关于商城

商城指南

支付方式

配送方式

售后服务

单链DNA环化试剂盒

发布时间：2025/10/13 14:02:58 阅读次数：5

CAT#:JW-221004-50
低温运输，-20℃保存

单链DNA环化试剂盒

产品及特点
本试剂盒用于环化单链DNA，它具有下列特点：
1.即开即用，十分简单方便，用户不需要辛苦摸索条件。
2.ssDNA的5’必须有磷酸基团，3‘必须是羟基基团。
3.适用于长度在20nt以上的单链DNA。
4.环化效率最高可以达到90%以上（ssDNA越长，效率越低）。
5.本产品对ssRNA也有环化能力，故模板中不得有RNA污染。
6.所得单链环状DNA可以用于RCA扩增。
7.本产品足够50次10uL体系的ssDNA环化反应。
8.本产品只能用于科研。
规格及成分
成份                                        编号        规格      包装
10×单链DNA环化反应液A    221004a    50uL    0.5mL绿盖管
20×单链DNA环化反应液B    221004b    25uL    0.5mL白盖管
25×单链DNA环化酶             221004c   20uL    0.5mL红盖管
超纯水                              210806 1mL    1.5mL蓝盖管
使用手册                              221004sc    1份    无
本产品使用五孔盒包装

运输及保存
低温运输，-20℃保存,有效期为一年。

自备试剂
ssDNA模板。

使用方法
1.准备单链DNA模板：可以用自选的方法制备单链DNA模板，最简单的方式是直接人工合成单链DNA，但必须将5端修饰为磷酸基团（合成DNA 5端的默认基团是-OH）。如果单链DNA来源于其他反应体系，则最好电泳回收（如尿素-PAGE电泳）以便去除其他成分对环化反应的干扰。为了方便后续克隆，可以在待突变片段两端设计成专一的、不存在于其他位置的限制性内切酶位点。
2.设置单链DNA环化反应，在PCR管中按下表加入各成分：
成分                                                                   样品管    阴性对照
5端磷酸化的单链DNA（终浓度为10pmol/uL）    5uL    5uL
10×单链DNA环化预混反应液A                            1uL    1uL
20×单链DNA环化预混反应液B                           0.5uL    0.5uL
25×单链DNA环化酶                                          0.4uL
超纯水                                                                3.1uL    3.5uL
3.65℃保温1小时。需要加热盖，否则反应体系中的水会蒸发。
4.如果需要去除没有环化的单链DNA，可以直接加入10U的Exonuclease 37℃酶切15分钟。本试剂不含相关成分。也可以加入本公司的线状DNA清除剂（需要另购）。
5.90℃10分钟灭活反应体系。如果不能加热，可以加入自备的10mM EDTA。

关联产品
线状DNA清除剂