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发布时间:2026/8/4 10:41:20 阅读次数:61
活体细胞线粒体肿胀流式细胞仪测定试剂盒产品说明书
主要用途
活体细胞线粒体肿胀流式细胞仪测定试剂是一种旨在通过流式细胞仪检测线粒体的光散射性变化,来分析和观察线粒体基质容积或线粒体膨胀性的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种细胞内线粒体膨胀程度的定量检测。产品严格无菌,即到即用,活体检测,分辨率高,操作简捷,性能稳定。
技术背景
线粒体容积变化是衡量线粒体活性的基本参数。线粒体应对细胞对于药物、凋亡诱导、细胞周期变化等反应采取的活性变化,包括膜电位、氧消耗、以及膜通道孔(mitochondrial permeability transition pore;MPTP)功能等的改变。线粒体基质容量(mitochondrial matrix volume)成为检测线粒体活性和功能的指标。一旦各种因素包括凋亡刺激、活性氧影响导致线粒体膜通道孔开放或膜电位的消失,而导致线粒体容积增大,即线粒体膨胀(mitochondrial swelling),使线粒体的光散射性(light scattering)降低,通过流式细胞仪的细胞内光散射性,包括前向角散射(Forward Scatter;FS)和侧向角散射(Side Scatter;SS)的测定和分析,定量分析线粒体的膨胀程度。流式细胞术(FLOW CYTOMETRY)是七十年代发展起来的集计算机、激光、流体力学、细胞化学、细胞免疫学为一体的高科学技术。该波长区域可以避免细胞色素和蛋白质的干扰。其中前向角散射测定细胞的大小;而侧向角散射测定被测细胞的胞浆、质膜等的折射率和细胞内颗粒的性状,以此分析线粒体的肿胀变化。
产品内容
缓冲液(Reagent A) 毫升
染色液(Reagent B) 微升
产品说明书 1份
保存方式
保存在-20℃冰箱里,染色液(Reagent B)避免光照;有效保证6月
用户自备
1.5毫升离心管:用于样品操作的容器
微型台式离心机:用于样品操作
细胞培养箱:用于染色孵育
流式细胞仪:用于线粒体散射光分析
实验步骤
1. 准备好1毫升待测的细胞样品(3 X 108细胞/毫升):对照样品和处理样品
2. 转移到1.5毫升离心管
3. 放进微型台式离心机离心5分钟,速度为300g
4. 小心抽去上清液
5. 分别加入xx毫升缓冲液(Reagent A),混匀细胞颗粒群
6. 加入用户自备的的诱导剂或抑制剂等到处理样品管
7. 在药物处理结束前10分钟
8. 分别加入xx微升染色液(Reagent B),混匀
9. 在37℃细胞培养箱孵育10分钟,避免光照
10. 即刻放进流式细胞仪检测(测读10000细胞)
11. 指标一:线粒体总量检测——激发波长488nm;散发波长525nm:要求对照组和处理组的峰值基本一致,样本比较更为可靠
12. 指标二:细胞容量检测——前向角散射(Forward Scatter;FS):峰值右移,表明线粒体膨胀增强
13. 指标三:线粒体折射检测——侧向角散射(Side Scatter;SS):峰值左移,表明线粒体膨胀增强
14. 指标四:散射光散点图——R1门密度越高,即百分比越高,分析对象越准确
15. 指标五:FS/SS比值(ratio)——比值越高,表明线粒体膨胀增强
16. 指标六:线粒体膨胀率(%)——百分率越高,表明线粒体膨胀增强
【(对照组SS—处理组SS)÷ 对照组SS】X 100%
注意事项
1. 本产品为20次操作
2. 本产品用于线粒体膨胀度检测、以及诱导剂和抑制剂筛选
3. 操作时,须戴手套
4. 使用时,避免污染母液,尤其是缓冲液(Reagent A)
5. 建议使用未经诱导或抑制处理的样品作为对照样品
6. 建议使用解偶联剂羰基氰化物间氯苯腙(carbonylcyanide-m-chlorophenylhydrazone;CCCP)0.1毫摩尔处理10分钟,可以诱导线粒体膨胀,作为阳性对照
7. 孵育时,避免光照
8. 建议细胞染色完成后,即刻进行细胞流式仪分析
9. 细胞流式仪分析前,须混匀内容物
10. 细胞检测量不得少于10000个
11. 线粒体膨胀诱导剂或抑制剂筛选检测参考图像如下
12. 本公司提供系列线粒体分析试剂产品
质量标准
1. 本产品经鉴定性能稳定
2. 本产品经鉴定检测敏感
使用承诺
上海极威生物科技有限公司秉着“信誉至上、客户满意、质量承诺”的宗旨为我们的用户提供优质产品和服务。用户收到货后,应按照产品说明书上的规定妥善保管并在有效期内使用。我们的产品在销售前已作严格的质量鉴定,保证说明书所述的使用效果。在货到后10天内若发现确属本产品的质量问题,请立即以书面形式(实验报告)与本公司联系,并将该产品退回,经检验确系产品质量所致,本公司负责更换产品。如系使用者错误操作所致,本公司不承担由此造成的损失。
友情提醒
IF IT DOESN’T WORK, RECHECK YOUR EXPERIMENT TO SEE WHAT YOU DID WRONG。
订购信息
单组分订购信息
编号 名称 规格
G&VS10102.1 活体细胞线粒体肿胀流式细胞仪测定试剂盒 20次
G&VS10102.1A 缓冲液(Reagent A) 毫升
G&VS10102.1B 染色液(Reagent B) 毫升
试剂盒订购信息
| 产品编号 | 名称 | 规格 |
| G&VS10013.1 | 纯化线粒体内膜功能/膜电位测定试剂盒 | 100次 |
| G&VS10013.2 | 活体细胞线粒体内膜功能/膜电位测定试剂盒 | 20次 |
| G&VS10013.3 | 完全线粒体内膜功能/膜电位测定试剂盒 | 20次 |
| G&VS10013.4 | 活体组织线粒体内膜功能/膜电位测定试剂盒 | 10次 |
| G&VS10014.1 | 线粒体外膜功能检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS10015 | 线粒体功能詹纳斯绿B(JGB)染色试剂盒 | 20次 |
| G&VS10017.1 | 活体细胞线粒体损伤/氧化(NAO)荧光测定试剂盒 | 20/200次 |
| G&VS10017.2 | 纯化线粒体损伤/氧化(NAO)荧光测定试剂盒 | 20/200次 |
| G&VS10017.3 | 真菌/酵母细胞线粒体损伤/氧化(NAO)荧光测定试剂盒 | 20/200次 |
| G&VS10019.1 | 活体细胞线粒体形态/活性荧光染色试剂盒 | 100/200次 |
| G&VS10019.2 | 植物组织线粒体形态/活性荧光染色试剂盒 | 20次 |
| G&VS10019.3 | 真菌/酵母细胞线粒体形态/活性荧光染色试剂盒 | 100次 |
| G&VS10020.1 | 活体细胞线粒体跟踪试剂盒 | 100次 |
| G&VS10020.2 | 活体细胞线粒体长期跟踪试剂盒 | 20次 |
| G&VS10095.1 | 活体细胞线粒体膜通道孔(MPTP)检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS10095.2 | 纯化线粒体膜通道孔(MPTP)检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS10095.3 | 纯化线粒体膜通道孔(MPTP)光谱法检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS10095.4 | 冰冻切片组织线粒体膜通道孔(MPTP)检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS10097 | 纯化线粒体呼吸控制率(RCR)定量检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS10098 | 纯化线粒体磷氧比(ADP/O)定量检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS10101 | 纯化线粒体肿胀光谱法测定试剂盒 | 50次 |
| G&VS10102.1 | 活体细胞线粒体肿胀流式细胞仪测定试剂盒 | 20次 |
| G&VS10102.2 | 纯化线粒体肿胀流式细胞仪测定试剂盒 | 20次 |
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