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miRNA PAGE胶回收试剂盒（过柱法）

发布时间：2025/10/16 16:16:43 阅读次数：2

CAT#:JW-220989
常温运输及保存

miRNA PAGE胶回收试剂盒（过柱法）

产品及特点
本试剂是利用PAGE胶过柱法回收miRNA，可用于回收200nt以下的小片段RNA，尤其是20nt左右的microRNA(miRNA)分子。它具有下列特点:
1.可以回收15-3000nt范围内的各种长度的RNA，包括100nt以下的miRNA片段。
2.柱式回收法，比沉淀法更见简单快捷。
3.miRNA回收率在70%左右。
4.即开即用，操作简单，用户不需要自备任何试剂。
5.扩容性好，可小规模操作，也可以大规模操作。
6.本试剂盒可以回收30次的miRNA。
7.本产品只能用于科研。

规格及成分
本产品使用小扁盒包装
成分                                            编号                规格            包装
miRNA PAGE胶回收溶液A    220989a              9 mL   10 mL本色瓶
miRNA PAGE胶回收溶液B    220989b              9 mL   10 mL本色瓶
miRNA PAGE胶回收溶液C    220989c              9 mL   10 mL本色瓶
miRNA PAGE胶回收溶液D    220989d              9 mL   10 mL本色瓶
通用洗柱液                        220143                 50 mL   60 mL本色瓶
RNA洗脱液                        971207              10 mL     10 mL本色瓶
离心吸附柱                            220144              30个      塑料袋
使用手册                                220989-30sc       1份           无

运输及保存
常温运输及保存，有效期为一年。

自备物品
PAGE胶、离心管、移液枪头

使用方法
1.切取含miRNA片段的PAGE凝胶100mg左右(尽可能多地把多余的胶切除，否则会影响回收效率），放入1.5mL塑料离心管中，用先在酒精灯上口烧密闭的移液枪头尽可能将其捣碎，捣得越细越好。之后加入300μL miRNA PAGE胶回收溶液A。
2.将离心管水平放置并室温摇晃3小时以让miRNA从PAGE凝胶中扩散出来。如果回收的RNA片段长度超过100nt，摇晃时间应适当延长。提高温度到45-65℃，RNA扩散速度会增加。
3.12000-15000g室温离心1-2分钟，将含RNA的上清液转移到一个新的5mL的塑料离心管中。
4.加入300μL miRNA PAGE胶回收溶液B、300μL miRNA PAGE胶回收溶液C和750μL miRNA PAGE胶回收溶液D混合均匀将离心管中的溶液分两次转移到离心吸附柱中，每次转移后都先静置3分钟，然后再12000-15000g离心1分钟，倒掉收集管中的液体。
5.加入700μL通用洗柱液于离心吸附柱中。12000-15000g离心1分钟，倒弃收集管中的废液。之后再12000-15000g离心半分钟以去除离心吸附柱中的残留液体。
6.将离心吸附柱置于一新的干净的离心管中，加入25-50μL RNA洗脱液，静置3分钟。12000-15000g离心1分钟，离心管底部所得溶液即为纯化的miRNA溶液，可立即用于后续实验或者放冰箱长期保存。
7.可以PAGE电泳检查回收效率，最好使用基因的高灵敏的超快核酸银染试剂染色以节约miRNA样品的用量。

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