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热门关键词：白介素 gibco ELISA试剂盒胎牛血清移液器 ※本公司产品仅供科研实验研究使用，不用于临床诊断 !

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植物琥珀酸脱氢酶活性比色法定量检测试剂盒产品说明书

发布时间：2026/8/4 10:29:06 阅读次数：61

植物琥珀酸脱氢酶活性比色法定量检测试剂盒产品说明书

主要用途

植物琥珀酸脱氢酶（SDH）活性比色法定量检测试剂是一种旨在使用合成电子受体染料，通过反应系统测定染料还原后峰值的降低，即采用比色法测算样品中单位酶活性的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种植物组织，包括种子（seed）、叶片（leaf）、根（root）等裂解悬液中琥珀酸脱氢酶的特异性活性检测。用于衰老、能量代谢、蛋白组学等研究。产品不含污染性蛋白酶，严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定，反应优化，检测敏感。

技术背景

琥珀酸脱氢酶（succinate dehydrogenase；SDH；EC 1.3.99.1）是三羧酸循环（tricarboxylic acid cycle；TCA）或Krebs循环中与细胞线粒体膜相关的重要元素，位于线粒体内膜，参与细胞呼吸链。琥珀酸脱氢酶由27kd和70kd两个单体组成。其功能在于催化琥珀酸（succinate）的氧化反应，产生延胡索酸（furmarate），通过黄素腺嘌呤二核苷酸（Flavin Adenine Dinucleotide；FAD）传递电子。基于琥珀酸脱氢酶的反应原理，使用人工电子受体染料二氯靛酚钠（2,6-Dichloroindophenol sodium；DCIP），接受来自还原型黄素腺嘌呤二核苷酸（Reduced flavin Adenine Dinucleotide；FADH₂）的电子，而被还原，在分光光度仪下，其吸光值（600nm波长）的变化，来测算琥珀酸脱氢酶的活性。其反应方式为：

产品内容

清理液（Reagent A）毫升

裂解液（Reagent B）毫升

缓冲液（Reagent C）毫升

反应液A（Reagent D1）管

反应液B（Reagent D2）毫升

底物液（Reagent E）毫升

阴性液（Reagent F）微升

产品说明书 1份

保存方式

保存清理液（Reagent A）在4℃冰箱里；其余的保存在－20℃冰箱里，避免反复冻融；反应液B（Reagent D2）含有毒性物质，避免直接用手接触；底物液（Reagent E），避免光照；有效保证3月

用户自备

15毫升锥形离心管：用于样品制备的容器

1.5毫升离心管：用于样品制备和保存的容器

DOUNCE匀浆器：用于组织匀化

4℃（微型）台式离心机：用于样品处理

恒温培养箱或恒温水槽：用于反应物孵育

比色皿：用于比色测定的容器

分光光度仪：用于比色分析

实验步骤

实验开始前，将－20℃冰箱里的试剂盒中的试剂溶液置入冰槽里融化；底物液（Reagent E）注意避光。然后进行下列操作。

一、样品准备

1．准备好新鲜的植物组织（叶片、谷粒、种子等），并秤重以确定1克组织重量

2．（选择步骤）放进预冷的15毫升锥形离心管

3．（选择步骤）加入xx毫升清理液（Reagent A）清洗1次

4．即刻用刀片切碎组织

5．放进一个预冷的15毫升锥形离心管

6．加入预冷的xx毫升裂解液（Reagent B）

7．涡旋震荡5秒，充分混匀

8．即刻放进预冷的DOUNCE匀浆器，在冰槽里用研磨棒匀化组织（约80下）

9．将所有组织匀浆物移入1.5毫升离心管，放进4℃微型台式离心机离心10分钟，速度为5000g（或7500RPM，例如eppendorf 5415）

10．小心移出上清液（注意：不要触碰沉淀物）到另一个新的预冷的15毫升锥形离心管

11．（选择步骤）如果上清液含有肉眼可见的残渣，重复离心5分钟一次，速度为5000g（或7500RPM，例如eppendorf 5415）

12．即刻移入到1.5毫升离心管

13．移取10微升进行蛋白定量检测（注意：建议使用 Bradford蛋白质浓度定量试剂盒－G&VS30030.1）

14．放进－70℃的冰箱里保存或置于冰槽里备用

二、测定准备

1．准备好待测样品，置于冰槽里

2．设定好分光光度仪（温度为25℃）：波长600nm，间隔60秒，读数6次（共5分钟），并置零

3．实验开始前，将－20℃冰箱里试剂盒中的反应液A（Reagent D1）置于室温下均衡温度，然后加入xx毫升反应液B（Reagent D2），使其充分溶解，标记为反应工作液，置于冰槽里备用。

4． 缓冲液（Reagent C）室温下均衡温度

三、 背景对照测定

1．移取xx微升缓冲液（Reagent C）到新的比色皿

2．加入xx微升反应工作液

3．加入xx微升底物液（Reagent E）

4．放进25℃培养箱里静置3分钟

5．加入xx微升阴性液（Reagent F）

6．上下倾倒数次，混匀（限定在3秒之内）

7．即刻放进分光光度仪检测，此为背景空对照：OD0分钟－OD5分钟

四、 样品活性测定

1．移取xx微升缓冲液（Reagent C）到新的比色皿

2．加入xx微升反应工作液

3．加入xx微升底物液（Reagent E）

4．放进25℃培养箱里静置3分钟

5．加入100微升待测样品（注意：100微克组织总蛋白；样品须溶解）

6．上下倾倒数次，混匀（限定在3秒之内）

7．即刻放进分光光度仪检测，此为样品总活性读数：OD0分钟－OD5分钟

五、 计算样品活性

注意事项

1．本产品为20次操作，包括背景对照测定

2．操作时，须戴手套

3． 反应液B（Reagent D2）含有毒性物质，避免直接用手接触

4．系统操作过程中，背景测定只需1次

5．加入样品后3秒内即刻比色测定

6．比色测定初始读数（0分钟读数）0.8左右为理想状态

7．反应1分钟后比色测定值趋于稳定；测定值由高到低变化；测定持续5分钟

8．测定值由高到低变化，即5分钟测定读数低于0分钟测定读数，表明有酶活性

9．比色测定后，比色皿须清洗彻底

10．建议待测样本组织总蛋白浓度为100微克/100微升；如果样本酶活性过低或过高，则可以增加或降低样本量；注意计算公式的调整（本公司提供 Bradford蛋白质浓度定量试剂盒G&VS30030.1）

11．活性计算时，可以选择5分钟内单位时间最大线性变化的吸光值

12．琥珀酸脱氢酶单位活性定义为：在25℃，pH 7.5条件下，每分钟内能够还原1微摩尔氧化型二氯靛酚钠（DCIP）所需的酶量作为一个活性单位

13．本公司提供系列细胞酶学技术产品

质量标准

1．本产品经鉴定性能稳定

2．本产品经鉴定检测准确

使用承诺

上海极威生物科技有限公司秉着“信誉至上、客户满意、质量承诺”的宗旨为我们的用户提供优质产品和服务。用户收到货后，应按照产品说明书上的规定妥善保管并在有效期内使用。我们的产品在销售前已作严格的质量鉴定，保证说明书所述的使用效果。在货到后10天内若发现确属本产品的质量问题，请立即以书面形式（实验报告）与本公司联系，并将该产品退回，经检验确系产品质量所致，本公司负责更换产品。如系使用者错误操作所致，本公司不承担由此造成的损失。

友情提醒

IF IT DOESN’T WORK， RECHECK YOUR EXPERIMENT TO SEE WHAT YOU DID WRONG。

订购信息

单组分订购信息

编号名称规格

G&VS10103.5 植物琥珀酸脱氢酶活性比色法定量检测试剂盒 20次

G&VS10103.5A 清理液（Reagent A）毫升

G&VS10103.5B 裂解液（Reagent B）毫升

G&VS10103.5C 缓冲液（Reagent C）毫升

G&VS10103.5D 反应液A（Reagent D1）管

G&VS10103.5E 反应液B（Reagent D2）毫升

G&VS10103.5F 底物液（Reagent E）毫升

G&VS10103.5G 阴性液（Reagent F）毫升

试剂盒订购信息

产品编号	名称	规格
G&VS10103.1	细胞琥珀酸脱氢酶（SDH）活性比色法定量检测试剂盒	20次
G&VS10103.2	组织琥珀酸脱氢酶（SDH）活性比色法定量检测试剂盒	20次
G&VS10103.3	线粒体琥珀酸脱氢酶（SDH）活性比色法定量检测试剂盒	20次
G&VS10103.4	真菌/酵母琥珀酸脱氢酶（SDH）活性比色法定量检测试剂盒	20次
G&VS10103.5	植物琥珀酸脱氢酶（SDH）活性比色法定量检测试剂盒	20次
G&VS10156	分离线粒体纯度双酶法（SDH/AP）检测试剂盒	20次