可一起转移)。
5.用台式离心机14000g室温离心3分钟,将上清转移到另一个新的1.5mL塑料离心管中。此步上清液的体积一般为200-700 µL,如果体积超过700 µL,不方便后续操作,多余部分可以不要。有的上清液中会悬浮有少量细小块状物,但对后续操作没有影响,不必进行特殊处理。
6.在上清液中加入等体积的中草药DNA纯化溶液B,上下颠倒30秒充分混匀。此时混合液将呈白色混浊状。
7.冰浴中5分钟。
8.14000 g室温离心3分钟,转移上清到另一个新的1.5mL塑料离心管中。
9.加入0.2 mL的自备氯仿,震荡器上充分振荡30秒混匀。
10.12000-15000 g室温离心3分钟,两相交界面将有白色膜状物。小心转移上清到新离心管中。
11.重复氯仿抽提步骤一次,此步可以有效去除含色素物质。
12.加入等体积的自备异丙醇,上下颠倒30秒混匀。
13.14000 g离心5分钟,弃上清,管底将有微小DNA沉淀。
14.加入1mL自备的75%乙醇,颠倒数次,14000 g离心1分钟,弃上清。
15.重复上步一次。
16.14000 g离心半分钟,移弃管底的50uL左右的残留液体。
17.加入50μL超纯水或TE溶解沉淀。所得DNA溶液即可用于电泳,酶切和PCR等反应。
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