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热门关键词：白介素 gibco ELISA试剂盒胎牛血清移液器 ※本公司产品仅供科研实验研究使用，不用于临床诊断 !

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组织总抗氧化能力比色法定量检测试剂盒产品说明书

发布时间：2026/8/7 13:01:22 阅读次数：19

主要用途

组织总抗氧化能力(TAC) 比色法定量检测试剂是一种旨在通过过硫酸钾的参与，使染料 ABTS 氧化，在抗氧化剂的存在下，通过分光光度仪，观察其峰值下降的变化，来定量检测对应于标准水溶性生育酚 Trolox 的总抗氧化能力，即抑制氧化等值浓度的权威而经典的技术方法。该技术由大师级科学家精心研制、成功实验证明的。适用于各种新鲜组织(动物、人体、植物、昆虫等)的总抗氧化能力检测。产品严格无菌，即到即用，操作简易，性能稳定。

技术背景

超氧自由基阴离子(superoxide radical；O2- )、过氧化氢(hydrogen peroxide；H2O2)、羟自由基或氢氧基(hydroxyl radical；OH- )、过氧化基(peroxyl radical；ROO- )、氢过氧自由基(hydroperoxyl；HOO)、烷氧自由基(alcoxyl radical)、氮氧基(nitric Oxide；NO- )、过氧亚硝基阴离子(peroxynitrite anion；ONOO- ) 次氯酸(hypochlorous acid；HOCl)、半醌自由基(semiquinone radical)、单线态氧气(singlet oxygen)等细胞内活性氧族(Reactive Oxygen Species；ROS) 的产生和增多，将导致细胞衰老或凋亡，甚而导致诸如冠心病、风湿性关节炎、肿瘤、退行性病变等各种病理状况。在生物系统内，通过抗氧化酶例如超氧化物歧化酶、过氧化氢酶和谷胱甘肽过氧化物酶等，大分子，例如白蛋白、铜蓝蛋白(ceruloplasmin；CER)、铁蛋白(ferritin)和抗氧化因子，例如生育醇、类胡萝卜素、抗坏血酸、还原性谷胱甘肽和尿酸胆红素(bilirubin)等，产生抗氧化能力，即捕获自由基的能力，达到消除或降低ROS的损害。通过过硫酸钾(potassium persulfate)氧化2,2’-连氮-双(3- 乙基苯并噻唑-6-磺酸)(2,2'-Azino-bis(3-ethylbenzthiazoline- 6-sulfonic acid)，diammonium salt；ABTS) 产生的ABTS自由基，衡量体系中抗氧化剂捕获自由基、消耗抗氧化剂的能力，在分光光度仪(730nm波长)的帮助下，观察其峰值下降的变化，并与标准化抗氧化剂水溶性生育酚Trolox对照。

产品内容

清理液(Reagent A)

低渗液(Reagent B)

缓冲液(Reagent C)

染色液(Reagent D)

氧化液(Reagent E)

标准液(Reagent F)

产品说明书

保存方式

保存在－20℃冰箱里，染色液(Reagent D)和氧化液(Reagent E)，严格避免光照和室温空气中久置；有效保证 3 月

用户自备

15 毫升锥形离心管：用于组织样品操作的容器

2 毫升离心管：用于组织样品操作的容器

1.5 毫升离心管：用于组织裂解悬液存放和标准样品配制的容器

4℃微型台式离心机：用于样品操作

超声仪：用于破碎组织细胞

96 孔板：用于比色的容器

分光光度仪或酶标仪：用于比色分析

实验步骤

一、样品准备

1．手术取出动物组织，并秤重以确定组织重量 200 毫克

2．移入到一个液氮冻存管

3．即刻放进液氮罐过夜

4．次日从液氮罐里取出，即刻(最快速度)用研磨棒碾碎组织成粉末状(注意： 切莫使组织冻融)

5．放进一个 15 毫升锥形离心管

6．加入 2 毫升 4℃预冷的清理液(Reagent A)

7．强力涡旋震荡 30 秒，充分混匀

8．转移到 4℃预冷的 2 毫升离心管

9．放进 4℃微型台式离心机离心 10 分钟，速度为 400g(或 2000RPM，例如 eppendorf 5415)

10．小心抽去上清液

11．加入 xx 毫升 4℃预冷的清理液(Reagent A)，混匀

12．放进 4℃微型台式离心机离心 10 分钟，速度为 400g(或 2000RPM，例如 eppendorf 5415)

13．小心抽去上清液

14．重复实验步骤 11 至 13 二次

15．加入 xx 微升低渗液(Reagent B)，混匀

16．置于 200 瓦超声仪枪头下，离心管在冰槽里

17．超声功率为 100％，猝击 10 秒，2 个循环

18．放进 4℃微型台式离心机离心 10 分钟，速度为 10000g(或 10000RPM，例如 eppendorf 5415)

19．移取上清液到新的 4℃预冷的 1.5 毫升离心管

20．移取 10 微升进行蛋白定量检测(建议使用 Bradford 蛋白质浓度定量试剂盒－G&VS30030. 1)

21．使用清理液(Reagent A) 调整蛋白浓度为 100 微克/10 微升

22．置于冰槽里待测

二、标准液准备

1．准备好 5 个 1.5 毫升离心管，标记为 1 至 5 号管

2．分别加入 xx 微升缓冲液(Reagent C) 到 2 至 5 号管

3 ．移取 xx 微升标准液(Reagent F) 到 1 号管，混匀

4 ．小心移取 xx 微升 1 号管的标准液(Reagent F) 到 2 号管，混匀

5 ．小心移取 xx 微升 2 号管稀释的标准液(Reagent F) 到 3 号管，混匀

6．小心移取 20 微升 3 号管稀释的标准液(Reagent F) 到 4 号管，混匀

7．将 1 至 5 号管放进冰槽里备用，避免光照；标准管浓度见下表

管号	缓冲液(Reagent C)	标准液(Reagent F)	测定体系标准 Trolox 浓度
1	微升	微升	微摩尔/升
2	微升	微升 1 号管	微摩尔/升
3	微升	微升 2 号管	微摩尔/升
4	微升	微升 3 号管	微摩尔/升
5	微升	0	0

三、样品测读

实验开始前，将－20 冰箱里的试剂置于室温下融化，避免光照。然后进行下列操作。

1．准备 1 个 96 孔板，做好标记：空白对照孔、标准对照孔、样品孔

2．分别移取 xx 微升缓冲液(Reagent C) 到 96 孔板里的每个孔里

3．分别加入 xx 微升染色液(Reagent D)

4．分别加入 xx 微升氧化液(Reagent E)

5．加入 xx 微升缓冲液(Reagent C) 到空白对照孔

6．加入 xx 微升上述配制的标准液(Reagent F) 到相应标准对照孔里

7．加入 10 微升组织裂解样品(100 微克蛋白总量)到样品孔里

8．轻轻摇动 96 孔板，使其混匀

9．室温下孵育 1 分钟

10．即刻放进酶标仪里测读：730nm 波长

11．分析结果：

1) 构建标准曲线：纵座标(Y 轴)为吸光单位(OD730nm)；横座标(X 轴)为标准 Trolox 浓度(微摩尔/升)

2) 空白对照孔为最大吸光单位(OD730nm)读数

3) 标准对照孔和样品孔为实际吸光单位(OD730nm)读数

4) 根据标准曲线获得样品对应 Trolox 浓度(微摩尔/升)

5) 计算样品实际总抗氧化能力

【根据标准曲线获得样品对应 Trolox 浓度(微摩尔/升) X xx (体系容量；毫升) X 样品稀释倍数】 ÷xx

(样品容量；毫升)＝(微摩尔/升 TROLOX 等值)

6) 根据下列公式计算测定体系中样品量的总抗氧化能力(实际抑制百分率)

【(空白对照孔吸光单位读数－实际吸光单位读数) ÷空白对照孔吸光单位读数】 X100％

7) IC50 ：50％抑制率所需的样品单位： TROLOX 等值或样品蛋白浓度(毫克/毫升) 或样品容量(微升)

X (所需样品单位)＝(已知样品单位÷实际抑制百分率) X 50％

注意事项

1．本产品为 50 次操作

2．本产品测试范围为低浓度 0 至 25 微摩尔

3．操作时，须戴手套

4．样品制备的所有操作均须在 4℃状态下进行

5．测试前，样品须新鲜收集

6．样品须清澈

7．样品避免含有 Tris 、EDTA 和还原剂等

8．空白对照孔的吸光读数应为 0.8，如果低于 0.5，须更换染色液(Reagent D) 和氧化液(Reagent E)；如果高于 1.0，建议使用无离子水稀释到规定范围

9．本产品可以检测纳摩尔级抗氧化剂

10．样本量不宜超过 20 微升

11．可以使用比色皿检测

12．如果样品抗氧化剂浓度过高或过低，建议稀释或增加样品浓度

13．如果测试样品很多，建议使用排枪移液

14．如果用户没有 730nm 波长滤波器，可以使用 640nm 至 810nm 之间的任一波长替代；或者使用 405nm 波长替代

15．本公司提供高浓度测试试剂产品

16．本公司提供系列抗氧化分析试剂产品

质量标准

1 ．本产品经鉴定性能稳定

2 ．本产品经鉴定检测敏感

使用承诺

上海极威生物科技有限公司秉着“信誉至上、客户满意、质量承诺”的宗旨为我们的用户提供优质产品和服务。用户收到货后，应按照产品说明书上的规定妥善保管并在有效期内使用。我们的产品在销售前已作严格的质量鉴定，保证说明书所述的使用效果。在货到后 10 天内若发现确属本产品的质量问题，请立即以书面形式(实验报告)与本公司联系，并将该产品退回，经检验确系产品质量所致，本公司负责更换产品。如系使用者错误操作所致，本公司不承担由此造成的损失。

友情提醒

IF IT DOESN’T WORK ， RECHECK YOUR EXPERIMENT TO SEE WHAT YOU DID WRONG。

G&VS10114.2A	清理液(Reagent A)	500 毫升
G&VS10114.2B	低渗液(Reagent B)	100 毫升
G&VS10114.2C	缓冲液(Reagent C)	100 毫升
G&VS10114.2D	染色液(Reagent D)	10 毫升
G&VS10114.2E	氧化液(Reagent E)	10 毫升
G&VS10114.2F	标准液(Reagent F)	1 毫升

产品编号	名称	规格
G&VS10053. 1	细胞总抗氧化能力(TAC)化学发光法定量检测试剂盒	50 次
G&VS10053.2	组织总抗氧化能力(TAC)化学发光法定量检测试剂盒	50 次
G&VS10053.3	食物总抗氧化能力(TAC)化学发光法定量检测试剂盒	50 次
G&VS10053.4	体液总抗氧化能力(TAC)化学发光法定量检测试剂盒	50 次
G&VS10114. 1	细胞总抗氧化能力(TAC)比色法(ABTS)定量检测试剂盒	50 次
G&VS10114.2	组织总抗氧化能力(TAC)比色法(ABTS)定量检测试剂盒	50 次
G&VS10114.3	食物总抗氧化能力(TAC)比色法(ABTS)定量检测试剂盒	50 次
G&VS10114.4	体液总抗氧化能力(TAC)比色法(ABTS)定量检测试剂盒	50 次
G&VS10131. 1	细胞总抗氧化能力(TAC)比色法(DDPH)定量检测试剂盒	50 次
G&VS10131.2	组织总抗氧化能力(TAC)比色法(DDPH)定量检测试剂盒	50 次
G&VS10131.3	食物总抗氧化能力(TAC)比色法(DDPH)定量检测试剂盒	50 次
G&VS10131.4	体液总抗氧化能力(TAC)比色法(DDPH)定量检测试剂盒	50 次