关于商城

商城指南

支付方式

配送方式

售后服务

猴痘病毒荧光染料法LAMP试剂盒

发布时间：2025/11/26 9:20:01 阅读次数：11

CAT#:JW-18-13600
低温运输，-20℃保存

猴痘病毒荧光染料法LAMP试剂盒

产品及特点
猴痘病毒（Monkeypox Virus）属正痘病毒属，可在非洲绿猴肾细胞中培养生长，导致细胞病变。人类感染猴痘，主要通过被已感染的动物咬伤，或直接接触被感染动物的血液、体液、猴痘病损而受染;通常由动物传给人，偶也可以发生人到人的猴痘传播。一般认为是在直接的、长时间面对面的接触中，通过含毒的大量呼吸飞沫而传播。猴痘还可以通过直接接触感染者的体液或病毒污染的物品(如衣服和被褥)而传播。主要临床症状为发热、剧烈头痛、淋巴结肿大、背痛、肌肉痛(肌肉疼痛)以及倍感无力(精神不振)。因此快速检测猴痘病毒具有重要的意义。因此对猴痘病毒的快速准确鉴定有有重要的意义，为此本公司根据荧光染料法LMAP技术，开发了简单快捷的猴痘病毒LAMP检测试剂盒，它具有下列特点：
1.即开即用，用户只需要提供DNA样品。
2.恒温扩增，可用荧光PCR仪进行实时荧光检测。
3.检测灵敏性一般比PCR高10倍以上。
4.特异性高，根据猴痘病毒DNA保守序列设计4条特异引物，不会跟其他生物的DNA发生交叉反应。
5.一般30分钟内出结果，比PCR快。
6.上样量大，对20 μL的反应体系，最大样品加样量高达到14 μL。
7.内含的dUTP-UNG可防交叉污染。
8.提供无传染性的阳性对照，便于分析实验结果。
9.本产品只能用于定性分析，不推荐用于定量分析。
10.本产品足够50次20 μL体系的荧光LAMP扩增。
11.只可用于科研。

规格及成分
本产品采购5孔盒包装
成份                                                                         编号                 规格          包装
4×LAMP MasterMix（荧光染料法，待加酶）      211222a      200μL    0.5mL绿盖管
Bst DNA聚合酶2.0                                               11-220319        50μL      0.5mL红盖管
20×猴痘病毒LAMP引物混合液干粉                  yw16-13600-ii   50次    0.5mL白盖管
猴痘病毒LAMP阳性对照（1×10E4拷贝/μL）        pc13600ii-MT250    250μL    0.5mL黄盖管
超纯水                                                                   210806              1 mL 1.5mL蓝盖管
使用手册                                                           18-13600sc           1份          无
注意：首次使用本试剂盒时，需要加入55μL超纯水到引物干粉管中，涡旋震荡半分钟混匀，得到20×引物混合液。短暂离心后即可使用。未用完的需要放-20℃保存。

运输及保存
低温运输，-20℃保存，保存期限为一年。

自备试剂
待测样品，荧光定量PCR仪。

使用方法
一、样品DNA的制备
1.用自选方法纯化样品DNA，本试剂盒跟市场上大多数DNA提取试剂盒兼容，包括本公司的免提取的核酸释放剂。
2.如果有N个样品，则需要做N+2个样品制备，包括一个样品制备阳性对照（PC）和一个样品制备阴性对照（NC）。PC用10μL本试剂盒提供的阳性对照（1×10E4拷贝/μL）加一定量的水作为样品制备PC，加水后的总体积跟所用核酸纯化试剂盒所要求的起始样本体积一致。NC用水替代。

二、LAMP反应（20μL体系）
1.反应设置：第一次使用时请把所有Bst DNA聚合酶2.0（50μL，本试剂盒提供）加入到 4×LAMP MasterMix（荧光染料法，待加酶）中，轻柔颠倒20次充分混匀，然后再取用。如果有N+2个DNA纯化样品，则最好设置N+4个LAMP扩增，增加LAMP扩增阳性对照和LAMP扩增阴性对照各1个。在N+4个PCR管中加入下列成分：
成分                                                    N+2个样品管    LAMP阴性对照    LAMP阳性对照
4×荧光LAMP MagicMix（加酶后）          各5 μL                5 μL                5 μL
20×猴痘病毒LAMP引物混合液              各1 μL              1 μL                  1 μL
N+2个样品DNA                                       各14 μL                -                      -
超纯水                                                         -                      14 μL               -
第2步所得阳性对照的10倍稀释液               -                      -                       14μL
2.放荧光定量PCR仪上扩增，设置60次循环，每次65℃保温1分钟，采集SYBR通道的荧光信号。

三、结果分析
1.电泳分析：由于取样时非常容易产生气溶胶污染，污染实验环境并且非常难清除污染，所以强烈建议不要采取此方法分析实验结果。即使使用，也要在不同的房间，使用不同的移液枪操作。具体做法是取10μL LAMP扩增产物跟自备上样液混合后进行2%琼脂糖凝胶电泳。LAMP阳性对照必须有正常LAMP条带（200bp左右的梯形扩增产物），LAMP阴性结果必须无条带，否则实验结果无效。如果LAMP阳性对照和阴性对照结果正常，再分析待测样品。典型的电泳结果见下表，奇数样为阴性结果，偶数样为阳性结果：

2.荧光分析（仅限于用qPCR仪进行反应的场景）：样品制备阳性对照和LAMP阳性对照的反应液将有标准的S扩增曲线，样品制备阴性对照和LAMP阴性对照的反应液将没呈平线，没有S曲线，否则提取实验或扩增实验无效。如果阳性和阴性对照结果正常，则实验有效，可以分析样品的情况。样品管的荧光曲线为S型，则说明样品为阳性，如果为平线则说明待测样品为阴性。典型的荧光检测结果见下图。左边为阳性，右边为阴性。

关联产品
猴痘病毒染料法PCR试剂盒