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大鼠胶质肉瘤细胞9L/lacZ说明书

发布时间：2026/4/17 9:22:07 阅读次数：5

大鼠胶质肉瘤细胞9L/lacZ
Cat No.:JW499

种属：大鼠
别称：9L/LacZ
组织来源：脑，胶质细胞
疾病：胶质肉瘤
传代比例/细胞消化：1:2传代，消化1-2分钟
完全培养基配置：DMEM培养基；10%胎牛血清；1%双抗
简介：9L/lacZ细胞株1989年从9L细胞株（大鼠硝基脲诱导的胶质瘤细胞株）发展而来。用携带E. coli编码beta-半乳糖苷酶lacZ基因和带来G418抗性的Tn5新霉素基因BAG复制缺陷的逆转录病毒载体感染9L细胞株。细胞在G418存在下培养14天，克隆，并检测beta-半乳糖苷酶生成。 9L/lacZ产生高水平的酶，选择其进行后续研究。细胞持续表达 lacZ报告基因产物，从E. coli衍生来的beta-半乳糖苷酶，从而可以通过组织切片的组织化学染色来鉴定单个肿瘤细胞。同一片子上的淋巴细胞和其它响应细胞也可以通过双标记抗体进行鉴定。染色细胞和背景的对比有益于图像分析。这是少数允许量化分析的大脑微观肿瘤模型中的一种。这种肿瘤模仿了人类大脑肿瘤的生长和传播的重要特性。 beta-半乳糖苷酶的表达十分稳定，但细胞培养数月后应该重新进行克隆。
形态：成纤维细胞样
生长特征：贴壁生长
倍增时间：每周 2 至 3 次
基因表达：beta galactosidase (beta-gal)
致瘤性：Yes, forms tumors in the brains of CD Fischer 344 rats
培养条件：气相：空气，95%；二氧化碳，5%。温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
冻存条件：冻存液：90%FBS ，DMSO 10%,
或使用非程序冻存液：官网货号JW-H040
保藏机构：ATCC; CRL-2200
产品使用：仅限于科学研究，不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用。

细胞接收处理流程：
1：观察有无破损漏液情况，如有请拍照及时联系客服。
2：酒精消毒培养瓶表面后显微镜下观察细胞状态，观察拍照后不用打开培养瓶盖放入培养箱静止2-3小时稳定细胞状态。
3：请按照细胞操作指南进行第一次传代冻存处理。
4：产品随货会附带细胞说明书、细胞培养操作指南、细胞鉴定、支原体检测报告。
5：若产品有异常或其他疑问，可随时联系客服；转至技术支持。

常温细胞收货当天处理方式

1.收到常温细胞后，及时拍照记录有无漏液/瓶身破损现象。
2. 镜下观察有无微生物污染现象，拍照记录不同倍数镜下细胞状态和有无染菌现象，方便后续售后处理。
3. 消毒后，更换赠送的完全培养液放置培养箱静止2-3小时。如细胞有多数悬浮细胞需要离心收集重新接种止培养瓶。
4. 观察细胞密度若超过 80%则可正常传代处理(有的原代细胞不可传代，请根据实际情况决定)，首次传代推荐比例 1：2 到 1：3（按实际收货细胞密度决定，若不确定可联系技术支持）；若细胞密度不到 80%则可继续培养，注意拧松瓶盖或更换透气瓶盖；悬浮细胞注意离心所有培养基以收集细胞。
5. 由于气温，运输等影响造成贴壁细胞漂浮的，请将细胞离心收集后在离心管中消化后进行传代（参考附件），或及时联系技术支持进行指导传代。

贴壁细胞传代：
1.从培养容器中吸出用过的细胞培养基并丢弃；
2.从与贴壁细胞层相对的容器一侧轻轻加入冲洗液以避免搅动细胞层，前后摇晃容器数次
3. 从培养容器中吸出冲洗液并丢弃，向培养瓶中加入预热的胰酶；胰酶量应足以覆盖细胞层(T25为1ml)；
4.将培养容器在室温下孵育约 2分钟（请注意实际孵育时间根据所用细胞系不同而有所差异）；
5.在显微镜下观察细胞解离情况；如果解离程度未达 90%，可将孵育时间延长几分钟，每 30 秒钟检查一次解离情况；
6.细胞解离程度大于等于 90%时，倾斜培养容器，使细胞上液体尽快流尽；加入所用解离剂两倍体积的预热完全生长培养基；吹打细胞层表面数次，使培养基分散；
7.将细胞转移到15mL 无菌离心管中，以 200×g 的离心力离心 3-5 分钟（请注意离心速度和时间依细胞种类不同而有所差异）；
8.用最少体积的预热完全生长培养基重新悬浮细胞沉淀，将细胞悬液按照推荐比例稀释，并将适量体积的细胞悬液转移到新的细胞培养容器中，把细胞放回培养箱（注：如果使用培养瓶，将其放入培养箱前应将瓶盖旋松，以便进行充分的气体交换，除非您使用的是通气式培养瓶和透气性瓶盖）。

悬浮细胞传代：
将 T25 培养瓶中的悬液收集至离心管中 1000rpm 离心 5min，收集上清，加 1- 2ml 完全培养基重悬，按 1:2 比例进行比例传代分到新T25瓶中，补充5-8ml/瓶新的完全培养基，最后放入细胞培养箱中培养。