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吖啶橙(Acridine Orange)简易细胞核形态染色试剂盒产品说明书

发布时间:2026/8/12 15:46:07      阅读次数:27

吖啶橙Acridine Orange简易细胞核形态染色试剂盒产品说明书

 

主要用途

吖啶橙Acridine Orange简易细胞核形态染色试剂是一种旨在通过荧光染料吖啶橙Acridine OrangeDNA特异性结合,呈现蓝色,用于分析和观察细胞核形态或DNA含量的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种细胞核(动物、人体、植物、昆虫等)的观察。可以被用于细胞周期、细胞凋亡、细胞流式仪分析等研究。产品严格无菌,即到即用,荧光清晰,操作简捷,性能稳定。

 

技术背景

吖啶橙Acridine Orange,分子式为C17H20CIN3,分子量为301.82,是核酸特异性染料,为膜通透性,活细胞和死细胞均能染色。通过嵌入(intercalation)或静电吸引(electrostatic attraction),与双链DNA形成复合物,即1个分子结合3个碱基,而呈现绿色荧光(激发波长502nm散发波长525nm);或与单链DNA或RNA结合,即1个分子结合1个磷酸基团,而呈现桔红色荧光(激发波长460nm,散发波长650nm)。

 

产品内容

染色液Reagent A 微升

产品说明书                1

 

保存方式

保存在-20冰箱里,避免光照;有效保证6

 

用户自备

磷酸缓冲液(G&VS12033.1):用于清洗样品

微型台式离心机:用于悬浮细胞的操作

盖玻片:用于染色后封片

荧光显微镜:用于观察细胞核DNA染色

 

实验步骤

一、 贴壁细胞染色

1. 准备1个细胞培养48孔板的待测细胞,每孔铺满率达70

2. (注意:可以使用载玻片,载玻片培养皿,35mm培养皿,和其它培养孔板,见注意事项5

3. 小心抽去细胞培养液

4. 轻轻沿着孔壁加入500微升用户自备的磷酸缓冲盐溶液(PBS到细胞培养孔,覆盖培养孔表面

5. 小心抽去500酸缓冲盐溶液(PBS

6. 小心加入100微升用户自备的磷酸缓冲盐溶液(PBS,覆盖培养孔表面

7. 小心加入xx微升染色液Reagent A 

8. 轻轻摇动培养板,使其混匀

9. 室温下孵育60分钟,避免光照(或37培养箱里孵育20分钟)

10. 小心抽掉染色液

11. 轻轻沿着孔壁加入500微升用户自备的磷酸缓冲盐溶液(PBS到细胞培养孔,覆盖培养孔表面

12. 小心抽去500酸缓冲盐溶液(PBS

13. 重复实验步骤11至12一次

14. 小心加入200微升用户自备的磷酸缓冲盐溶液(PBS,覆盖培养孔表面

15. 即刻在倒置荧光显微镜下进行观察:激发波长500nm,散发波长530nm(细胞核呈现绿色)

 

二、 悬浮细胞染色

1. 将悬浮细胞(1 X 106细胞)移入到1.5毫升离心管

2. 放进微型台式离心机离心10分钟,速度为300g(或2000RPM,例如eppendorf 5415

3. 小心抽掉上清液

4. 加入500微升用户自备的磷酸缓冲盐溶液(PBS),混匀细胞颗粒群

5. 放进微型台式离心机离心10分钟,速度为300g(或2000RPM,例如eppendorf 5415

6. 小心抽掉上清液

7. 加入100微升用户自备的磷酸缓冲盐溶液(PBS),混匀细胞颗粒群

8. 加入xx微升染色液Reagent A混匀

9. 室温下孵育60分钟,避免光照(或37℃培养箱里孵育15分钟)

10. 放进微型台式离心机离心10分钟,速度为300g(或2000RPM,例如eppendorf 5415

11. 小心抽掉上清液

12. 加入500微升用户自备的磷酸缓冲盐溶液(PBS),混匀细胞颗粒群

13. 放进微型台式离心机离心10分钟,速度为300g(或2000RPM,例如eppendorf 5415

14. 小心抽掉上清液

15. 重复实验步骤11至13一次

16. 加入100微升用户自备的磷酸缓冲盐溶液(PBS混匀细胞颗粒群

17. 移出5微升到载玻片上,放上盖玻片

18. 即刻在荧光显微镜下进行观察:激发波长500nm,散发波长530nm(细胞核呈现绿色)

19. 或即刻进行细胞流式仪分析:激发波长480nm观察10000个细胞以上

 

注意事项

1. 本产品为100次操作

2. 本产品友好使用于双重染色或重叠染色

3. 操作时须戴手套

4. 操作时,避免污染母液

5. 本产品适合各种规格的培养细胞:载玻片,载玻片培养皿,35mm培养皿,和各种培养孔板,须相应调整试剂溶液:

操作容器

试剂溶液规格

载玻片

100微升

载玻片培养皿

100微升

35mm培养皿

500微升

96孔培养板

50微升

48孔培养板

100微升

24孔培养板

200微升

12孔培养板

400微升

6孔培养板

500微升

25cm2细胞培养瓶

1毫升

 

6. 本产品可用于悬浮细胞或细胞脱离处理后染色

7. 用户用于检测细胞凋亡,建议使用吖啶橙acridine orange细胞凋亡染色试剂盒G&VS10023.4

8. 如果染色固定后的细胞,室温下孵育时间15分钟

9. 样品可以100微克/毫升RNase预处理30分钟37℃)后再行染色

10. 孵育时,须避免光照

11. 建议细胞染色完成后,即刻进行分析,不宜超过2小时

12. 细胞流式仪分析前,须混匀内容物

13. 细胞流式仪分析,细胞检测量不得少于5000

14. 本公司提供系列简易细胞核染色分析试剂产品

 

质量标准

1. 本产品经鉴定性能稳定

2. 本产品经鉴定荧光清晰

 

使用承诺

上海极威生物科技有限公司秉着信誉至上、客户满意、质量承诺”的宗旨为我们的用户提供优质产品和服务。用户收到货后,应按照产品说明书上的规定妥善保管并在有效期内使用。我们的产品在销售前已作严格的质量鉴定,保证说明书所述的使用效果。在货到后10天内若发现确属本产品的质量问题,请立即以书面形式(实验报告)与本公司联系,并将该产品退回,经检验确系产品质量所致,本公司负责更换产品。如系使用者错误操作所致,本公司不承担由此造成的损失。

 

友情提醒

IF IT DOESN’T WORK, RECHECK YOUR EXPERIMENT TO SEE WHAT YOU DID WRONG

 

订购信息

单组分订购信息

编号            名称                           规格

G&VS10139.3      吖啶橙Acridine Orange简易细胞核形态染色试剂盒   100

G&VS10139.3A    染色液(Reagent A                      毫升

 

试剂盒订购信息

产品编号

名称

规格

G&VS10139.1

赫斯特33342HOECHST33342简易细胞核形态染色试剂盒

100

G&VS10139.2

赫斯特33342 HOECHST33342/碘化丙啶(PI简易细胞核形态双重染色试剂盒

100

G&VS10139.3

 吖啶橙Acridine Orange简易细胞核形态染色试剂盒

100

G&VS10139.4

碘化丙啶PROPIDIUM IODIDE简易细胞核形态染色试剂盒

100

G&VS10139.5

 DAPI简易细胞核形态染色试剂盒

100

G&VS10139.6

 溴化乙锭(ETHIDIUM BROMIDE简易细胞核形态染色试剂盒

100

G&VS10139.7

 罗丹明123简易细胞核外形态染色试剂盒

100

G&VS10139.8

赫斯特33258HOECHST33258简易细胞核形态染色试剂盒

100

G&VS10139.9

 吖啶橙Acridine Orange)/赫斯特33342HOECHST33342简易细胞核形态双重染色试剂盒

100

G&VS10139.10

 吖啶橙Acridine Orange)/碘化丙啶PROPIDIUM IODIDE简易细胞核形态双重染色试剂盒

100

G&VS10139.11

 吖啶橙Acridine Orange)/溴化乙锭(ETHIDIUM BROMIDE简易细胞核形态双重染色试剂盒

100

 


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