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热门关键词：白介素 gibco ELISA试剂盒胎牛血清移液器 ※本公司产品仅供科研实验研究使用，不用于临床诊断 !

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RNA荧光（RiboGreen）定量检测试剂盒产品说明书

发布时间：2022/11/17 13:20:27 阅读次数：545

主要用途：RNA荧光（RiboGreen）定量检测试剂是一种旨在通过使用RiboGreen荧光染料与样品中RNA的高度结合而产生荧光信号来精确定量样品中RNA含量的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种分子生物学实验，例如体外转录RNA、Northern Bolt、S1核酸酶检测、RNA酶保护检测、cDNA库制备、逆转录PCR和差异显示PCR中RNA含量分析。产品严格无菌，即到即用，性能稳定，高度敏感。

技术背景：作为RNA染色剂之一的RiboGreen荧光染料与样品中RNA，包括rRNA、mRNA等结合，产生荧光信号。RiboGreen技术可以检测到低达1纳克RNA的变化。RNA的微量增加引起荧光信号强度（Intensity）或相对荧光单位（RFU）的显著增加。其自发荧光（Autofluorescence）忽略不计，重复性标准差异（Standard Deviation）低，不受样品化学成分的干扰。

产品内容

染色液（Reagent A）

稀释液（Reagent B）

标准液（Reagent C）

产品说明书

保存方式：保存染色液（Reagent A）和标准液（Reagent C）在－20℃冰箱里，避免反复冻融；其余的保存在4℃冰箱里，染色液（Reagent A）避免光照，有效保证6月

用户自备

1.5毫升离心管：用于样品操作的容器

200微升1厘米光径比色皿或黑色96孔板：用于荧光分析的容器

荧光分光光度仪或荧光酶标仪：用于荧光定量分析

实验步骤

一、 测定准备

1．准备好待测样品，置于冰槽里

2．设定好荧光分光光度仪：激发波长485±10nm，散发波长530±12.5nm，并置零

3．实验开始前，将－20℃冰箱里的试剂盒中的染色液（Reagent A）置于冰槽里融化。然后移出xx微升稀释液（Reagent B）到新的1.5毫升离心管，加入xx微升染色液（Reagent A），混匀后，用锡纸包裹，标记为染色工作液（5次测定量），放在暗室里。然后进行下列操作。

二、 构建标准曲线

1．准备好5个1.5毫升离心管，标记为1至5号管

2．分别加入xx微升稀释液（Reagent B）到每个离心管

3．移取xx微升标准液（Reagent C）到1号管，混匀

4．小心移取xx微升1号管稀释的标准液（Reagent C）到2号管，混匀

5．小心移取xx微升2号管稀释的标准液（Reagent C）到3号管，混匀

6．小心移取xx微升3号管稀释的标准液（Reagent C）到4号管，混匀

7．将1至5号管放进冰槽里备用；标准管含量见下表

管号	稀释液（Reagent B）	标准液（Reagent C）	标准DNA总量
1	xx微升	xx微升	xx纳克/毫升
2	xx微升	xx微升1号管	xx纳克/毫升
3	xx微升	xx微升2号管	xx纳克/毫升
4	xx微升	xx微升3号管	xx纳克/毫升
5	xx微升	空对照	0

8．移取xx微升含有染色液（Reagent A）和稀释液（Reagent B）的染色工作液到新的比色皿

9．加入100微升上述配制的标准液

10．室温下，孵育5分钟，避免光照

11．即刻放进荧光分光光度仪测读：获得相对荧光单位（Relative Fluorescence Unit；RFU）

12．重复实验步骤8至11四次

13．绘制标准曲线：纵座标（Y轴）为相对荧光单位（RLU）；横坐标（X轴）为DNA含量（纳克/毫升）

三、 样品检测

1．移取xx微升含有染色液（Reagent A）和稀释液（Reagent B）的染色工作液到新的比色皿

2．加入100微升待测样品

3．室温下，孵育5分钟，避免光照

4．即刻放进荧光分光光度仪测读：获得相对荧光单位（Relative Fluorescence Unit；RFU）

5．根据标准曲线获得样品对应RNA含量（纳克/毫升）

注意事项

1．本产品为25次操作，包括标准曲线测定

2．整个操作须带手套，建议使用滤芯枪头，并格外小心，防止降解RNA

3．建议所有的操作用品属于RNA专用

4．使用新鲜配制的染色工作液，务必不要超过2小时，且注意避光

5．孵育时，避免光照

6．系统检测，标准曲线测定1次即可；如果仪器更换，则需要重新测定1次

7．如果荧光读数过高，可以相应稀释样品量

8．盐类、尿素、乙醇、氯仿、去垢剂、蛋白、琼脂糖不会干扰检测

9．如果样品中含有DNA，建议使用5单位DNA酶，37℃孵育90分钟预处理

10．本公司提供系列RNA检测试剂产品

质量标准

1．本产品经鉴定性能稳定

2．本产品经鉴定高度敏感

使用承诺：极威生物秉着“信誉至上、客户满意、质量承诺”的宗旨为我们的用户提供优质产品和服务。用户收到货后，应按照产品说明书上的规定妥善保管并在有效期内使用。我们的产品在销售前已作严格的质量鉴定，保证说明书所述的使用效果。在货到后10天内若发现确属本产品的质量问题，请立即以书面形式（实验报告）与本公司联系，并将该产品退回，经检验确系产品质量所致，本公司负责更换产品。如系使用者错误操作所致，本公司不承担由此造成的损失。

友情提醒

IF IT DOESN’T WORK， RECHECK YOUR EXPERIMENT TO SEE WHAT YOU DID WRONG。

订购信息

单组分订购信息

编号名称

G&VS20129 RNA荧光（RiboGreen）定量检测试剂盒

G&VS20129A 染色液（Reagent A）

G&VS20129B 稀释液（Reagent B）

G&VS20129C标准液（Reagent C）

试剂盒订购信息

产品编号	产品名称	规格
G&VS12046	DEPC水	500毫升
G&VS12047	DMDC水	500毫升
G&VS20016.1	DEPC处理试剂盒	100次
G&VS20016.2	DMDC处理试剂盒	100次
G&VS12039.1	RNA样品储存液	50毫升
G&VS12039.2	纯化RNA样品储存液	50毫升
G&VS20101	mRNA纯化树脂再生试剂盒	20次
G&VS20127	RNA比色法定量检测试剂盒	20次
G&VS20129	RNA荧光（RiboGreen）定量检测试剂盒	20次