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发布时间:2026/8/7 12:55:14 阅读次数:18
体液总抗氧化能力比色法定量检测试剂盒产品说明书
主要用途
体液总抗氧化能力(TAC) 比色法定量检测试剂是一种旨在通过高硫酸钾的参与, 使染料 ABTS 氧化, 在抗氧化剂的存在下,通过分光光度仪, 观察其峰值下降的变化,来定量检测对应于标准水溶性生 育酚 Trolox 的总抗氧化能力, 即抑制氧化等值浓度的权威而经典的技术方法。该技术由大师级科学家精心 研制、成功实验证明的。适用于各种体液包括血浆、血清、尿液、脑脊液、唾液、精液等各种体液的总抗 氧化能力检测。产品严格无菌,即到即用,操作简易,性能稳定。
技术背景
超氧自由基阴离子(superoxide radical;O2- )、过氧化氢(hydrogen peroxide;H2O2)、羟自由基或氢氧基(hydroxyl radical;OH- )、过氧化基(peroxyl radical;ROO- )、氢过氧自由基(hydroperoxyl;HOO)、烷氧自由基(alcoxyl radical)、氮氧基(nitric Oxide;NO- )、过氧亚硝基阴离子(peroxynitrite anion;ONOO- ) 次氯酸(hypochlorous acid;HOCl)、半醌自由基(semiquinone radical)、单线态氧气(singlet oxygen)等细胞内活性氧族(Reactive Oxygen Species;ROS) 的产生和增多, 将导致细胞衰老或凋亡, 甚而导致诸如冠心病、风湿性关节炎、肿瘤、退行性病变等各种病理状况。在生物系统内,通过抗氧化酶例如超氧化物 歧化酶、过氧化氢酶和谷胱甘肽过氧化物酶等,大分子,例如白蛋白、铜蓝蛋白(ceruloplasmin;CER)、铁蛋白(ferritin)和抗氧化因子,例如生育醇、类胡萝卜素、抗坏血酸、还原性谷胱甘肽和尿酸胆红素 (bilirubin)等,产生抗氧化能力,即捕获自由基的能力,达到消除或降低ROS的损害。通过高硫酸钾 (potassium persulfate)氧化2,2’-连氮-双(3- 乙基苯并噻唑-6-磺酸) (2,2'-Azino-bis(3-ethylbenzthiazoline- 6-sulfonic acid),diammonium salt;ABTS) 产生的ABTS自由基, 衡量体系中抗氧化剂的捕获自由基、消耗 抗氧化剂能力,在分光光度仪(730nm波长)的帮助下,观察其峰值下降的变化,并与标准化抗氧化剂水 溶性生育酚Trolox对照。
产品内容
缓冲液(Reagent A)
染色液(Reagent B)
氧化液(Reagent C)
标准液(Reagent D)
产品说明书
保存方式
保存在-20℃冰箱里, 染色液(Reagent B)和 氧化液(Reagent C),严格避免光照; 有效保证 3 月
用户自备
1.5 毫升离心管:用于样品存放和标准品配制的容器
4℃微型台式离心机:用于澄清样品
96 孔板:用于检测用的容器
分光光度仪或酶标仪:用于检测染色变化
实验步骤
一、 样品准备
选择一:血浆样品
1. 准备好肝素或 ACD 抗凝管(注意: 避免使用EDTA 抗凝管)
2. 抽取 1 毫升血液,置于抗凝管里
3. 放进 4℃微型台式离心机离心 10 分钟,速度为 700g(或 3000RPM,例如 eppendorf 5415)
4. 小心移取上层黄色液体到新的 1.5 毫升离心管 ――此为血浆成分 (注意: 避免触碰白色液体层)
5. 即刻置于冰槽里备用或放进-70℃冰箱里保存
6. 移取 10 微升上述制备的血浆到新的 1.5 毫升离心管
7. 加入 x 微升 缓冲液(Reagent A),混匀
8. 放在冰槽里待测
选择二:血清样品
1. 准备好不含抗凝剂的储存管
2. 抽取 1 毫升血液,置于储存管里
3. 室温下,静置 30 分钟,直至血液凝结
4. 放进 4℃微型台式离心机离心 15 分钟,速度为 2000g(或 5000RPM,例如 eppendorf 5415)
5. 小心移取上层黄色液体到新的 1.5 毫升离心管 ――此为血清成分 (注意: 避免触碰白色液体层)
6. 即刻置于冰槽里备用或放进-70℃冰箱里保存
7. 移取 10 微升上述制备的血清到新的 1.5 毫升离心管
8. 加入 x 微升 缓冲液(Reagent A),混匀
9. 放在冰槽里待测
选择三:尿液/脑脊液/唾液/精液样品
1. 准备好 1.5 毫升离心管
2. 移取 1 毫升液体到离心管
3. 放进 4℃微型台式离心机离心 10 分钟,速度为 700g(或 3000RPM,例如 eppendorf 5415)
4. 小心移取上清液到新的 1.5 毫升离心管
5. 即刻置于冰槽里备用或放进-70℃冰箱里保存
6. 移取 10 微升到新的 1.5 毫升离心管
7 . 加入 x 微升 缓冲液(Reagent A),混匀
8. 放在冰槽里待测
二、标准液准备
1. 准备好 5 个 1.5 毫升离心管,标记为 1 至 5 号管
2. 分别加入 x 微升 缓冲液(Reagent A) 到 2 至 5 号管
3 . 移取 x 微升 标准液(Reagent D) 到 1 号管,混匀
4 . 小心移取 x 微升 1 号管的 标准液(Reagent D) 到 2 号管,混匀
5 . 小心移取 x 微升 2 号管稀释的标准液(Reagent D) 到 3 号管,混匀
6. 小心移取 x 微升 3 号管稀释的 标准液(Reagent D) 到 4 号管,混匀
7. 将 1 至 5 号管放进冰槽里备用,避免光照;标准管浓度见下表
| 管号 | 缓冲液(Reagent A) | 标准液(Reagent D) | 标准 Trolox 浓度 |
| 1 | 微升 | 微升 | 微摩尔 |
| 2 | 微升 | 微升 1 号管 | 微摩尔 |
| 3 | 微升 | 微升 2 号管 | 微摩尔 |
| 4 | 微升 | 微升 3 号管 | 微摩尔 |
| 5 | 微升 | 0 | 0 |
三、 样品测读
实验开始前,将-20 冰箱里的试剂置于室温下融化,避免光照。然后进行下列操作。
1. 准备 1 个 96 孔板,做好标记:空白对照孔、标准对照孔、样品孔
2. 分别移取 x 微升 缓冲液(Reagent A) 到 96 孔板里的每个孔里
3. 分别加入 x 微升 染色液(Reagent B)
4. 分别加入 x 微升 氧化液(Reagent C)
5. 加入 x 微升上述配制的 标准液(Reagent D) 到相应标准对照孔里
6. 加入 x 微升体液样品到样品孔里
7. 轻轻摇动 96 孔板,使其混匀
8. 室温下孵育 1 分钟
9. 即刻放进酶标仪里测读:730nm 波长
10. 分析结果:
1) 构建标准曲线:纵座标(Y 轴)为吸光单位(OD730nm);横座标(X 轴)为标准 Trolox 浓 度(微摩尔)
2) 空白对照孔为最大吸光单位(OD730nm)读数
3) 标准对照孔和样品孔为实际吸光单位(OD730nm)读数
4) 计算样品实际总抗氧化能力
根据标准曲线计算所得样品总抗氧化能力 X 25 (体系系数) X 样品稀释倍数= (微摩尔 TROLOX 等值)
5) 根据下列公式计算样品总抗氧化能力(抑制百分率)
【(空白对照孔吸光单位读数-实际吸光单位读数) ÷空白对照孔吸光单位读数】 X100%X 样品稀释倍数
注意事项
1. 本产品为 50 次操作
2. 操作时,须戴手套
3. 体液制备的所有操作均须在 4℃状态下进行
4. 测试前,样品须处于新鲜收集
5. 样品须清澈
6. 样品避免含有 Tris 、EDTA 和还原剂等
7. 本产品可以检测纳摩尔级抗氧化剂
8. 样本量不宜超过 20 微升
9. 可以使用比色皿检测
10.如果样品抗氧化剂浓度过高或过低, 建议稀释或增加样品浓度
11.如果测试样品很多,建议使用排枪移液
12.如果用户没有 730nm 波长滤波器,可以使用 640nm 至 810nm 之间的任一波长替代;或者使用 405nm 波长替代
13.人体体液的总抗氧化能力在 0.2 至 2 毫摩尔标准水溶性生育酚 Trolox 的浓度
14.本公司提供系列抗氧化分析试剂产品
质量标准
1 . 本产品经鉴定性能稳定
2 . 本产品经鉴定检测敏感
使用承诺
上海极威生物科技有限公司秉着“信誉至上、客户满意、质量承诺”的宗旨为我们的用户提供优质产品和服务。用户收到货 后,应按照产品说明书上的规定妥善保管并在有效期内使用。我们的产品在销售前已作严格的质量鉴定, 保证说明书所述的使用效果。在货到后 10 天内若发现确属本产品的质量问题, 请立即以书面形式(实验报 告)与本公司联系, 并将该产品退回, 经检验确系产品质量所致, 本公司负责更换产品。如系使用者错误 操作所致,本公司不承担由此造成的损失。
友情提醒
IF IT DOESN’T WORK , RECHECK YOUR EXPERIMENT TO SEE WHAT YOU DID WRONG。
订购信息
| 编号 | 名称 | 规格 |
| G&VS10114.4 | 体液总抗氧化能力比色法定量检测试剂盒 | 50 次 |
| G&VS10114.4A | 缓冲液(Reagent A) | 100 毫升 |
| G&VS10114.4B | 染色液(Reagent B) | 10 毫升 |
| G&VS10114.4C | 氧化液(Reagent C) | 10 毫升 |
| G&VS10114.4D | 标准液(Reagent D) | 1 毫升 |
| 产品编号 | 名称 | 规格 |
| G&VS10053. 1 | 细胞总抗氧化能力(TAC)化学发光法定量检测试剂盒 | 50 次 |
| G&VS10053.2 | 组织总抗氧化能力(TAC)化学发光法定量检测试剂盒 | 50 次 |
| G&VS10053.3 | 食物总抗氧化能力(TAC)化学发光法定量检测试剂盒 | 50 次 |
| G&VS10053.4 | 体液总抗氧化能力(TAC)化学发光法定量检测试剂盒 | 50 次 |
| G&VS10114. 1 | 细胞总抗氧化能力(TAC)比色法(ABTS)定量检测试剂盒 | 50 次 |
| G&VS10114.2 | 组织总抗氧化能力(TAC)比色法(ABTS)定量检测试剂盒 | 50 次 |
| G&VS10114.3 | 食物总抗氧化能力(TAC)比色法(ABTS)定量检测试剂盒 | 50 次 |
| G&VS10114.4 | 体液总抗氧化能力(TAC)比色法(ABTS)定量检测试剂盒 | 50 次 |
| G&VS10131. 1 | 细胞总抗氧化能力(TAC)比色法(DDPH)定量检测试剂盒 | 50 次 |
| G&VS10131.2 | 组织总抗氧化能力(TAC)比色法(DDPH)定量检测试剂盒 | 50 次 |
| G&VS10131.3 | 食物总抗氧化能力(TAC)比色法(DDPH)定量检测试剂盒 | 50 次 |
| G&VS10131.4 | 体液总抗氧化能力(TAC)比色法(DDPH)定量检测试剂盒 | 50 次 |
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