0 我的购物车

在线客服

热门关键词：白介素 gibco ELISA试剂盒胎牛血清移液器 ※本公司产品仅供科研实验研究使用，不用于临床诊断 !

关于商城

商城指南

支付方式

配送方式

售后服务

组织琥珀酸脱氢酶活性比色法定量检测试剂盒产品说明书

发布时间：2026/8/4 10:36:13 阅读次数：54

主要用途

组织琥珀酸脱氢酶(SDH) 活性比色法定量检测试剂是一种旨在使用合成电子受体染料，通过反应系统测定样品中特异性琥珀酸脱氢酶的活性，即采用比色法测定其染料还原后峰值的降低，以此进行测算单位酶活性的权威而经典的技术方法。该技术由大师级科学家精心研制、成功实验证明的。其适合于各种组织裂解悬液样品琥珀酸脱氢酶的特异性活性检测。用于衰老、能量代谢、蛋白组学、病理生理学、神经病变等研究。产品不含污染性蛋白酶，严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定，反应优化，检测敏感。

技术背景

琥珀酸脱氢酶(succinate dehydrogenase；SDH；EC 1.3.99.1 ) 是三羧酸循环(tricarboxylic acid cycle；TCA) 或Krebs循环中与细胞线粒体膜相关的重要元素，位于线粒体内膜，参与细胞呼吸链。琥珀酸脱氢酶由27kd 和70kd两个单体组成。其功能在于催化琥珀酸(succinate)的氧化反应，产生延胡索酸(furmarate)，通过黄素腺嘌呤二核苷酸(Flavin AdenineDinucleotide；FAD) 传递电子。基于琥珀酸脱氢酶的反应原理，使用人工电子受体染料二氯靛酚钠(2,6-Dichloroindophenol sodium；DCIP)，接受来自还原型黄素腺嘌呤二核苷酸(Reduced flavin Adenine Dinucleotide；FADH2 ) 的电子，而被还原，在分光光度仪下，其吸光值(600nm 波长)的变化，来测算琥珀酸脱氢酶的活性。其反应方式为：

产品内容

清理液(Reagent A)

裂解液(Reagent B)

缓冲液(Reagent C)

反应液(Reagent D)

底物液(Reagent E)

阴性液(Reagent F)

产品说明书

保存方式

保存清理液(Reagent A)在 4℃冰箱里；其余的保存在－20℃冰箱里，避免反复冻融；反应液(Reagent D) 含有毒性物质，避免直接用手接触；底物液(Reagent E)，避免光照，有效保证 6 月

用户自备

15 毫升锥形离心管：用于样品制备的容器

1.5 毫升离心管：用于样品制备和保存的容器

4℃(微型)台式离心机：用于样品处理

恒温培养箱或恒温水槽：用于反应物孵育

比色皿：用于比色测定的容器

分光光度仪：用于比色分析

实验步骤

实验开始前，将－20℃冰箱里的试剂盒中的试剂溶液置入冰槽里融化；底物液(Reagent E) 注意避光。然后进行下列操作。

一、样品准备

1．手术取出动物组织，并秤重以确定 200 毫克组织重量

2． (选择步骤)放进预冷的 15 毫升锥形离心管

3． (选择步骤)加入 3 毫升清理液(Reagent A) 清洗

4． (选择步骤)抽去清洗液

5．移入到一个液氮冻存管

6．即刻放进液氮罐过夜

7．次日从液氮罐里取出，即刻(最快速度)用研磨棒碾碎组织成粉末状(注意： 切莫使组织冻融)

8．放进一个 15 毫升锥形离心管

9．加入置于冰槽里的 500 微升裂解液(Reagent B)

10．强力涡旋震荡 30 秒，充分混匀

11．放进冰槽里孵育 30 分钟，期间每 10 分钟强力涡旋震荡 30 秒(注意： 如需暂时停止， 放进－70℃冰箱 里储存备用)

12．即刻放进 4℃台式离心机离心 10 分钟，速度为 10000g

13．小心移取上清液到新的无菌的 1.5 毫升离心管

14．移取 10 微升进行蛋白定量检测(注意： 建议使用 Bradford 蛋白质浓度定量试剂盒－ G&VS30030.1)

15．放进－70C的冰箱里保存或置于冰槽里备用

二、测定准备

1 ．准备好待测样品，置于冰槽里

2 ．设定好分光光度仪(温度为 25C)：波长 600nm，间隔 60 秒，读数 6 次(共 5 分钟)，并置零

三、背景对照测定

1．移取 xx 微升缓冲液(Reagent C) 到新的比色皿

2．加入 xx 微升反应液(Reagent D)

3．加入 xx 微升底物液(Reagent E)

4．放进 25C培养箱里静置 3 分钟

5．加入 xx 微升阴性液(Reagent F)

6．上下倾倒数次，混匀(限定在 3 秒之内)

7．即刻放进分光光度仪检测，此为背景空对照： OD0 分钟－OD5 分钟

四、样品活性测定

1. 移取 xx 微升缓冲液(Reagent C) 到新的比色皿

2. 加入 xx 微升反应液(Reagent D)

3. 加入 xx 微升底物液(Reagent E)

4. 放进 25C培养箱里静置 3 分钟

5. 加入 100 微升待测样品(注意： 100 微克组织总蛋白；样品须溶解)

6. 上下倾倒数次，混匀(限定在 3 秒之内)

7. 即刻放进分光光度仪检测，此为样品总活性读数： OD0 分钟－OD5 分钟

五、计算样品活性

[ (样品读数－背景读数) X 样品稀释倍数]÷[xx (样品容量，毫升) X xx (毫摩尔吸光系数) X xx (反应时间，分钟) ]＝单位/毫升÷ (样品蛋白浓度)毫克/毫升＝单位/毫克

或者

[ (样品读数－背景读数) X 样品稀释倍数]÷[xx (样品重量，毫克) X xx (毫摩尔吸光系数) X xx (反应时间，分钟) ]＝单位/毫克

单位＝微摩尔 DCIP 还原/分钟

注意事项

1 ．本产品为 40 次操作，包括背景对照测定

2 ．操作时，须戴手套

3 ．反应液(Reagent D) 含有毒性物质，避免直接用手接触

4 ．系统操作过程中，背景测定只需 1 次

5 ．加入底物液(Reagent E) 后 3 秒内即刻比色测定

6 ．反应 1 分钟后比色测定值趋于稳定；测定值由高到低变化；测定持续 5 分钟

7 ．测定值由高到低变化，即 5 分钟测定读数低于 0 分钟测定读数，表明有酶活性

8 ．比色测定后，比色皿须清洗彻底

9 ．建议待测样本组织总蛋白浓度为 100 微克/100 微升；如果样本酶活性过低或过高，则可以增加或降低样本量；注意计算公式的调整(本公司提供 Bradford 蛋白质浓度定量试剂盒 G&VS30030. 1)

10．活性计算时，可以选择 5 分钟内单位时间最大线性变化的吸光值

11．琥珀酸脱氢酶单位活性定义为：在 25C ，pH 7.5 条件下，每分钟内能够还原 1 微摩尔氧化型二氯靛酚钠(DCIP)所需的酶量作为一个活性单位

12．本公司提供系列细胞酶学技术产品

质量标准

1 ．本产品经鉴定性能稳定

2 ．本产品经鉴定检测准确

使用承诺

上海极威生物科技有限公司秉着“信誉至上、客户满意、质量承诺”的宗旨为我们的用户提供优质产品和服务。用户收到货后，应按照产品说明书上的规定妥善保管并在有效期内使用。我们的产品在销售前已作严格的质量鉴定，保证说明书所述的使用效果。在货到后 10 天内若发现确属本产品的质量问题，请立即以书面形式(实验报告) 与本公司联系，并将该产品退回，经检验确系产品质量所致，本公司负责更换产品。如系使用者错误操作所致，本公司不承担由此造成的损失。

友情提醒

IF IT DOESN’T WORK ， RECHECK YOUR EXPERIMENT TO SEE WHAT YOU DID WRONG。

订购信息

编号	名称规格
G&VS10103.2	组织琥珀酸脱氢酶活性比色法定量检测试剂盒 40 次
G&VS10103.2A	清理液(Reagent A) 100 毫升
G&VS10103.2B	裂解液(Reagent B) 100 毫升
G&VS10103.2C	缓冲液(Reagent C) 100 毫升
G&VS10103.2D	反应液(Reagent D) 10 毫升
G&VS10103.2E	底物液(Reagent E) 5 毫升
G&VS10103.2F	阴性液(Reagent F) 5 毫升
产品编号	名称	规格
G&VS10103. 1	细胞琥珀酸脱氢酶(SDH) 活性比色法定量检测试剂盒	20 次
G&VS10103.2	组织琥珀酸脱氢酶(SDH) 活性比色法定量检测试剂盒	20 次
G&VS10103.3	线粒体琥珀酸脱氢酶(SDH)活性比色法定量检测试剂盒	20 次
G&VS10103.4	真菌/酵母琥珀酸脱氢酶(SDH)活性比色法定量检测试剂盒	20 次
G&VS10103.5	植物琥珀酸脱氢酶(SDH) 活性比色法定量检测试剂盒	20 次
G&VS10156	分离线粒体纯度双酶法(SDH/AP)检测试剂盒	20 次