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发布时间:2026/8/12 15:40:39 阅读次数:25
HOECHST33258 简易细胞核形态染色试剂盒产品说明书
主要用途
HOECHST33258 简易细胞核形态染色试剂是一种旨在通过荧光染料 Hoechst 33258 与DNA 特异性结合,呈现蓝色,用于分析和观察细胞核形态或 DNA 含量的权威而经典的技术方法。该技术由大师级科学家精心研制、成功实验证明的。其适用于各种细胞核(动物、人体、植物、昆虫等) 的观察。可以被用于细胞周期、细胞凋亡、细胞流式仪分析等研究。产品严格无菌,即到即用,荧光清晰,操作简捷,性能稳定。
技术背景
赫斯特染料(Hoechst 33258)为特异性DNA 活性染料,与A-T键结合,这种染料对死细胞或固着细胞可立即染色。而活细胞的着色是渐进性的,在10 分钟内可达饱和。在荧光显微镜下,活细胞核呈弥散均匀荧光,出现细胞凋亡时,细胞核或细胞质内可见浓染致密的颗粒块状荧光。在紫外光激发下,呈现明亮的蓝色荧光。
产品内容
染色液(Reagent A)
产品说明书
保存方式
保存在-20℃冰箱里,避免光照;有效保证 6 月
用户自备
磷酸缓冲液(G&VS12033. 1):用于清洗样品
微型台式离心机:用于悬浮细胞的操作
盖玻片:用于染色后封片
荧光显微镜:用于观察细胞核 DNA 染色
实验步骤
一、 贴壁细胞染色
1. 准备 1 个细胞培养 48 孔板的待测细胞,每孔铺满率达70%
(注意: 可以使用载玻片,载玻片培养皿, 35mm 培养皿,和其它培养孔板,见注意事项5)
2. 小心抽去细胞培养液
3. 轻轻沿着孔壁加入 500 微升用户自备的磷酸缓冲盐溶液(PBS)到细胞培养孔,覆盖培养孔表面
4. 小心抽去 1 毫升磷酸缓冲盐溶液(PBS)
5. 小心加入 100 微升用户自备的磷酸缓冲盐溶液(PBS),覆盖培养孔表面
6. 小心加入 1 微升 染色液(Reagent A)
7. 轻轻摇动培养板,使其混匀
8. 室温下孵育 5 分钟,避免光照
9. 小心抽掉染色液
10.小心加入 200 微升用户自备的磷酸缓冲盐溶液(PBS),覆盖培养孔表面
11.即刻在倒置荧光显微镜下进行观察:激发波长 350nm (细胞核呈现蓝色)
二、 悬浮细胞染色
1. 将悬浮细胞(1 X 106细胞)移入到 1.5 毫升离心管
2. 放进微型台式离心机离心 10 分钟,速度为 300g (或 2000RPM,例如 eppendorf 5415)
3. 小心抽掉上清液
4. 加入 xx 微升用户自备的磷酸缓冲盐溶液(PBS),混匀细胞颗粒群
5. 放进微型台式离心机离心 10 分钟,速度为 300g (或 2000RPM,例如 eppendorf 5415)
6. 小心抽掉上清液
7. 加入 xx 微升用户自备的磷酸缓冲盐溶液(PBS),混匀细胞颗粒群
8. 加入 xx 微升 染色液(Reagent A),混匀
9. 室温下孵育 5 分钟,避免光照
10.放进微型台式离心机离心 10 分钟,速度为 300g (或 2000RPM,例如 eppendorf 5415)
11.小心抽掉上清液
12.加入 xx 微升用户自备的磷酸缓冲盐溶液(PBS),混匀细胞颗粒群
13.移出 xx 微升到载玻片上,放上盖玻片
14.即刻在荧光显微镜下进行观察:激发波长 350nm (细胞核呈现蓝色)
15.或即刻进行细胞流式仪分析:紫外波长 350nm,观察 50000 个细胞以上
注意事项
1 . 本产品为 100 次操作
2 . 本产品友好使用于双重染色或重叠染色
3 . 操作时须戴手套
4 . 操作时,避免污染母液
5 . 本产品适合各种规格的培养细胞:载玻片,载玻片培养皿, 35mm 培养皿,和各种培养孔板,须相应 调整试剂溶液:
| 操作容器 | 试剂溶液规格 |
| 载玻片 | 微升 |
| 载玻片培养皿 | 微升 |
| 35mm 培养皿 | 微升 |
| 96 孔培养板 | 微升 |
| 48 孔培养板 | 微升 |
| 24 孔培养板 | 微升 |
| 12 孔培养板 | 微升 |
| 6 孔培养板 | 微升 |
| 25cm2细胞培养瓶 | 毫升 |
6 . 本产品可用于细胞脱离处理后染色
7 . 孵育时,须避免光照
8 . 建议细胞染色完成后,即刻进行分析;若暂不观察,可保存在 4℃冰箱里,但不宜超过 1 周
9 . 细胞流式仪分析前,须混匀内容物
10.细胞流式仪分析,细胞检测量不得少于 10000 个
11.本公司提供系列简易细胞核染色分析试剂产品
质量标准
1 . 本产品经鉴定性能稳定
2 . 本产品经鉴定荧光清晰
使用承诺
上海极威生物科技有限公司秉着“信誉至上、客户满意、质量承诺”的宗旨为我们的用户提供优质产品和服务。用户收到货后,应按照产品说明书上的规定妥善保管并在有效期内使用。我们的产品在销售前已作严格的质量鉴定,保证说明书所述的使用效果。在货到后 10 天内若发现确属本产品的质量问题,请立即以书面形式(实验报告) 与本公司联系,并将该产品退回,经检验确系产品质量所致, 本公司负责更换产品。如系使用者错误操作所致,本公司不承担由此造成的损失。
友情提醒
IF IT DOESN’T WORK , RECHECK YOUR EXPERIMENT TO SEE WHAT YOU DID WRONG。
| 产品编号 | 名称 |
|
| G&VS10139. 1 | HOECHST33342 简易细胞核形态染色试剂盒 | 100 次 |
| G&VS10139.2 | HOECHST33342/PI简易细胞核形态染色试剂盒 | 100 次 |
| G&VS10139.3 | 吖啶橙简易细胞核形态染色试剂盒 | 100 次 |
| G&VS10139.4 | PROPIDIUM IODIDE简易细胞核形态染色试剂盒 | 100 次 |
| G&VS10139.5 | DAPI简易细胞核形态染色试剂盒 | 100 次 |
| G&VS10139.6 | ETHIDIME BROMIDE简易细胞核形态染色试剂盒 | 100 次 |
| G&VS10139.7 | 罗丹明 123 简易细胞核形态染色试剂盒 | 100 次 |
| G&VS10139.8 | HOECHST33258 简易细胞核形态染色试剂盒 | 100 次 |
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