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Oligo和引物回收试剂盒

发布时间：2025/11/18 14:12:50 阅读次数：46

CAT#:JW-221233-50
常温运输和保存

Oligo和引物回收试剂盒

产品及特点
聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)是目前分离Oligo和引物最主要的方法，但是市场上没有专门的产品用于从聚丙烯酰胺凝胶中回收Oligo片段，为此本公司开发的本产品，它具有下列特点:
1.可以回收15-50 nt范围内的各种长度的单链或双链DNA，长于50nt的DNA可以使用性价比更高的DNA片段回收试剂盒回收。
2.回收率高达80%以上。
3.一站式，即开即用，操作简单，用户不需要自备任何试剂。
4.扩容性好，可小规模操作，也可以大规模操作。
5.也可以用于Oligo酶反应（如磷酸化和去磷酸化反应）后的去盐、脱盐和纯化。
6.本产品足够50次微量回收。
7.本产品只能用于科研。

规格及成分
本产品采用大扁盒包装
成份            编号    规格    包装
Oligo和引物回收溶液A    221233a    15 mL    15mL本色瓶
Oligo和引物回收溶液B    221233b    15 mL    15mL本色瓶
Oligo和引物回收溶液C    221233c    15 mL    15mL本色瓶
Oligo和引物回收溶液D    221233d    50 mL    50mL本色瓶
离心吸附柱        220144    50套    塑料袋
通用洗柱液        220143    50 mL    50mL本色瓶
DNA洗脱液（胶回收用）    2201505    10 mL    10mL本色瓶
使用手册            221233sc    1份    无

运输及保存
常温运输和保存，有效期一年。

自备试剂
PAGE胶

使用方法
一：回收PAGE胶中的Oligo
1.切取含OLIGO片段的PAGE凝胶（100 mg左右，尽可能多地把多余的胶切除，否则会影响回收效率），放入1.5 mL离心管中，用移液枪头尽可能捣碎（最好先在酒精灯上将枪头的口烧密闭再用于捣碎），捣得越细越好。
2.按重量比为1：2的比例加入Oligo和引物回收溶液A(100 mg PAGE凝胶需要加入200 uL Oligo和引物回收溶液A)。
3.将离心管水平放置并室温摇晃1-3个小时以让Oligo从PAGE凝胶中扩散出来。
4.12000-15000 g室温离心2分钟，将含Oligo的上清液转移到新的离心管中。
5.再用100 uL的Oligo和引物回收溶液A洗涤凝胶一次并与上步得到的上清合并。
6.在上步得到的溶液中加入300 uL Oligo和引物回收溶液B、300 uL Oligo和引物回收溶液C和750 uL Oligo和引物回收溶液D，充分混合均匀后分两次将混合液转移到离心吸附柱中，每次转移后都先静置3分钟，然后再12000-15000 g离心1分钟，倒掉收集管中的穿透液。
7.加入600-800 uL通用洗柱液于离心吸附柱中。
8.12000-15000 g离心1分钟，倒弃收集管中的废液。
9.12000-15000 g离心半分钟以去除离心吸附柱中的残留液体。
10.将离心吸附柱置于一自备的1.5mL塑料离心管中，加入25-50 uL 通用洗脱液，静置3分钟。
11.12000-15000 g离心1分钟，离心管底部所得溶液即为纯化的Oligo溶液，可立即用于后续实验或者放冰箱长期保存。
12.可以PAGE电泳检查回收效率，最好使用超高灵敏的超快核酸银染试剂染色以节约OLIGO样品的用量。

二：回收溶液中的Oligo和引物
1.在含OLIGO的、体积不超过100uL的反应液中，加入300 uL Oligo和引物回收溶液A, 混合均匀。
2.再加入300 uL Oligo和引物回收溶液B、300 uL Oligo和引物回收溶液C和750 uL Oligo和引物回收溶液D，充分混合均匀后分两次将混合液转移到离心吸附柱中，每次转移后都先静置3分钟，然后再12000-15000 g离心1分钟，倒掉收集管中的穿透液。
3.加入500 uL通用洗柱液于离心吸附柱中，12000-15000 g离心1分钟，倒弃收集管中的废液。如果有必要，可以重复洗涤步骤一次。
4.12000-15000 g离心半分钟以去除离心吸附柱中的残留液体。
5.将离心吸附柱置于一自备的1.5mL塑料离心管中，加入25-50 uL 通用洗脱液，静置3分钟。
6.12000-15000 g离心1分钟，离心管底部所得溶液即为纯化的Oligo和引物溶液，可立即用于后续实验或者放冰箱长期保存。
7.可以PAGE电泳检查回收效率，最好使用超高灵敏的超快核酸银染试剂染色以节约OLIGO样品的用量。

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