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发布时间：2026/8/7 9:17:50 阅读次数：14
细胞/组织微管（microtubule）分离试剂盒产品说明书
主要用途
细胞/组织微管（microtubule）分离试剂是一种旨在从动物细胞或组织中分离出完整的微管蛋白的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。适合于动物脑组织和培养细胞的微管的制备。其制备物产量高，可以被用于微管相关蛋白（microtubule associated protein；MAP）的分离、微管聚合作用以及影响因子分子等的研究。产品不含污染性蛋白酶和核酶，即到即用，性能稳定。
技术背景
微管（microtubules）是细胞骨架的成分之一，构成细胞浆中的基本结构网络，在有丝分裂、胞质分裂、囊泡转运、细胞迁徙、细胞极性方面具有重要作用。微管是微管蛋白（tubulin）的多聚体。微管蛋白分成5种亚型：α、β、γ、δ、ε。其中α和β微管蛋白形成异源二聚体，55Kd分子量，进而多重聚合成微管纤维（filaments）。微管结构具有动态性特点，实施聚合（polymerization）/装配（assembly）或去聚合（depolymerization）/去装配（disassembly）操作。
产品内容
清理液（Reagent A） 毫升
裂解液（Reagent B） 毫升
重合液（Reagent C） 毫升
去干扰液（Reagent D） 毫升
强化液（Reagent E） 微升
保存液（Reagent F） 毫升
产品说明书 1份
保存方式
保存清理液（Reagent A）和重合液（Reagent C）在4℃冰箱里，其余的保存在-20℃冰箱里，有效保证6月
用户自备
HANK平衡盐缓冲溶液（G&VS12028）或PBS缓冲溶液（G&VS12033）：用于清理细胞
胰蛋白酶乙二胺四乙酸混合液（G&VS12024）：用于细胞脱离
完全细胞培养液（G&VS12052）：用于细胞处理所需的培养基
15毫升锥形离心管：用于样品操作的容器
50毫升锥形离心管：用于样品操作的容器
1.5毫升离心管：用于样品操作的容器
4℃台式离心机：用于样品操作
超速离心机：用于分离微管成分
DOUNCE匀浆器：用于裂解细胞
恒温水槽：用于样品孵育
实验步骤
一、 动物软组织微管分离
1． 手术取出动物组织，并秤重以确定1克组织重量
2． （选择步骤）放进预冷的50毫升锥形离心管
3． （选择步骤）加入xx毫升清理液（Reagent A）清洗1次
4． 即刻用刀片切碎组织
5． 放进一个预冷的15毫升锥形离心管
6． 加入xx毫升预冷的裂解液（Reagent B）
7． 涡旋震荡5秒，充分混匀
8． 即刻放入预冷的DOUNCE匀浆器
9． 在冰槽里用匀浆棒匀化组织（约40至80下）
10． 将所有组织匀浆物移入15毫升锥形离心管
11． 在冰槽里孵育30分钟
12． 放进4℃台式离心机离心10分钟，速度为700g
13． 小心移出上清液到另一个新的预冷的15毫升锥形离心管——此步骤去除细胞核和未溶解的细胞
14． 放进4℃超速离心机离心30分钟，速度为20000g
15． 小心移取4毫升上清液至新的15毫升锥形离心管
16． 加入xx毫升重合液（Reagent C）
17． 涡旋震荡，直至充分混匀
18． 加入xx微升去干扰液（Reagent D）
19． 加入xx微升强化液（Reagent E）
20． 涡旋震荡，直至充分混匀
21． 放进37℃恒温水槽孵育45分钟
22． 放进25℃超速离心机离心90分钟，速度为20000g
23． 小心抽去上清液，保留沉淀颗粒（注意：颗粒可能为透明状）——此步骤获得聚合型微管沉淀物
24． 加入xx毫升预热的保存液（Reagent F），充分混匀
25． 移取10微升进行蛋白定量检测（注意：建议使用 Bradford蛋白质浓度定量试剂盒－G&VS30030.1）
26． 即刻移入1.5毫升离心管，放进－70℃冰箱里或置于室温下备用（去聚合和聚合实验等）
二、动物细胞微管分离
1． 准备5至10瓶75cm2细胞培养瓶的细胞（5 X 107），直至细胞生长铺满整个培养表面
2． 分别加入10毫升用户自备的HANK平衡盐缓冲溶液或PBS缓冲溶液到每个细胞培养瓶，覆盖培养瓶表面，然后抽去
3． 重复实验步骤2一次
4． 加入3毫升用户自备的胰蛋白酶乙二胺四乙酸混合液，铺满整个细胞生长表面
5． 置入37℃培养箱3分种
6． 轻轻手击震动培养瓶，使细胞脱落，
7． 分别加入10毫升用户自备的完全细胞培养液
8． 移入一个50毫升锥形离心管
9． 放进台式离心机离心10分钟，速度为200g
10． 小心抽去上清液
11． 加入xx毫升预冷的清理液（Reagent A），混匀细胞
12． 放进台式离心机离心10分钟，速度为300g
13． 小心抽去上清液
14． 加入xx毫升预冷的裂解液（Reagent B）
15． 涡旋震荡5秒，充分混匀
16． 即刻放入预冷的DOUNCE匀浆器
17． 在冰槽里用匀浆棒匀化细胞（约40至80下）
18． 将所有细胞匀浆物移入15毫升锥形离心管
19． 在冰槽里孵育30分钟
20． 放进4℃台式离心机离心10分钟，速度为700g
21． 小心移出上清液到另一个新的预冷的15毫升锥形离心管——此步骤去除细胞核和未溶解的细胞
22． 放进4℃超速离心机离心30分钟，速度为20000g
23． 小心移取4毫升上清液至新的15毫升锥形离心管
24． 加入xx毫升重合液（Reagent C）
25． 涡旋震荡，直至充分混匀
26． 加入xx微升去干扰液（Reagent D）
27． 加入xx微升强化液（Reagent E）
28． 涡旋震荡，直至充分混匀
29． 放进37℃恒温水槽孵育45分钟
30． 放进25℃超速离心机离心90分钟，速度为20000g
31． 小心抽去上清液，保留沉淀颗粒（注意：颗粒可能为透明状）——此步骤获得聚合型微管沉淀物
32． 加入xx毫升预热的保存液（Reagent F），充分混匀
33． 移取10微升进行蛋白定量检测（注意：建议使用 Bradford蛋白质浓度定量试剂盒－G&VS30030.1）
34． 即刻移入1.5毫升离心管，放进－70℃冰箱里或置于室温下备用（去聚合和聚合实验等）
注意事项
1． 本产品为10次（1克动物组织或5 X 107细胞）操作
2． 操作时，须戴手套
3． 重合液（Reagent C）较为粘稠，使用1毫升枪头缓慢抽吸
4． 建议使用足够的样品量
5． 建议严格控制操作时间
6． 通常1克动物脑组织或5 X 107细胞的微管含量为1毫克蛋白
7． 本公司提供系列微管分析试剂产品
质量标准
1． 本产品经鉴定性能稳定
2． 本产品经鉴定分离的微管维持正常活性
3． 本产品经鉴定不含污染性蛋白酶和核酶
使用承诺
上海极威生物科技有限公司秉着“信誉至上、客户满意、质量承诺”的宗旨为我们的用户提供优质产品和服务。用户收到货后，应按照产品说明书上的规定妥善保管并在有效期内使用。我们的产品在销售前已作严格的质量鉴定，保证说明书所述的使用效果。在货到后10天内若发现确属本产品的质量问题，请立即以书面形式（实验报告）与本公司联系，并将该产品退回，经检验确系产品质量所致，本公司负责更换产品。如系使用者错误操作所致，本公司不承担由此造成的损失。
友情提醒
IF IT DOESN’T WORK， RECHECK YOUR EXPERIMENT TO SEE WHAT YOU DID WRONG。
订购信息
单组分订购信息
编号 名称 规格
G&VS10117 细胞/组织微管（microtubule）分离试剂盒 10次
G&VS10117A 清理液（Reagent A） 毫升
G&VS10117B 裂解液（Reagent B） 毫升
G&VS10117C 重合液（Reagent C） 毫升
G&VS10117D 去干扰液（Reagent D） 毫升
G&VS10117E 强化液（Reagent E） 毫升
G&VS10117F 保存液（Reagent F） 毫升
G&VS12024 胰蛋白酶乙二胺四乙酸混合液 毫升
G&VS12028 HANKS平衡盐缓冲溶液 毫升
G&VS12033 PBS缓冲溶液 毫升
G&VS12052 DMEM完全细胞培养基 毫升
试剂盒订购信息
| 产品编号 | 名称 | 规格 |
| G&VS10117 | 细胞/组织微管（microtubule）分离试剂盒 | 10次 |
| G&VS10272 | 体外肌动蛋白（ACTIN）结合分子（binding molecules）检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS10273 | 体外波形蛋白（Vimentin）结合分子（binding molecules）检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS10274 | 体外微管蛋白（tubulin）结合分子（binding molecules）检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS10275.1 | 肌动蛋白聚合作用（polymerization）荧光检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS10275.2 | 肌动蛋白体内聚合作用（polymerization）检测试剂盒 | 5次 |
| G&VS10276.1 | 体外微管蛋白聚合作用（polymerization）比色法检测试剂盒（300微克，标准样） | 20次 |
| G&VS12319 | 纯化微管蛋白（Tubulin） | 1毫克/5毫克 |
| G&VS10276.2 | 体外微管蛋白聚合作用（polymerization）荧光检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS10276.3 | 体内微管蛋白聚合作用（polymerization）检测试剂盒 | 5次 |
| G&VS10277.1 | 细胞骨架（肌动蛋白微丝；F-ACTIN）绿色荧光染色试剂盒 | 10次 |
| G&VS10277.2 | 细胞骨架（肌动蛋白单体；G-ACTIN）红色荧光染色试剂盒 | 10次 |
| G&VS10278 | 微管（microtubules）荧光染色试剂盒 | 10次 |
| G&VS10279 | 粘着斑蛋白（vinculin）荧光染色试剂盒 | 10次 |
| G&VS10280 | 驱动蛋白（kinesin）型ATP酶活性酶连续反应光谱法定量检测试剂盒 | 20次 |
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