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热门关键词：白介素 gibco ELISA试剂盒胎牛血清移液器 ※本公司产品仅供科研实验研究使用，不用于临床诊断 !

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冰冻切片氧化应激活性氧次氯酸离子荧光测定试剂盒产品说明书

发布时间：2026/8/11 9:11:20 阅读次数：19

主要用途

冰冻切片氧化应激活性氧次氯酸离子荧光测定试剂盒是一种旨在通过透膜荧光染色剂氨苯基荧光素，与细胞内次氯酸阴离子的反应，产生绿色荧光，来测定细胞内次氯酸活性氧族的生成和增加的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。适宜于冰冻动物组织的次氯酸阴离子分析。可以被用于细胞凋亡、信号传递、衰老、代谢和营养学等的研究。产品严格无菌，即到即用，操作简易，活体检测，性能稳定。

技术背景

超氧自由基阴离子(superoxide radical；O2- )、过氧化氢(hydrogen peroxide；H2O2)、羟自由基或氢氧基(hydroxyl radical；OH- )、过氧化基(peroxyl radical；ROO- )、氢过氧自由基(hydroperoxyl；HOO)、烷氧自由基(alcoxyl radical)、氮氧基(nitric Oxide；NO- )、过氧亚硝基阴离子(peroxynitrite anion；ONOO- )次氯酸(hypochlorous acid；HOCl)、半醌自由基(semiquinone radical)、单线态氧气(singlet oxygen)等细胞内活性氧族(Reactive Oxygen Species；ROS) 的产生和增多，将导致细胞衰老或凋亡。次氯酸阴离子与细胞膜成分反应，氧化质膜上氢硫基团，通过胺和不饱和脂肪酸的氯离子化和破坏铁硫中心，达到干扰细胞功能，包括葡萄糖和氨基酸转运和钾泵能力。氨苯基荧光素(Aminophenyl fluorescein；2-[6-(4’-Amino) phenoxy-3H-xanthen-3-on-9-yl]benzoic acid；APF)是一种完全自由通过细胞膜的荧光染色剂，选择性与次氯酸阴离子反应，生成强烈荧光的荧光素(fluorescein)，同时在羟苯基荧光素(Hydroxyphenyl fluorescein；2-[6-(4’-Hydroxy) phenoxy-3H-xanthen-3-on-9-yl]benzoic acid；HPF) 的对比存在下，排除其它活性氧族的干扰。据此证明组织细胞内次氯酸活性氧族的存在。

产品内容

清理液(Reagent A)

染色液(Reagent B)

本底液(Reagent C)

稀释液(Reagent D)

产品说明书

保存方式

保存染色液(Reagent B)和本底液(Reagent C)在－20℃冰箱里，严格避免光照；其余的保存在 4℃冰箱里，有效保证 6 月

用户自备

1.5 毫升离心管：用于细胞染色的容器

培养箱：用于反应孵育

(共聚焦)荧光显微镜：用于观察荧光细胞

实验步骤

实验开始前，将－20℃冰箱里的试剂盒中的染色液(Reagent B) 和本底液(Reagent C)置入冰槽里融化，稀释液(Reagent D)放进 37℃恒温水槽里预热。然后移出微升染色液(Reagent B) 到新的 1.5 毫升离心管，加入微升稀释液(Reagent D)，混匀后，标记为染色工作液，置入暗室里；同时移出微升本底液(Reagent C) 到新的 1.5 毫升离心管，加入微升稀释液(Reagent D)，混匀后，标记为本底工作液，置入暗室里。然后进行下列操作。

1 ．准备 2 片同一切面厚为 10 微米的未经固着处理的待测冰冻切片：标记为样本和本底

2 ．置于室温下，分别小心加上微升预冷的清理液(Reagent A)，铺满整个切片表面

3 ．分别小心移去切片上的清理液(Reagent A)

4 ．小心加上微升室温预热的染色工作液到样本切片上，铺满整个切片表面

5 ．小心加上微升室温预热的本底工作液到本底切片上，铺满整个切片表面

6 ．在 37℃湿润培养箱里，孵育 30 分钟，避免光照(注意： 避免液体蒸发)

7 ．分别小心移去切片上的染色工作液和本底工作液

8 ．分别小心加上微升清理液(Reagent A)，铺满整个切片表面

9 ．分别小心移去切片上的清理液(Reagent A)

10．放上盖玻片或封片

11．即刻在(共聚焦)荧光显微镜下观察：激发波长 499nm，散发波长 515nm―― (样本绿色荧光—本底绿色荧光)增强，表明次氯酸阴离子含量高

注意事项

1．本产品为 20 次操作

2．建议使用新鲜组织(手术切除后 1 小时内)制成的冰冻切片

3．操作时，须戴手套

4 ．染色工作液和本底工作液，避免光照

5．孵育时，须避免光照

6 ．建议组织染色完成后，即刻进行荧光定性分析

7 ．根据细胞类型，同步调整染色工作液和本底工作液使用剂量(1：200 至 1：1000 容量比)，避免过度染色

8 ．如果次氯酸阴离子浓度过低，可以延长孵育时间至 60 分钟

9 ．激发波长可以选择在 485 至 500nm，散发波长 505 至 550nm 之间的任一波长

10．本公司同时提供系列次氯酸活性氧检测试剂产品

质量标准

1 ．本产品经鉴定性能稳定

2 ．本产品经鉴定荧光清晰

使用承诺

上海极威生物科技有限公司秉着“信誉至上、客户满意、质量承诺”的宗旨为我们的用户提供优质产品和服务。用户收到货后，应按照产品说明书上的规定妥善保管并在有效期内使用。我们的产品在销售前已作严格的质量鉴定，保证说明书所述的使用效果。在货到后 10 天内若发现确属本产品的质量问题，请立即以书面形式(实验报告) 与本公司联系，并将该产品退回，经检验确系产品质量所致，本公司负责更换产品。如系使用者错误操作所致，本公司不承担由此造成的损失。

友情提醒

IF IT DOESN’T WORK ， RECHECK YOUR EXPERIMENT TO SEE WHAT YOU DID WRONG。

订购信息

编号	名称	规格
G&VS10135.2	冰冻切片氧化应激活性氧次氯酸离子荧光测定试剂盒	20 次
G&VS10135.2A	清理液(Reagent A)	100 毫升
G&VS10135.2B	染色液(Reagent B)	1 毫升
G&VS10135.2C	本底液(Reagent C)	1 毫升
G&VS10135.2D	稀释液(Reagent D)	100 毫升

产品编号	名称	规格
G&VS10135. 1	细胞内氧化应激活性氧次氯酸离子荧光测定试剂盒	20 次
G&VS10135.2	冰冻切片氧化应激活性氧次氯酸离子荧光测定试剂盒	20 次
G&VS10135.3	真菌/酵母氧化应激活性氧次氯酸离子荧光测定试剂盒	20 次
G&VS10135.4	植物氧化应激活性氧次氯酸离子荧光测定试剂盒	20 次