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体液总抗氧化能力比色法定量检测试剂盒产品说明书

发布时间:2026/8/7 12:55:14      阅读次数:18

 

体液总抗氧化能力比色法定量检测试剂盒产品说明书

要用途

体液总抗氧化能力(TAC) 比色法定量检测试剂是一种旨在通过高硫酸钾的参与, 使染料 ABTS 氧化, 氧化剂的存在下,通过分光光度仪, 观察其峰值下降的变化,来定量检测对应于标准水溶性生 育酚 Trolox 的总抗氧化能力, 即抑制氧化等值浓度的权威而经典的技术方法。该技术由大师级科学家精心 研制、成功实验证明的。适用于各种体液包括血浆、血清、尿液、脑脊液、唾液、精液等各种体液的总抗 化能力检测。产品严格无菌,即到即用,操作简易,性能稳定。

术背景

超氧自由阴离子(superoxide radicalO2- )、过氧化氢(hydrogen peroxideH2O2)、羟自由基或氢氧基(hydroxyl radicalOH- )、过氧化基(peroxyl radicalROO- )、氢过氧自由基(hydroperoxylHOO)、烷氧自(alcoxyl radical)、氮氧基(nitric OxideNO- )、过氧亚硝基阴离子(peroxynitrite anionONOO- ) 氯酸(hypochlorous acidHOCl)、半醌自由基(semiquinone radical)、单线态氧气(singlet oxygen)等细胞内活性氧族(Reactive Oxygen SpeciesROS) 的产生和增多, 将导致细胞衰老或凋亡, 甚而导致诸冠心病、风湿性关节炎、肿瘤、退行性病变等各种病理状况。在生物系统内,通过抗氧化酶例如超氧化物 歧化酶、过氧化氢酶和谷胱肽过氧化物酶等,大分子,例如白蛋白、铜蓝蛋白(ceruloplasminCER)、铁蛋白(ferritin)和抗氧化因子,例如生育醇、类胡萝卜素、抗坏血酸、还原性谷胱甘肽和尿酸胆红 (bilirubin)等,产生抗氧化能力,即捕获自由基的能力,达到消除或降低ROS的损害。通过高硫酸钾 (potassium persulfate)氧化2,2’-连氮-(3- 乙基苯并噻唑-6-磺酸) (2,2'-Azino-bis(3-ethylbenzthiazoline- 6-sulfonic acid)diammonium saltABTS) 产生的ABTS自由基, 衡量体系中抗氧化剂的捕获自由基、消耗 抗氧化剂能力,在分光光度仪(730nm波长)的帮助下,观察其峰值下降的变化,并与标准化抗氧化剂水 性生育酚Trolox对照。

产品内容

缓冲液(Reagent A)

染色液(Reagent B)

氧化液(Reagent C)

标准液(Reagent D)

品说明书

 

保存方式

 

保存在-20冰箱里, 染色液(Reagent B)和 氧化液(Reagent C),严格避免光照; 效保证 3 月

用户自备

1.5 毫升离心管:用于样品存放和标准品配制的容器

4℃微型台式离心机:用于澄清样品

96 板:用于检测用的容器

分光光度仪或酶标仪:用于检测染色变化

 

实验步骤

一、  样品准

选择一:血浆样品

1  准备好肝素或 ACD 抗凝管(注意: 避免使用EDTA  抗凝管)

2  抽取 1 毫升血液,置于抗凝管里

3.  放进 4微型台式离心机离心 10 分钟,速度为 700g(或 3000RPM,例如 eppendorf 5415)

4.  小移取上层黄色液体到新的 1.5 毫升离心管 ――此为血浆成分 (注意: 避免触碰白色液体层)

5.  即刻置于冰槽里备用或放进-70℃冰箱里保存

6.  移取 10 微升上述制备的血浆到新的 1.5 毫升离心管

7  加入 x 微升 缓冲液(Reagent A),混匀

8  放在冰槽里待测

 

选择二:血清样品

1   准备好不含抗凝剂的储存管

2  抽取 1 毫升血液,置于储存管里

3  室温下,静置 30 分钟,直至血液凝结

4.  放进 4℃微型台式离心机离心 15 分钟,速度为 2000g(或 5000RPM,例如 eppendorf 5415)

5.  小移取上层黄色液体到新的 1.5 毫升离心管 ――此为血清成分 (注意: 避免触碰白色液体层)

6.  即刻置于冰槽里备用或放进-70℃冰箱里保

7.  移取 10 微升上述制备的血清到新的 1.5 毫升离心管

8.  加入 x 微升 缓冲液(Reagent A),混匀

9  放在冰槽里待测

 

选择三:尿/脑脊液/唾液/精液样品

1  准备好 1.5 毫升离心管

2  移取 1 毫升液体到离心管

3.  放进 4微型台式离心机离心 10 分钟,速度为 700g(或 3000RPM,例如 eppendorf 5415)

4.  小心移取上清液到新的 1.5 毫升离心管

5.  即刻置于冰槽里备用或放进-70℃冰箱里保存

6  移取 10 微升到新的 1.5 毫升离心管

7   加入 x 微升 缓冲液(Reagent A),混匀

8  放在冰槽里待测

 

二、标准液准备

1  准备好 5 个 1.5 毫升离心管,标记为 1 至 5 号管

2  分别加入 x 微升 缓冲液(Reagent A) 到 2 至 5 号管

3   移取 x 微升 标准液(Reagent D) 到 1 号管,混匀

4  小心移取 x 微升 1 号管的 标准液(Reagent D) 到 2 号管,混匀

5  小心移取 x 微升 2 管稀释的标准液(Reagent D) 到 3 号管,混匀

6.  心移取 x 微升 3 号管稀释的 标准液(Reagent D) 到 4 号管,混匀

7   1 至 5 号管放进冰槽里备用,避免光照;标准管浓度见下表

 

 

缓冲液(Reagent A)

标准液(Reagent D)

标准 Trolox 浓度

1

微升

微升

微摩

2

微升

1 号管

微摩

3

微升

2 号管

微摩

4

微升

3 号管

微摩

5

微升

0

0

 

 样品测读

实验开始前,将-20 冰箱里的试剂置于室温下融化,避免光照。然后进行下列操作。

1.   准备 1 个 96 孔板,做好标记:空白对照孔、标准对照孔、样品孔

2.   分别移取 x 微升 缓冲液(Reagent A) 到 96 孔板里的每个孔里

3.   分别加入 x 微升 染色液(Reagent B)

4.   分别加入 x 微升 氧化液(Reagent C)

5.   加入 x 微升上述配制的 标准液(Reagent D) 到相应标准对照孔里

6   加入 x 微升体液样品到样品孔里

7   轻轻摇动 96 孔板,使其混匀

8   室温下孵育 1 分钟

9   即刻放进酶标仪里测读:730nm 波长

10.  分析结果:

1)  构建标准曲线:纵座标(Y )为吸光单位(OD730nm);横座标(X )为标准 Trolox  (微摩尔)

2)  空白对照孔为最大吸光单位(OD730nm)读数

3)  标准对照孔和样品孔为实际吸光单位(OD730nm)读

4)  计算样品实际总抗氧化能力

 

根据标准曲线计算所得样品总抗氧化能力 X 25 (体系系数) X  样品稀释倍数=  (微摩尔 TROLOX 等值)

 

5)  根据列公式计算样品总抗氧化能力(抑制百分率)

 

(空白对照孔吸光单位读数-实际吸光单位读数) ÷空白对照孔吸光单位读数】 X100X 样品稀释倍数

 

注意事

1  本产品为 50 次操作

2  操作时,须戴手套

3  体液制备的所有操作均须在 4℃状态下进行

4.  测试前,样品须处于新鲜收集


5  样品须清澈

6.  样品避免含有 Tris EDTA 和还原剂等

7  本产品可以检测纳摩尔级抗氧化剂

8  样本量不宜超过 20 微升

9  可以使用比色皿检测

10.如样品抗氧化剂浓度过高或过低,  建议稀释或增加样品浓度

11.如果测试样品很多,建议使用排枪移液

12.如果用户没有 730nm 波长滤波器,可以使用 640nm 810nm 之间的任一波长替代;或者使用 405nm 波长替代

13.人体体液的总抗氧化能力在 0.2 2 毫摩尔标准水溶性生育酚 Trolox 的浓度

14.本公司提供系列抗氧化分析试剂产品

 

质量标

1   本产品经鉴定性能稳定

2   本产品经鉴定检测敏感

 

使用承诺

上海极威生物科技有限公司秉着“信誉至上、客户满意、质量承诺”的宗旨为我们的用户提供优质产品和服务。用户收到货 后,应按照产品说明书上的规定妥善保管并在有效期内使用。我们的产品在销售前已作严格的质量鉴定, 保证说明书所的使用效果。在货到后 10 天内若发现确属本产品的质量问题, 请立即以书面形式(实验报 )与本司联系, 并将该产品退回, 经检验确系产品质量所致, 本公司负责更换产品。如系使用者错误 操作所致,本公司不承担由此造成的损失。

情提醒

IF IT DOESN’T WORK   RECHECK YOUR EXPERIMENT TO SEE WHAT YOU DID WRONG

 

订购信息

 

规格

G&VS10114.4

体液总抗氧化能力比色法定量检测试剂盒

50 

G&VS10114.4A

缓冲液(Reagent A)

100 毫升

G&VS10114.4B

染色液(Reagent B)

10 毫升

G&VS10114.4C

氧化液(Reagent C)

10 毫升

G&VS10114.4D

标准液(Reagent D)

1 毫升

 

 

品编号

名称

规格

G&VS10053. 1

细胞总抗氧化能力(TAC)化学发光法定量检测试剂

50 次

G&VS10053.2

组织抗氧化能力(TAC)化学发光法定量检测试剂盒

50 次

G&VS10053.3

食物总抗氧化能力(TAC)化学发光法定量检测试剂

50 次

G&VS10053.4

体液总抗氧化能力(TAC)化学发光法定量检测试剂

50 次

G&VS10114. 1

细胞总抗氧化能力(TAC)比色法(ABTS)定量检测试剂

50 次

 

 

G&VS10114.2

组织总抗氧化能力(TAC)比色法(ABTS)定量检测试剂

50 次

G&VS10114.3

物总抗氧化能力(TAC)比色法(ABTS)定量检测试剂盒

50 次

G&VS10114.4

体液总抗氧化能力(TAC)比色法(ABTS)定量检测试剂

50 次

G&VS10131. 1

细胞总抗氧化能力(TAC)比色法(DDPH)定量检测试剂

50 次

G&VS10131.2

组织总抗氧化能力(TAC)比色法(DDPH)定量检测试剂

50 次

G&VS10131.3

物总抗氧化能力(TAC)比色法(DDPH)定量检测试剂盒

50 次

G&VS10131.4

体液总抗氧化能力(TAC)比色法(DDPH)定量检测试剂

50 次

 

 


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