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CCK-8比色法细胞繁殖定量检测试剂盒产品说明书

发布时间:2026/8/10 14:08:21      阅读次数:16

 

 CCK-8比色法细胞繁殖定量检测试剂盒产品说明书

 

主要用途

 CCK-8比色法细胞繁殖定量检测试剂是一种旨在通过唑盐WST-8和电子偶联化合物在代谢旺盛细胞中的脱氢酶的作用下,产生水溶性黄色甲簪产物,作为检测信号来比色定量测定活体细胞繁殖的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。替代传统的操作繁琐和有害物质同位素[3H]-thymidine[51Cr]释放检测的最佳选择。适用于各种生长中的动物、人体、酵母等细胞。产品严格无菌,即到即用,性能稳定,着色清晰,具有高通量功能。

 

技术背景

在细胞生物学中,细胞繁殖检测常常用于研究生长因子、细胞因子、营养因子、化学物、以及淋巴细胞的激活和毒力作用。作为细胞染色剂之一的四唑盐WST-8和电子偶联化合物染料PMS1-methoxy-5-methylphenazium methosulfate1-methoxy-PMS)可以自由地进入活细胞中。细胞繁殖快,其代谢旺盛,脱氢酶的活性增强,从而还原细胞浆中的染料为无毒性、水溶性、黄色产物而留存在细胞内,在450nm波长下产生吸收峰:吸收值与细胞量成线性正相关。细胞可以继续进行培养。其敏感度高于常用的MTTXTTXTSWST-1WST-8[(2-(2-methoxy)-4-(4-nitrophenyl)-3-(4-nitrophenyl) -5-(2,4-disulfo phenyl)-2H-tetrazoliummonosodium salt)2-(2–甲氧基)-4-(4–硝基苯基)- 3-(4–硝基苯基)-5-(2,4-苯二磺酸)-2H-四唑单钠盐]为高度水溶性。 

 

产品内容

清理液(Reagent A)   毫升

染色液Reagent B      毫升

结合液Reagent C     微升

稀释液(Reagent D      毫升

产品说明书                1

 

保存方式

保存染色液Reagent B)和结合液Reagent C)在-20℃冰箱里,避免光照和反复冻融;其余的保存在4冰箱里有效保证6

 

用户自备

1.5毫升离心管:用于直接法染色工作液配制的容器

15毫升锥形离心管:用于间接法染色工作液配制的容器

培养箱:用于反应孵育

酶标仪:用于比色分析

完全细胞培养基(G&VS12052):用于细胞的继续培养

 

实验步骤

一、 间接法

实验开始前,将-20℃冰箱里的试剂盒中的染色液(Reagent B结合液Reagent C在室温下融化,稀释液(Reagent D放进37℃恒温水槽里预热。然后移出xx毫升稀释液(Reagent D到新的15毫升锥形离心管,加入xx微升染色液(Reagent Bxx微升结合液(Reagent C,混匀后,在室温下静置,并标记为染色工作液,放在暗室里。然后进行下列操作。

 

1. 从细胞培养箱里取出待测的96孔细胞培养板

2. 小心抽去每孔中的培养液

3. 小心加入xx微升清理液(Reagent A96孔板中每一个孔里

4. 小心抽去每孔中的清理液(Reagent A(注意:确保培养孔中无任何液体残留

5. 小心加入xx微升染色工作液96孔板中每一个孔里(注意:避免气泡)

6. 放进37℃培养箱里,孵育30分钟,或直至呈现黄色注意:孵育后,可见溶液的颜色变成黄色

7. 即刻放进酶标仪测读:波长450nm

8. 加入150微升用户自备的完全细胞培养液到96孔板中每一个孔里

9. 放回37℃5%CO2细胞培养箱里继续培养

 

二、 直接法

实验开始前,将-20℃冰箱里的试剂盒中的染色液(Reagent B结合液Reagent C在室温下融化。然后移出xx毫升染色液(Reagent Bxx微升结合液(Reagent C到新的1.5毫升离心管,混匀后,在室温下静置,并标记为染色工作液,放在暗室里。然后进行下列操作。

1. 从细胞培养箱里取出待测的96孔细胞培养板

2. 确保96孔板中每一个孔含有100微升细胞培养液

3. 小心加入xx微升染色工作液96孔板中每一个孔里(注意:避免气泡)

4. 放进37℃培养箱里,孵育1小时(注意:对于不敏感细胞或生长缓慢细胞,可以延长孵育时间至4小时

5. 即刻放进酶标仪测读:波长450nm

6. 放回37℃5%CO2细胞培养箱里继续培养

 

注意事项

1. 本产品为500次(直接法)和1000次(间接法)操作

2. 操作时须戴手套

3. 使用新鲜配制的染色工作液,务必不要超过2小时,且注意避光

4. 整个操作须无菌操作

5. 建议96孔板里的细胞量在100025000范围为理想状态

6. 孵育时,须避光

7. 试剂使用后,即刻放回冰箱保存

8. 不同细胞对于染料的敏感性不同,因此必要时,可以延长孵育时间

9. 对于敏感细胞,不要过度孵育,否则降低检测的敏感性

10. 背景吸收值为0.10.2为理想状态

11. 如果用户没有450nm波长的滤波器,则可以使用450490nm波长之间的任一波长替代

12. 悬浮细胞(例如血白细胞等)可采用直接法

13. 本公司提供系列细胞繁殖和毒性检测试剂盒

 

质量标准

1. 本产品经鉴定性能稳定

2. 本产品经鉴定检测敏感

 

使用承诺

上海极威生物科技有限公司秉着信誉至上、客户满意、质量承诺的宗旨为我们的用户提供优质产品和服务。用户收到货后,应按照产品说明书上的规定妥善保管并在有效期内使用。我们的产品在销售前已作严格的质量鉴定,保证说明书所述的使用效果。在货到后10天内若发现确属本产品的质量问题,请立即以书面形式(实验报告)与本公司联系,并将该产品退回,经检验确系产品质量所致,本公司负责更换产品。如系使用者错误操作所致,本公司不承担由此造成的损失。

 

友情提醒

IF IT DOESN’T WORKRECHECK YOUR EXPERIMENT TO SEE WHAT YOU DID WRONG

 

订购信息

单组分订购信息

编号 名称 规格

G&VS10123 CCK-8比色法细胞繁殖定量检测试剂盒 500

G&VS10123A 清理液(Reagent A)   毫升

G&VS10123B  染色液Reagent B 毫升

G&VS10123C  结合液Reagent C 毫升

G&VS10123D  稀释液Reagent D 毫升

 

试剂盒订购信息

产品编号

产品名称

规格

G&VS10007

结晶紫细胞群落染色试剂盒

250

G&VS10008

细胞活力蓝色荧光检测试剂盒

50

G&VS10009

细胞活力台盼蓝染色试剂盒

100

G&VS10029

中性红细胞繁殖比色法定量检测试剂盒

500

G&VS10039

MTT比色法细胞繁殖测定试剂盒

500

G&VS10043

MTS比色法细胞繁殖定量检测试剂盒

500

G&VS10044

绿色荧光细胞繁殖定量检测试剂盒

500

G&VS10045

PICOGREEN细胞繁殖定量检测试剂盒

50

G&VS10046

G-B细胞活力和凋亡检测试剂盒

50

G&VS10051

ATP生物发光法细胞繁殖与毒性定量检测试剂盒

50

G&VS10052

R-G细胞活力和凋亡检测试剂盒

100

G&VS10033

BrdU标记法细胞繁殖流式细胞仪检测试剂盒

10/20

G&VS10034

BrdU标记法细胞繁殖显微镜检测试剂盒

10/20

G&VS10073

乳酸脱氢酶(LDH)释放法细胞繁殖与毒性定量检测试剂盒

100

G&VS10083

酸性磷酸酶(AP)活力法细胞繁殖与毒性定量检测试剂盒

100

G&VS10084

葡萄糖耗损法细胞繁殖与毒性定量检测试剂盒

500

G&VS10085

红色荧光细胞繁殖与毒性定量检测试剂盒

500

G&VS10086

磺酰罗丹明BSulforhodamine B细胞繁殖与毒性定量检测试剂盒

100

G&VS10087

考马斯亮蓝细胞繁殖与毒性定量检测试剂盒

500

G&VS10036

XTT比色法细胞繁殖测定试剂盒

500

G&VS10122

CCK-1比色法细胞繁殖测定试剂盒

500

G&VS10123

CCK-8比色法细胞繁殖测定试剂盒

500

G&VS10133

酚藏花红PHENOSAFRANINE)植物细胞繁殖测定试剂盒

100

 

 


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