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人甲基化/非甲基化DNA标准品

发布时间：2025/10/13 13:43:33 阅读次数：1

CAT#:JW-221013
低温运输，-20℃保存

人甲基化/非甲基化DNA标准品

产品及特点
甲基化专一PCR必须要使用经过亚硫酸氢钠（biosulfite）修饰的DNA作为模板，此修饰反应需要用非甲基化的DNA和甲基化的DNA作为对照，否则无法判断样品是否甲基化。本产品就是根据此需求而开发，它具有下列特点：
1.本产品所含的甲基化DNA是通过甲基化酶修饰人的基因组DNA而得，电泳呈单一条带。
2.本产品所含的非甲基化DNA是通过以甲基化DNA为模板进过多次nested WGA（全基因组扩增）扩增并纯化制备而得，原来的甲基化位点已经极度稀释。
3.本产品主要用于检测和优化设计的甲基化引物。
4.本产品的基因组DNA来源于人HCT116 DKO细胞株。
5.本产品足够50次甲基化PCR，如果每次模板使用量为20ng，每次做一个甲基化和一个非甲基化对照。
6.本产品只能用于科研。

规格及成分
本产品采用5孔盒包装
成份                                        编号           规格        包装
人甲基化DNA，10ng/L      100936a    100 L    0.5mL红盖管
人非甲基化DNA，10ng/L   100936b    100 L    0.5mL绿盖管
使用手册                              100936sc    无           1份

自备试剂
超纯水、基因专一性甲基化PCR引物。

运输及保存
常温运输、-20℃保存、有效期一年。

使用方法
1.按自备试剂对待测DNA样本，甲基化DNA对照，非甲基化DNA对照进行亚硫酸氢钠修饰和回收。
2.按下表设置30μL甲基化PCR反应（本产品不含所需试剂）：
成份                               待测样品      阳性对照        阴性对照
2×PCR MagicMix              15 L           15 L               15 L
亚硫酸氢钠修饰的DNA    10-20ng          10-20ng          10-20ng
甲基化PCR引物一           0.2-0.5 M         0.2-0.5 M          0.2-0.5 M
甲基化PCR引物二          0.2-0.5 M      0.2-0.5 M          0.2-0.5 M
超纯水                               补水到30 L        补水到30 L        补水到30 L
3.PCR参数需要用户自己根据引物和PCR产物的长度决定。

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亚硫酸氢盐DNA修饰试剂盒