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大鼠淋巴瘤细胞 Nb2-11说明书

发布时间:2026/4/17 10:16:43      阅读次数:2

大鼠淋巴瘤细胞 Nb2-11
Cat No.:JW1071

种属:大鼠
别称:Nb2-11
组织来源:胸腺/淋巴结
疾病:大鼠恶性淋巴瘤
传代比例/细胞消化:1:2传代,消化2-3分钟。
完全培养基配置:RPMI1640培养基;10%胎牛血清; 10%Horseserum ,0.05mM 2-Mercaptoethanol 1%双抗
简介:Nb2-11是Nb-2大鼠淋巴瘤系的克隆 ,其来源于在长期雌激素治疗后在雄性贵族(Nb)品系大鼠的胸腺/淋巴结中发展的淋巴瘤的移植。这些细胞来源于前T细胞 ,其增殖依赖于哺乳动物的催乳素 ,如催乳素。Nb2-11也可以被IL-2刺激。将Nb2细胞注射到Nb大鼠体内会导致恶性肿瘤 ,这些肿瘤对长春碱的治疗非常敏感。核型分析表明 ,该细胞系只有五种发育良好的染色体异常。这些细胞不表达表面免疫球蛋白 ,并且在沉积前已确认其对乳原的依赖性。生物测定中使用Nb2-11细胞的协议可根据要求从ECACC获得。
形态:淋巴母细胞样
生长特征:悬浮生长
倍增时间:每周 2-3次
培养条件:气相:空气 ,95%;二氧化碳 ,5%。 温度:37摄氏度 ,培养箱湿度为70%-80%。
冻存条件:冻存液:90%FBS ,DMSO 10%,
或使用非程序冻存液:官网货号JW-H040
保藏机构:ECACC; 97041101
产品使用:仅限于科学研究 ,不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用。

细胞接收处理流程:
1:观察有无破损漏液情况 ,如有请拍照及时联系客服。
2:酒精消毒培养瓶表面后显微镜下观察细胞状态 ,观察拍照后不用打开培养瓶盖 放入培养箱静止2-3小时稳定 细胞状态。
3:请按照细胞操作指南进行第一次传代冻存处理。
4:产品随货会附带细胞说明书、细胞培养操作指南、细胞鉴定、支原体检测报告。
5:若产品有异常或其他疑问 ,可随时联系客服;转至技术支持。

常温细胞收货当天处理方式
1.收到常温细胞后,及时拍照记录有无漏液/瓶身破损现象。
2.镜下观察有无微生物污染现象,拍照记录不同倍数镜下细胞状态和有无染菌现象, 方便后续 售后处理。
3. 消毒后,更换赠送的完全培养液放置培养箱静止2-3小时。如细胞有多数悬浮细胞需要离心收集 重新接种止培养瓶。
4. 观察细胞密度若超过 80%则可正常传代处理(有的原代细胞不可传代,请根据实际情况决定), 首次传代推荐比例 1:2 到 1:3(按实际收货细胞密度决定,若不确定 可联系技术支持);若细 胞密度不到 80%则可继续培养,注意拧松瓶盖或更换透气瓶盖;悬浮细胞注意离心所有培养基以收 集细胞。
5. 由于气温,运输等影响造成贴壁细胞漂浮的,请将细胞离心收集后在离心管中消化后进行传代 (参考附件),或及时联系技术支持进行指导传代。

贴壁细胞传代:
1.从培养容器中吸出用过的细胞培养基并丢弃;
2.从与贴壁细胞层相对的容器一侧轻轻加入冲洗液以避免搅动细胞层,前后摇晃容器数次
3. 从培养容器中吸出冲洗液并丢弃,向培养瓶中加入预热的胰酶;胰酶量应足以覆盖细胞层(T25为1ml);
4.将培养容器在室温下孵育约 2分钟(请注意实际孵育时间根据所用细胞系不同而有所差异);
5.在显微镜下观察细胞解离情况;如果解离程度未达 90%,可将孵育时间延长几分钟,每 30 秒 钟检查一次解离情况;
6.细胞解离程度大于等于 90%时,倾斜培养容器,使细胞上液体尽快流尽;加入所用解离剂两倍 体积的预热完全生长培养基;吹打细胞层表面数次,使培养基分散;
7.将细胞转移到15mL 无菌离心管中,以 200×g的离心力离心 3-5 分钟 (请注意离心速度和时间依细胞种类不同而有所差异);
8.用最少体积的预热完全生长培养基重新悬浮细胞沉淀,将细胞悬液按照推荐比例稀释,并将适 量体积的细胞悬液转移到新的细胞培养容器中,把细胞放回培养箱(注:如果使用培养瓶,将其放 入培养箱前应将瓶盖旋松,以便进行充分的气体交换,除非您使用的是通气式培养瓶和透气性瓶 盖)。

悬浮细胞传代:
1.将 T25 培养瓶中的悬液收集至离心管中 1000rpm 离心 5min,收集上清,加 1- 2ml 完全培养基重悬,按 1:2 比例进行比例传代分到新T25瓶中,补充5-8ml/瓶新的完全培养基 , 最后放入细胞培养箱中培养


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