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热门关键词：白介素 gibco ELISA试剂盒胎牛血清移液器 ※本公司产品仅供科研实验研究使用，不用于临床诊断 !

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冰冻切片氧化应激活性氧羟自由基原位荧光染色试剂盒产品说明书

发布时间：2026/8/10 14:05:47 阅读次数：18

冰冻切片氧化应激活性氧羟自由基原位荧光染色试剂盒产品说明书

主要用途

冰冻切片氧化应激活性氧羟自由基原位荧光染色试剂是一种旨在通过透膜荧光染色剂羟苯基荧光素，与组织细胞内羟自由基的反应，产生绿色荧光，来检测冰冻组织内羟自由基活性氧族的生成和增加的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。适宜于冰冻动物组织的羟自由基分析。可以被用于细胞凋亡、信号传递、衰老、代谢和营养学等的研究。产品严格无菌，即到即用，操作简易，活体检测，性能稳定。

技术背景

超氧自由基阴离子（superoxide radical；O2^-）、过氧化氢（hydrogen peroxide；H2O2）、羟自由基或氢氧基（hydroxyl radical；OH^-）、过氧化基（peroxyl radical；ROO^-）、氢过氧自由基（hydroperoxyl；HOO）、烷氧自由基（alcoxyl radical）、氮氧基（nitric Oxide；NO^-）、过氧亚硝基阴离子（peroxynitrite anion；ONOO^-）次氯酸（hypochlorous acid；HOCl）、半醌自由基（semiquinone radical）、单线态氧气（singlet oxygen）等细胞内活性氧族（Reactive Oxygen Species；ROS）的产生和增多，将导致细胞衰老或凋亡。其中羟自由基或氢氧基具有极度反应性和毒性，同时半衰期短（10^－9至10^－10秒）。其产生主要是水分子受到高能量放射后裂解、过氧化物和次氯酸反应、过氧化氢的还原、超氧化物的歧化等形成。羟苯基荧光素（Hydroxyphenyl fluorescein；2-[6-(4’-Hydroxy)phenoxy-3H-xanthen-3-on-9-yl]benzoic acid；HPF）是一种完全自由通过细胞膜的染色剂，一旦与羟自由基反应，产生脱苄基（o-dearylation）作用，生成强烈荧光的荧光素（fluorescein）。据此证明组织细胞内羟自由基活性氧族的存在。

产品内容

清理液（Reagent A）毫升

染色液（Reagent B）微升

稀释液（Reagent C）毫升

产品说明书 1份

保存方式

保存染色液（Reagent B）在－20℃冰箱里，严格避免光照；其余的保存在4℃冰箱里，有效保证6月

用户自备

1.5毫升离心管：用于工作液配制的容器

培养箱：用于反应孵育

（共聚焦）荧光显微镜：用于观察荧光组织细胞

实验步骤

实验开始前，将－20℃冰箱里的试剂盒中的染色液（Reagent B）置入冰槽里融化，稀释液（Reagent C）放进37℃恒温水槽里预热。然后移出xx微升染色液（Reagent B）到新的1.5毫升离心管，加入xx微升稀释液（Reagent C），混匀后，标记为染色工作液，置入暗室里。然后进行下列操作。

1．准备5片待测的厚为10微米的未经固着处理的冰冻切片

2．置于室温下，小心加上xx微升预冷的清理液（Reagent A），铺满整个切片表面

3．小心移去切片上的清理液（Reagent A）

4．小心加上xx微升含有染色液（Reagent B）和稀释液（Reagent C）的染色工作液，覆盖样品表面

5．放进37℃细胞培养箱里孵育30分钟

6．小心移去切片上的染色工作液

7．小心加上xx微升清理液（Reagent A），铺满整个切片表面

8．小心移去切片上的清理液（Reagent A）

9．放上盖玻片或封片

10．即刻在（共聚焦）荧光显微镜下观察（定性检测）：激发波长499nm，散发波长515nm――绿色荧光增强，表明羟自由基含量高

注意事项

1．本产品为20次操作

2．操作时，须戴手套

3．孵育时，避免光照

4．根据组织类型，可以调整染色工作液使用剂量（1：200至1：1000容量比），避免过度染色

5．如果羟自由基浓度过低，可以延长孵育时间至60分钟

6．建议组织细胞染色完成后，即刻进行荧光分析

7．激发波长可以选择在485至500nm，散发波长505至550nm之间的任一波长

8．本公司同时提供系列羟自由基活性氧检测试剂产品

质量标准

1．本产品经鉴定性能稳定

2．本产品经鉴定荧光清晰

使用承诺

上海极威生物科技有限公司秉着“信誉至上、客户满意、质量承诺”的宗旨为我们的用户提供优质产品和服务。用户收到货后，应按照产品说明书上的规定妥善保管并在有效期内使用。我们的产品在销售前已作严格的质量鉴定，保证说明书所述的使用效果。在货到后10天内若发现确属本产品的质量问题，请立即以书面形式（实验报告）与本公司联系，并将该产品退回，经检验确系产品质量所致，本公司负责更换产品。如系使用者错误操作所致，本公司不承担由此造成的损失。

友情提醒

IF IT DOESN’T WORK， RECHECK YOUR EXPERIMENT TO SEE WHAT YOU DID WRONG。

订购信息

单组分订购信息

编号名称规格

G&VS10124.2 冰冻切片氧化应激活性氧羟自由基原位荧光染色试剂盒 20次

G&VS10124.2A 清理液（Reagent A）毫升

G&VS10124.2B 染色液（Reagent B）毫升

G&VS10124.2C 稀释液（Reagent C）毫升

试剂盒订购信息

产品编号	名称	规格
G&VS10124.1	活体细胞氧化应激活性氧羟自由基原位荧光染色试剂盒	20次
G&VS10124.2	冰冻切片氧化应激活性氧羟自由基原位荧光染色试剂盒	20次
G&VS10124.3	细胞氧化应激活性氧羟自由基比色法定量检测试剂盒	20次
G&VS10124.4	组织氧化应激活性氧羟自由基比色法定量检测试剂盒	20次
G&VS10124.5	体液氧化应激活性氧羟自由基比色法定量检测试剂盒	20次
G&VS10124.6	酵母氧化应激活性氧羟自由基比色法定量检测试剂盒	20次
G&VS10124.7	植物氧化应激活性氧羟自由基比色法定量检测试剂盒	20次