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陈旧血液DNA提取试剂盒(过柱法)

发布时间:2025/10/16 16:01:15      阅读次数:0

CAT#:JW-221156-50
常温运输及保存

陈旧血液DNA提取试剂盒(过柱法)

产品及特点
本产品专门用于从新鲜或冻存的凝固全血(包括人和禽类)中提取基因DNA,它具有下列特点:
1.本产品纯化所得DNA纯净,OD260/280在1.8-2.0之间,可直接用于PCR、酶切和杂交等。
2.操作简单快捷。
3.每克陈旧全血DNA产量为20-50μg。
4.本试剂盒对人体无毒,无腐蚀性和刺激性气味
5.本产品足够50次微量提取,每次可以处理0.1-0.5g陈旧血液样品。
6.本产品只能用于科研。

规格及成分
本产品使用大扁盒包装
成分           
                                          编号      规格       包装
陈旧血液溶液A       
                         221156a    50 mL    60 mL本色瓶
陈旧血液溶液B      
                          221156b    50 mL    60 mL本色瓶
陈旧血液溶液C      
                          221156c    10 mL    10 mL玻棕瓶
陈旧血液溶液D      
                          221156d    50 mL    60 mL本色瓶
离心吸附柱      
                                220144     50 套     塑料袋
通用洗柱液     
                                 220143     50 mL    60 mL本色瓶
DNA洗脱液(基因组纯化专用)     220125     10 mL    10 mL本色瓶
使用手册          
                             221156sc    1 份               

运输及保存
常温运输及保存,有效期一年。

自备物品
氯仿。

使用方法
1.65℃预热陈旧血液溶液A,待其沉淀溶化后,充分混匀,取1mL到10-15mL塑料离心管中并将离心管放置于65℃待用。
2.称取陈旧血液0.1-0.5g,加入到预热的陈旧血液溶液A中短暂匀浆(必须使用剪切式匀浆机)。匀浆过程中将产生大量泡沫,属于正常现象。注意:如果是干的血块,用量不要超过0.2g,但需将干血块剪成微小的碎片。也可以将陈旧血块液氮研磨成粉后转移到装有陈旧血液溶液A的离心管中。
3.将匀浆液置于65℃水浴保温5分钟,然后将不超过0.75mL的匀浆液上清转移到新的1.5mL离心管中。注意:尽量不要转移凝固血液碎片。
4.在上清液中加入等体积陈旧血液溶液B,颠倒30秒充分混匀。
5.冰浴5分钟。
6.12000-15000g室温离心3分钟,将上清液转移到新的1.5mL离心管中。
7.在上清中加入0.2mL的陈旧血液溶液C,震荡器上充分振荡30秒混匀。
8.12000-15000g室温离心3分钟,两相交界面将有白色膜状物。
9.将上清液(大约0.6mL)小心转移到新的1.5mL离心管中。
10.在上清液中加入1.5倍体积的陈旧血液溶液D,上下颠倒30秒混匀。
11.分两次将混合液转移到离心吸附柱中,每次转移后需要14000g离心半分钟并弃穿透液。
12.在离心吸附柱中加入0.7mL的通用洗柱液,14000g离心半分钟。
13.在离心吸附柱中加入0.3mL的通用洗柱液,14000g离心半分钟(此步为第二次洗涤,一般可以省略)。
14.14000g离心半分钟以去除残留通用洗柱液。注意:此步不能省略,否则残留的通用洗柱液会影响DNA的后续反应。
15.将离心吸附柱转移到一新的离心管中,加入30-100μL DNA洗脱液(基因组纯化专用),14000g离心半分钟,管底溶液即DNA溶液,可立即使用或放冰箱长期保存。

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