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大鼠 Wi star 肉瘤细胞 ,XC说明书

发布时间:2026/4/17 10:18:01      阅读次数:4

大鼠 Wi star 肉瘤细胞 ,XC
Cat No.:JW-J1293

种属:大鼠
别称:XC
疾病:鼻窦肉瘤
传代比例/细胞消化:1:2传代 ,消化2-3分钟
完全培养基配置:MEM培养基 ;10%胎牛血清 ; 1%双抗
形态:上皮细胞样
生长特征:贴壁生长
倍增时间:每周 2 至 3 次
培养条件:气相 :空气 ,95% ;二氧化碳 ,5%。 温度 :37摄氏度 ,培养箱湿度为70%-80%。
冻存条件:冻存液 :90%FBS ,DMSO 10%,
或使用非程序冻存液 :官网货号JW-H040
保藏机构:ATCC; CCL-165
产品使用:仅限于科学研究 ,不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用。

细胞接收处理流程 :
1 :观察有无破损漏液情况 ,如有请拍照及时联系客服。
2 :酒精消毒培养瓶表面后显微镜下观察细胞状态 ,观察拍照后不用打开培养瓶盖 放入培养箱静止2-3小时稳定 细胞状态。
3 :请按照细胞操作指南进行第一次传代冻存处理。
4 :产品随货会附带细胞说明书、细胞培养操作指南、细胞鉴定、支原体检测报告。
5 :若产品有异常或其他疑问 ,可随时联系客服 ;转至技术支持。

常温细胞收货当天处理方式
1.收到常温细胞后,及时拍照记录有无漏液/瓶身破损现象。
2. 镜下观察有无微生物污染现象,拍照记录不同倍数镜下细胞状态和有无染菌现象, 方便后续
售后处理。
3. 消毒后,更换赠送的完全培养液放置培养箱静止2-3小时。如细胞有多数悬浮细胞需要离心收集重新接种止培养瓶。
4. 观察细胞密度若超过 80%则可正常传代处理(有的原代细胞不可传代,请根据实际情况决定),首次传代推荐比例 1:2 到 1:3(按实际收货细胞密度决定,若不确定 可联系技术支持);若细胞密度不到 80%则可继续培养,注意拧松瓶盖或更换透气瓶盖;悬浮细胞注意离心所有培养基以收集细胞。
5. 由于气温,运输等影响造成贴壁细胞漂浮的,请将细胞离心收集后在离心管中消化后进行传代(参考附件),或及时联系技术支持进行指导传代。

半贴壁半悬浮细胞处理:
6.该细胞是半贴壁半悬浮生长,悬浮细胞可用离心管收集细胞悬液后,1000rpm 离心 5min,离心收 集上清
7.当细胞密度在80%以下,将收集T25瓶中的悬浮细胞离心后用入 5ml 完全培养基重悬,加入回到 原培养瓶中继续培养,若细胞生长80%以上对细胞进行传代,传代时需要将悬浮细胞和贴壁细胞的 沉淀用 1-2ml 完全培养基重悬收集到一起,混匀后按1:2比例接种到新的培养瓶。 半贴壁半悬浮细胞传代:
8.贴壁细胞可用PBS润洗后,在培养瓶中加入1 2毫升0.25 % 胰蛋白酶溶液(含EDTA)置于37℃培 养箱中消化,待细胞变圆收缩后可用5mL左右完全培养基进行终止消化,然后轻轻吹散细胞后离心 搜集细胞;
9.将收集到的悬浮细胞、pbs清洗液中的细胞和消化下来的贴壁细胞以1000rpml离心5min,弃去上 清,补加1-2mL培养液后重悬混匀后将细胞悬液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加5-8ml按照说明 书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力,放入培养箱培养。

贴壁细胞传代:
1.从培养容器中吸出用过的细胞培养基并丢弃;
2.从与贴壁细胞层相对的容器一侧轻轻加入冲洗液以避免搅动细胞层,前后摇晃容器数次
3. 从培养容器中吸出冲洗液并丢弃,向培养瓶中加入预热的胰酶;胰酶量应足以覆盖细胞层(T25为1ml);
4.将培养容器在室温下孵育约 2分钟(请注意实际孵育时间根据所用细胞系不同而有所差异);
5.在显微镜下观察细胞解离情况;如果解离程度未达 90%,可将孵育时间延长几分钟,每 30 秒钟检查一次解离情况;
6.细胞解离程度大于等于 90%时,倾斜培养容器,使细胞上液体尽快流尽;加入所用解离剂两倍体积的预热完全生长培养基;吹打细胞层表面数次,使培养基分散;
7.将细胞转移到15mL 无菌离心管中,以 200×g 的离心力离心 3-5 分钟(请注意离心速度和时间依细胞种类不同而有所差异);
8.用最少体积的预热完全生长培养基重新悬浮细胞沉淀,将细胞悬液按照推荐比例稀释,并将适
量体积的细胞悬液转移到新的细胞培养容器中,把细胞放回培养箱(注:如果使用培养瓶,将其放入培养箱前应将瓶盖旋松,以便进行充分的气体交换,除非您使用的是通气式培养瓶和透气性瓶
盖)。

悬浮细胞传代:将 T25 培养瓶中的悬液收集至离心管中 1000rpm 离心 5min,收集上清,加 1-  2ml 完全培养基重悬,按 1:2 比例进行比例传代分到新T25瓶中,补充5-8ml/瓶新的完全培养基 ,最后放入细胞培养箱中培养。


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