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热门关键词：白介素 gibco ELISA试剂盒胎牛血清移液器 ※本公司产品仅供科研实验研究使用，不用于临床诊断 !

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动物细胞β-半乳糖苷酶（β-galactosidase）活性超敏荧光定量检测试剂盒产品说明书

发布时间：2026/8/11 9:19:14 阅读次数：24

动物细胞β-半乳糖苷酶（β-galactosidase）活性超敏荧光定量检测试剂盒产品说明书

主要用途

动物细胞β-半乳糖苷酶（β-galactosidase）活性超敏荧光定量检测试剂是一种旨在快速有效地裂解动物细胞，获得澄清细胞裂解悬液，在β-半乳糖苷酶反应体系里，以人工合成的4-甲基伞形酮酰-β-D-吡喃半乳糖苷作为荧光底物，水解所产生的荧光产物，通过荧光分光光度仪测定其相对荧光单位（RFU）的变化，以此进行测算酶活性的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。广泛应用于基因组学、蛋白质组学和其它分子生物学研究。其适用于转基因后的活体细胞外源性以及衰老细胞内源性半乳糖苷酶活性分析。产品即到即用，性能稳定，参数优化，操作简便、高度敏感。

技术背景

大肠杆菌的标志基因Lac Z编码β-半乳糖苷酶（β-galactosidase ； β-gal），在其催化作用下，半乳糖可从乳糖的水解作用中得到。β-半乳糖苷酶非常稳定，对蛋白水解降解作用抗性强，且容易测试。因此β-半乳糖苷酶成为目前最常用的报告基因，以评价载体转染的效果。在衰老细胞内，显示β-半乳糖苷酶活性。4-甲基伞形酮酰-β-D-吡喃半乳糖苷（4-methylumbelliferyl-β-D-galactoside），是一种糖基化荧光底物，在β-半乳糖苷酶的催化下，去糖基化后，产生强力荧光的4-甲基伞形酮（4-methylumbelliferone；4MU）或羟甲基香豆素（7-hydroxy-4-methylcoumarin），在pH大于8的条件下，发出荧光信号，在荧光分光光度仪（激发波长365nm，散发波长460nm波长）下，来测定β-半乳糖苷酶的活性。其检测敏感度可达500飞克（fg）。其反应体系如下：

产品内容

清理液（Reagent A）毫升

裂解液（Reagent B）毫升

缓冲液（Reagent C）毫升

底物液（Reagent D）微升

终止液（Reagent E）毫升

显色液（Reagent F）毫升

标准液（Reagent G）微升

产品说明书 1份

保存方式

保存裂解液（Reagent B）、底物液（Reagent D）和标准液（Reagent G）在－20℃冰箱里，避免反复冻融；其余的保存在4℃冰箱里；底物液（Reagent D）和标准液（Reagent G）避免光照；终止液（Reagent E）具有腐蚀性，注意操作安全；有效保证6月

用户自备

15毫升锥形离心管：用于样品操作的容器

1.5毫升离心管：用于样品操作的容器

细胞刮脱棒：用于贴壁细胞脱离

（微型）台式离心机：用于样品操作

恒温水槽或培养箱：用于反应物孵育

比色皿：用于荧光分析的容器

荧光分光光度仪：用于荧光分析

实验步骤

一、 样品准备

1．准备好75cm²细胞培养瓶或100mm细胞培养皿的待测培养细胞（1至5 X 10⁷细胞）

2．小心加入xx毫升清理液（Reagent A），覆盖生长表面

3．小心抽去清理液

4．使用细胞刮脱棒轻柔刮脱细胞（注意：可以使用胰酶消化）

5．加入xx毫升清理液（Reagent A），混匀细胞

6．移入到预冷的15毫升锥形离心管（注意：悬浮细胞从这一步骤开始）

7．放进4℃台式离心机离心5分钟，速度为300g

8．小心抽去上清液

9．加入xx微升裂解液（Reagent B），充分混匀

10．转移到预冷的1.5毫升离心管

11．强力涡旋震荡15秒

12．置于冰槽里孵育30分钟

13．放进4℃微型台式离心机离心5分钟，速度为16000g（或13000RPM，例如eppendorf 5415）

14．小心移取500微升上清液到新的预冷的1.5毫升离心管

15．移取10微升进行蛋白定量检测（注意：建议使用 Bradford蛋白质浓度定量试剂盒－G&VS30030.1）

16．即刻放进－70℃保存或置于冰槽里继续后续操作

二、 测定准备

1．准备好待测样品（例如细胞裂解萃取样品等），置于冰槽里

2．设定好荧光分光光度仪（温度为37℃）：激发波长365nm，散发波长460nm，并置零

3．准备好5个1.5毫升离心管，标记为1至5号管

4．分别加入xx微升显色液（Reagent F）到每个离心管

5．移取xx微升标准液（Reagent G）到1号管，混匀

6．小心移取xx微升1号管稀释的标准液（Reagent G）到2号管，混匀

7．小心移取xx微升2号管稀释的标准液（Reagent G）到3号管，混匀

8．小心移取xx微升3号管稀释的标准液（Reagent G）到4号管，混匀

9．将1至5号管放进冰槽里备用，避免光照；标准管浓度见下表

管号	显色液（Reagent F）	标准液（Reagent G）	标准羟甲基香豆素浓度
1	xx微升	xx微升	xx纳摩尔/升
2	xx微升	xx微升1号管	xx纳摩尔/升
3	xx微升	xx微升2号管	xx纳摩尔/升
4	xx微升	xx微升3号管	xx纳摩尔/升
5	xx微升	空对照	0

三、 标准曲线测定

1．移取40微升上述配制的标准样品到1.5毫升离心管

2．加入xx微升缓冲液（Reagent C）

3．加入xx微升底物液（Reagent D）

4．枪头抽吸数次，混匀

5．在37℃温度下孵育30分钟，避免光照

6．加入xx微升终止液（Reagent E），混匀

7．置于冰槽里孵育1分钟

8．放进台式离心机离心2分钟，速度为3000g

9．移取100微升上清液到2毫升比色皿

10．加入xx毫升显色液（Reagent F），混匀

11．即刻放进荧光分光光度仪检测，获得相对荧光单位（Relative Fluorescence Unit；RFU）

12．实际荧光单位：标准样相对荧光读数－5号管标准样相对荧光读数（作为空对照）

13．构建标准曲线：纵座标（Y轴）为实际相对荧光单位（RFU）；横座标（X轴）为标准羟甲基香豆素浓度（纳摩尔/升）

四、 样品测定

1．移取40微升待测样品50微克细胞裂解萃取液蛋白）到1.5毫升离心管（注意：样品须清澈）

2．加入xx微升缓冲液（Reagent C）

3．加入xx微升底物液（Reagent D）

4．枪头抽吸数次，混匀

5．在37℃温度下孵育30分钟，避免光照

6．加入xx微升终止液（Reagent E），混匀

7．置于冰槽里孵育1分钟

8．放进台式离心机离心2分钟，速度为3000g

9．移取100微升上清液到2毫升比色皿

10．加入xx毫升显色液（Reagent F），混匀

11．即刻放进荧光分光光度仪检测，获得相对荧光单位（Relative Fluorescence Unit；RFU）

12．实际荧光单位：样品相对荧光读数－5号管标准样相对荧光读数（作为空对照）

13．根据标准曲线获得样品对应羟基香豆素浓度（纳摩尔/升）

五、 计算样品实际活性

注意事项

1．本产品为20次操作

2．建议使用核内表达的载体代替胞内表达的载体转染或感染细胞或组织

3．本产品的各项参数达到最优化

4．操作时，须戴手套

5．终止液（Reagent E）具有腐蚀性，注意操作安全

6．用户可以测定细胞裂解悬液的蛋白浓度，便于计算活性单位之需；建议使用 Bradford蛋白质浓度定量检测试剂盒（G&VS30030.1）

7．相对荧光读数RFU（Relative Fluorescence Unit）越高，表明酶活性越高

8．测定后，比色皿须清洗彻底

9．建议待测样本蛋白浓度为50微克/40微升；如果样本酶活性过低，则可以增加样本量

10． β-半乳糖苷酶单位活性定义为：在37℃，pH 7.5条件下，每分钟内能够水解1纳摩尔4-甲基伞形酮酰-β-D-吡喃半乳糖苷至羟甲基香豆素所需的酶量作为一个活性单位

11．本公司提供系列β-半乳糖苷酶检测试剂产品

质量标准

1．本产品经鉴定性能稳定

2．本产品经鉴定检测敏感

使用承诺

上海极威生物科技有限公司秉着“信誉至上、客户满意、质量承诺”的宗旨为我们的用户提供优质产品和服务。用户收到货后，应按照产品说明书上的规定妥善保管并在有效期内使用。我们的产品在销售前已作严格的质量鉴定，保证说明书所述的使用效果。在货到后10天内若发现确属本产品的质量问题，请立即以书面形式（实验报告）与本公司联系，并将该产品退回，经检验确系产品质量所致，本公司负责更换产品。如系使用者错误操作所致，本公司不承担由此造成的损失。

友情提醒

IF IT DOESN’T WORK， RECHECK YOUR EXPERIMENT TO SEE WHAT YOU DID WRONG。

订购信息

单组份订购信息

编号名称规格

G&VS10134.1 动物细胞β-半乳糖苷酶活性超敏荧光定量检测试剂盒 20次

G&VS10134.1A 清理液（Reagent A）毫升

G&VS10134.1B 裂解液（Reagent B）毫升

G&VS10134.1C 缓冲液（Reagent C）毫升

G&VS10134.1D 底物液（Reagent D）毫升

G&VS10134.1E 终止液（Reagent E）毫升

G&VS10134.1F 显色液（Reagent F）毫升

G&VS10134.1G 标准液（Reagent G）微升

试剂盒订购信息

产品编号	名称	规格
G&VS10010.1	细胞β-半乳糖苷酶原位染色试剂盒	100/250次
G&VS10010.2	全组织β-半乳糖苷酶原位染色试剂盒	10次
G&VS10010.3	冰冻切片β-半乳糖苷酶原位染色试剂盒	50次
G&VS10010.4	通用型组织/细胞β-半乳糖苷酶原位染色试剂盒	10/100次
G&VS10012.1	细胞衰老特异性β-半乳糖苷酶原位染色试剂盒	100/250次
G&VS10012.2	全组织衰老特异性β-半乳糖苷酶原位染色试剂盒	10次
G&VS10012.3	冰冻切片衰老特异性β-半乳糖苷酶原位染色试剂盒	50次
G&VS10012.4	通用型组织/细胞衰老特异性β-半乳糖苷酶原位染色试剂盒	10/100次
G&VS60003.1	细菌β-半乳糖苷酶活性原位染色试剂盒	40次
G&VS60003.2.1	细菌β-半乳糖苷酶活性化学发光法定量检测试剂盒	20次
G&VS60003.2.2	β-半乳糖苷酶标准曲线化学发光法测定试剂盒	5次
G&VS60003.3	细菌β-半乳糖苷酶活性比色法定量检测试剂盒	20次
G&VS60003.4	细菌β-半乳糖苷酶活性高质敏感比色法定量检测试剂盒	20次
G&VS10037.1.1	动物细胞β-半乳糖苷酶活性化学发光法定量检测试剂盒	20次
G&VS10037.1.2	β-半乳糖苷酶标准曲线化学发光法测定试剂盒	20次
G&VS10037.2	动物细胞β-半乳糖苷酶活性比色法定量检测试剂盒	20次
G&VS10037.3	动物组织β-半乳糖苷酶活性比色法定量检测试剂盒	20次
G&VS60013.1	真菌/酵母细胞β-半乳糖苷酶活性化学发光法定量检测试剂盒	20次
G&VS60013.2	真菌/酵母细胞β-半乳糖苷酶活性比色法定量检测试剂盒	20次
G&VS60013.3	真菌/酵母细胞β-半乳糖苷酶活性滤膜染色试剂盒	20次
G&VS60013.4	真菌/酵母细胞β-半乳糖苷酶活性高质敏感比色法定量检测试剂盒	20次
G&VS10060.1	动物细胞β-半乳糖苷酶活性高质敏感比色法定量检测试剂盒	20次
G&VS10060.2	动物组织β-半乳糖苷酶活性高质敏感比色法定量检测试剂盒	20次
G&VS10134.1	动物细胞β-半乳糖苷酶（β-galactosidase）活性超敏荧光定量检测试剂盒	20次
G&VS10134.2	动物组织β-半乳糖苷酶（β-galactosidase）活性超敏荧光定量检测试剂盒	20次
G&VS60080	细菌β-半乳糖苷酶（β-galactosidase）活性超敏荧光定量检测试剂盒	20次
G&VS60081	真菌/酵母细胞β-半乳糖苷酶（β-galactosidase）活性超敏荧光定量检测试剂盒	20次