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热门关键词：白介素 gibco ELISA试剂盒胎牛血清移液器 ※本公司产品仅供科研实验研究使用，不用于临床诊断 !

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植物精氨酸（arginine）含量化学比色法定量检测试剂盒产品说明书

发布时间：2022/11/17 10:18:22 阅读次数：524

主要用途

植物精氨酸（arginine）含量化学比色法定量检测试剂是一种旨在通过精氨酸，在碱性条件下，与羟基喹啉进行反应后，由次溴酸钠作用产生的砖红色显色产物，在分光光度仪下，即采用比色法来测定样品中精氨酸含量的权威而经典的技术方法。该技术经过精心改良坂口方法（Sakaguchi method）、成功实验证明的。其适用于各种植物组织，包括种子（seed）、叶片（leaf）、根（root）、胚胎叶（cotyledon）、上胚轴（epicotyl）等裂解萃取液样品中精氨酸水平检测。产品严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定。

技术背景

L-精氨酸（L-arginine；Arg；R）学名为2-氨基-5-胍基戊酸 L-蛋白氨基酸（ (S)-2-Amino-5-guanidino pentanoic acid），是一种必需α-氨基酸，属于谷氨酰胺家属，分子式是C_{HYPERLINK "https://pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/"}₆H_{HYPERLINK "https://pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/"}₁₄N_{HYPERLINK "https://pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/"}₄O_{HYPERLINK "https://pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/"}₂，分子量174.20，编码为CGU、CGC、CGA、CGG、AGA、AGG。其作用在于合成蛋白质，激发免疫系统，增强一氧化氮产生，促进生长激素、胰岛素等释放。精氨酸在人体内产生，也存在于各种鱼类、红肉、禽类、豆类、全麦、乳制品、葡萄等食物中。具有舒张血管，愈合伤口，治疗心绞痛和阳痿等功能。葡萄酒工业中，精氨酸水平用于监测和控制氨基甲酸乙酯的水平。精氨酸缺陷，将导致早产、高氨血症、心肺和神经功能异常等。基于精氨酸，在碱性条件下，与羟基喹啉（8-hydroxyquinoline）进行反应，由次溴酸钠（sodium hypobromite）作用，产生显色产物，呈现砖红色，通过分光光度仪（500nm波长）来定量分析精氨酸的含量。

产品内容

清理液（Reagent A） 100毫升

裂解液（Reagent B） 50毫升

反应液（Reagent C） 15毫升

碱性液（Reagent D） 15毫升

显色液（Reagent E） 30毫升

标准液（Reagent F） 10毫升

产品说明书 1份

保存方式

保存反应液（Reagent C）、显色液（Reagent E）和标准液（Reagent F）在－20℃冰箱里；其余的保存在4℃冰箱里；试剂具有腐蚀性，注意操作安全；有效保证6月

用户自备

15毫升锥形离心管：用于样品操作的容器

DOUNCE匀浆器：用于裂解组织

涡旋震荡仪：用于混匀反应物

台式离心机：用于样品操作

比色皿：用于比色的容器

分光光度仪：用于比色分析

实验步骤

一、样品预处理

1．准备好新鲜的植物组织（叶片、谷粒、种子等），并秤重以确定100至500毫克组织重量

2．（选择步骤）放进预冷的15毫升锥形离心管

3．（选择步骤）加入3毫升清理液（Reagent A）清洗1次

4．即刻用刀片切碎组织

5．放进一个预冷的15毫升锥形离心管

6．加入预冷的2.5毫升裂解液（Reagent B）

7．涡旋震荡5秒，充分混匀

8．即刻放进预冷的DOUNCE匀浆器，在冰槽里用匀浆棒匀化组织（约80下）

9．将所有组织匀浆物移入15毫升锥形离心管，放进4℃台式离心机离心10分钟，速度为10000g

10．小心移出上清液到新的15毫升锥形离心管

11．移取10微升进行蛋白定量检测（注意：建议使用 Bradford蛋白质浓度定量试剂盒－G&VS30030.1）

12．放进冰槽里备用或放入—70℃冰箱里保存

二、 测定准备

1．设定好分光光度仪（温度为4℃）：波长500nm，并置零

2．准备好5个15毫升锥形离心管，标记为1至5号管

3．分别加入5毫升预冷的清理液（Reagent A）到每个离心管

4．移取5毫升预冷的标准液（Reagent F）到1号管，混匀

5．小心移取5毫升1号管稀释的标准液（Reagent F）到2号管，混匀

6．小心移取5毫升2号管稀释的标准液（Reagent F）到3号管，混匀

7．小心移取5毫升3号管稀释的标准液（Reagent F）到4号管，混匀

8．将1至5号管放进冰槽里备用；标准管浓度见下表

管号	清理液（Reagent A）	标准液（Reagent F）	标准精氨酸含量
1	5毫升	5毫升	50微克/毫升
2	5毫升	5毫升1号管	25微克/毫升
3	5毫升	5毫升2号管	12.5微克/毫升
4	5毫升	5毫升3号管	6.25微克/毫升
5	5毫升	空对照	0

三、 标准曲线测定

1．移取2.5毫升上述制备的标准液（Reagent F）到新的15毫升锥形离心管

2．加入500微升反应液（Reagent C），混匀

3．加入500微升碱性液（Reagent D），混匀

4．置于冰槽里孵育10分钟

5．加入1毫升冰槽里预冷的显色液（Reagent E）

6．快速枪头混匀（注意：显示砖红色）

7．即刻移取3毫升到预冷的比色皿

8．即刻放进分光光度仪检测（500nm波长），获得吸光读数（OD）（注意：须在10秒之内测读）

9．重复实验步骤1至8四次

10．实际吸光读数：标准样吸光读数－5号管标准样吸光读数（作为空对照）

11．构建标准曲线：纵座标（Y轴）为实际吸光读数（OD）；横座标（X轴）为标准精氨酸含量（微克/毫升）

四、 样品测定

1．移取2.5毫升上述制备的待测样品到新的15毫升锥形离心管

2．加入500微升反应液（Reagent C），混匀

3．加入500微升碱性液（Reagent D），混匀

4．置于冰槽里孵育10分钟

5．加入1毫升冰槽里预冷的显色液（Reagent E）

6．快速枪头混匀（注意：显示砖红色）

7．即刻移取3毫升到预冷的比色皿

8．即刻放进分光光度仪检测（500nm波长），获得吸光读数（OD）（注意：须在10秒之内测读）

9．实际吸光读数：样品吸光读数－5号管标准样吸光读数（作为空对照）

10．根据标准曲线获得样品对应精氨酸含量（微克/毫升）

五、 计算样品实际含量

根据标准曲线获得样品对应精氨酸含量（微克/毫升）X样品稀释倍数X2.5（样品总量；毫升）=微克（微克/100或500毫克组织）

注意事项

1．本产品为20次操作

2．本产品检测范围0至50微克

3．操作时，须戴手套

4．试剂具有腐蚀性，注意操作安全

5．整个操作须在冰上操作

6．样品测定避免批量一次操作，尤其是加入显色液（Reagent E）

7．系统操作过程中，标准样品测定只需1次

8．如果待测样品浓度过高或过低，可以调整样品量

9．用户可以使用：微克精氨酸/毫克蛋白或微克精氨酸/毫克组织等

10．本公司提供系列生化学检测试剂产品

质量标准

1．本产品经鉴定性能稳定

2．本产品经鉴定检测敏感

使用承诺

极威生物秉着“信誉至上、客户满意、质量承诺”的宗旨为我们的用户提供优质产品和服务。用户收到货后，应按照产品说明书上的规定妥善保管并在有效期内使用。我们的产品在销售前已作严格的质量鉴定，保证说明书所述的使用效果。在货到后10天内若发现确属本产品的质量问题，请立即以书面形式（实验报告）与本公司联系，并将该产品退回，经检验确系产品质量所致，本公司负责更换产品。如系使用者错误操作所致，本公司不承担由此造成的损失。

友情提醒

IF IT DOESN’T WORK， RECHECK YOUR EXPERIMENT TO SEE WHAT YOU DID WRONG。

订购信息

单组分订购信息

编号名称规格

G&VS19012.6 植物精氨酸含量化学比色法定量检测试剂盒 20次

G&VS19012.6A 清理液（Reagent A）100毫升

G&VS19012.6B 裂解液（Reagent B） 100毫升

G&VS19012.6C 反应液（Reagent C）50毫升

G&VS19012.6D 碱性液（Reagent D） 50毫升

G&VS19012.6E 显色液（Reagent E） 50毫升

G&VS19012.6F 标准液（Reagent F） 20毫升

试剂盒订购信息

产品编号	名称	规格
G&VS19012.1	通用型精氨酸（arginine）含量化学比色法定量检测试剂盒	20次
G&VS19012.2	细胞精氨酸（arginine））含量化学比色法定量检测试剂盒	20次
G&VS19012.3	组织精氨酸（arginine）含量化学比色法定量检测试剂盒	20次
G&VS19012.4	血液精氨酸（arginine）含量化学比色法定量检测试剂盒	20次
G&VS19012.5	体液精氨酸（arginine）含量化学比色法定量检测试剂盒	20次
G&VS19012.6	植物精氨酸（arginine）含量化学比色法定量检测试剂盒	20次
G&VS19012.7	酒类精氨酸（arginine）含量化学比色法定量检测试剂盒	20次
G&VS19012.8	饮料精氨酸（arginine）含量化学比色法定量检测试剂盒	20次
G&VS19229.1	通用型精氨酸（arginine）含量酶连续循环反应比色法定量检测试剂盒	20次
G&VS19229.2	细胞精氨酸（arginine）含量酶连续循环反应比色法定量检测试剂盒	20次
G&VS19229.3	组织精氨酸（arginine）含量酶连续循环反应比色法定量检测试剂盒	20次
G&VS19229.4	血液精氨酸（arginine）含量酶连续循环反应比色法定量检测试剂盒	20次
G&VS19229.5	体液精氨酸（arginine）含量酶连续循环反应比色法定量检测试剂盒	20次
G&VS19229.6	植物精氨酸（arginine）含量酶连续循环反应比色法定量检测试剂盒	20次
G&VS19229.7	酒类精氨酸（arginine）含量酶连续循环反应比色法定量检测试剂盒	20次
G&VS19229.8	饮料精氨酸（arginine）含量酶连续循环反应比色法定量检测试剂盒	20次
G&VS19230.1	通用型精氨酸（arginine）含量高效液相色谱法定量检测试剂盒	20次
G&VS19230.2	细胞精氨酸（arginine）含量高效液相色谱法定量检测试剂盒	20次
G&VS19230.3	组织精氨酸（arginine）含量高效液相色谱法定量检测试剂盒	20次
G&VS19230.4	血液精氨酸（arginine）含量高效液相色谱法定量检测试剂盒	20次
G&VS19230.5	体液精氨酸（arginine）含量高效液相色谱法定量检测试剂盒	20次
G&VS19230.6	植物精氨酸（arginine）含量高效液相色谱法定量检测试剂盒	20次
G&VS19230.7	酒类精氨酸（arginine）含量高效液相色谱法定量检测试剂盒	20次
G&VS19230.8	饮料精氨酸（arginine）含量高效液相色谱法定量检测试剂盒	20次