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发布时间：2026/8/12 15:52:46 阅读次数：40
植物细胞周期G2期同步（SYNCHRONY）处理试剂盒产品说明书
主要用途
植物细胞周期G2期同步（SYNCHRONY）处理试剂是一种旨在使用羟基脲和赛里西克立博双重处理，诱导活体细胞样品同步处于细胞周期G2期状态的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种代表性植物悬浮细胞（例如拟南芥MM1、MM2d、烟草细胞BY-2等）以及转化后细胞的细胞周期G2期同步化处理。产品严格无菌，即到即用，性能稳定，作用显著。
技术背景
细胞周期同步化（cell cycle synchrony）是通过外在的化学处理，使所有或绝大部分细胞处于同一细胞生长周期的特定阶段（G0、G1、S、G2、M等），同步实施相同的生化代谢活动，便于创造参数可控、目标明确的研究条件，来发现内源性或外源性因子产生的细胞变化的关联性，确定细胞周期特异性基因表达和分子分布，以及细胞结构状况，例如成膜体（phragmoplast）等。快速生长的植物细胞的细胞周期分为4个周期：G1（growth 1；生长期1；4至8小时）、S（synthesis；DNA复制；5小时）、G2（growth 2；生长期2；2至4小时）、M（mitosis；细胞有丝分裂；2至3小时）期。细胞周期依赖性激酶（cyclin dependent kinase；CDK）复合体调节细胞进入不同周期。通过使用不同的抑制剂达到特定周期的阻滞与释放（arrest and release），直至所有细胞同步。M期同步处理方法是通过羟基脲（hydroxyurea）和赛里西克立博（Seliciclib ；roscovitine）双重处理：首先羟基脲抑制核糖核苷酸还原酶（ribonucleotide reductase）活性，从而阻止核糖核苷酸（dNTPs）合成，达到抑制DNA合成，致细胞周期阻滞，使细胞诱导处于S期；然后赛里西克立博抑制细胞周期蛋白依赖性激酶（cyclin dependent kinase；CDK），致细胞周期阻滞，使细胞诱导处于G2期。
产品内容
处理液A（Reagent A） 毫升
处理液B（Reagent B） 毫升
产品说明书 1份
保存方式
保存在-20℃冰箱里，有效保证6月
用户自备
Murashige & Skoog基础培养基（G&VS12323）：用于植物细胞培养的营养基
50毫升锥形离心管：用于培养细胞的容器
恒温摇床：用于细胞孵育
20微米尼龙网：用于清洗
小型漏斗：用于清洗的装置
4℃台式离心机：用于样品操作
实验步骤
1． 准备1管20毫升的植物悬浮细胞
2． 转移到50毫升锥形离心管
3． 使用用户自备的MS（Murashige and Skoog medium）完全培养基（MS+蔗糖、二氯苯氧乙酸（2,4-Dichlorophenoxyaceticacid；2,4-D）、呋喃甲基腺嘌呤（kinetin）
4． 放进27℃摇床孵育7天，速度为130RPM（注意：根据细胞特点，采取光照或暗室）
5． 放进台式离心机离心5分钟，速度为400g（注意：如果细胞难以沉淀，可以增加到3000g）
6． 小心抽去上清液
7． 加入20毫升用户自备的MS完全培养液
8． 放进27℃摇床孵育1小时，速度为130RPM（注意：根据细胞特点，采取光照或暗室）
9． 移取4毫升悬浮细胞到新的50毫升锥形离心管
10． 加入16毫升新鲜的MS完全培养基
11． 加入xx微升处理液A（Reagent A）
12． 放进27℃摇床孵育18小时，速度为130RPM（注意：根据细胞特点，采取光照或暗室）
13． 准备1个小型漏斗，内衬20微米尼龙网，置于50毫升锥形离心管上
14． 将所有细胞内容液移入到小型漏斗里过滤
15． 加入20毫升用户自备的MS基础培养基，清洗过滤5分钟
16． 重复实验步骤15四次
17． 转移细胞到新的50毫升锥形离心管
18． （替代过滤步骤13至17）放进台式离心机离心5分钟，速度为400g（注意：如果细胞难以沉淀，可以增加到3000g）
19． （替代过滤步骤13至17）小心抽去上清液
20． （替代过滤步骤13至17）加入20毫升用户自备的MS基础培养基，混匀
21． （替代过滤步骤13至17）放进台式离心机离心5分钟，速度为400g（注意：如果细胞难以沉淀，可以增加到3000g）
22． （替代过滤步骤13至17）小心抽去上清液
23． （替代过滤步骤13至17）重复实验步骤20至22四次
24． 加入20毫升用户自备的MS基础培养液
25． 放进27℃摇床孵育4.5小时，速度为130RPM（注意：根据细胞特点，采取光照或暗室）
26． 加入xx微升处理液B（Reagent B）
27． 放进27℃摇床孵育5小时，速度为130RPM（注意：根据细胞特点，采取光照或暗室）
28． 准备1个小型漏斗，内衬20微米尼龙网，置于50毫升锥形离心管上
29． 将所有细胞内容液移入到小型漏斗里过滤
30． 加入20毫升用户自备的MS基础培养基，清洗过滤5分钟
31． 重复实验步骤30四次
32． 转移细胞到新的50毫升锥形离心管
33． （替代过滤步骤28至32）放进台式离心机离心5分钟，速度为400g（注意：如果细胞难以沉淀，可以增加到3000g）
34． （替代过滤步骤28至32）小心抽去上清液
35． （替代过滤步骤28至32）加入20毫升用户自备的MS基础培养基，混匀
36． （替代过滤步骤28至32）放进台式离心机离心5分钟，速度为400g（注意：如果细胞难以沉淀，可以增加到3000g）
37． （替代过滤步骤28至32）小心抽去上清液
38． （替代过滤步骤28至32）重复实验步骤35至37四次
39． 加入20毫升用户自备的MS完全培养液
40． 放进27℃摇床孵育1小时，速度为130RPM――细胞进入G2期
41． 继续后续操作，包括细胞流式仪鉴定（注意：建议使用植物细胞流式细胞仪细胞周期红色荧光分析试剂盒――G&VS10405）
注意事项
1． 本产品为10次操作
2． 本产品适用于快速生长（倍增时间24小时内），且分散充分的植物悬浮细胞
3． 拟南芥PSB-D、T87，以及其它植物悬浮细胞均可使用
4． 本产品可以达到80%以上细胞同步出现G2期
5． 操作时，须戴手套
6． 操作时，须严格无菌操作
7． 用户可以根据需求，使用不同的细胞用量，相应调整试剂用量
8． 用户可以根据不同细胞类型，采取光照或暗室培养
9． 建议使用过滤清洗为优选
10． 通常情况下，同步化处理后的细胞周期和时间关系参考如下
| 处理后时间 | 细胞周期阶段 | 特征 |
| 0至6小时 | G2 | 86% |
| 7至14小时 | M |
|
| 14至21小时 | G1 |
|
11． 本公司提供系列细胞周期分析试剂产品
质量标准
1． 本产品经鉴定性能稳定
2． 本产品经鉴定无细菌、病毒和支原体污染
使用承诺
上海极威生物科技有限公司秉着“信誉至上、客户满意、质量承诺”的宗旨为我们的用户提供优质产品和服务。用户收到货后，应按照产品说明书上的规定妥善保管并在有效期内使用。我们的产品在销售前已作严格的质量鉴定，保证说明书所述的使用效果。在货到后10天内若发现确属本产品的质量问题，请立即以书面形式（实验报告）与本公司联系，并将该产品退回，经检验确系产品质量所致，本公司负责更换产品。如系使用者错误操作所致，本公司不承担由此造成的损失。
友情提醒
IF IT DOESN’T WORK， RECHECK YOUR EXPERIMENT TO SEE WHAT YOU DID WRONG。
订购信息
单组分订购信息
编号 名称 规格
G&VS10140.8 植物细胞周期G2期同步（SYNCHRONY）处理试剂盒 10次
G&VS10140.8A 处理液A（Reagent A） 毫升
G&VS10140.8B 处理液B（Reagent B） 毫升
试剂盒订购信息
| 产品编号 | 名称 | 规格 |
| G&VS10140.1 | 植物细胞周期G0期同步（SYNCHRONY）处理试剂盒 | 10次 |
| G&VS10140.2 | 植物细胞周期G1早期同步（SYNCHRONY）处理试剂盒 | 10次 |
| G&VS10140.3 | 植物细胞周期G1期同步（SYNCHRONY）处理试剂盒 | 10次 |
| G&VS10140.4 | 植物细胞周期G1后期同步（SYNCHRONY）处理试剂盒 | 10次 |
| G&VS10140.5 | 植物细胞周期S早期同步（SYNCHRONY）处理试剂盒 | 10次 |
| G&VS10140.6 | 植物细胞周期S期同步（SYNCHRONY）处理试剂盒 | 10次 |
| G&VS10140.7 | 植物细胞周期S后期同步（SYNCHRONY）处理试剂盒 | 10次 |
| G&VS10140.8 | 植物细胞周期G2期同步（SYNCHRONY）处理试剂盒 | 10次 |
| G&VS10140.9 | 植物细胞周期M期同步（SYNCHRONY）处理试剂盒 | 10次 |
| G&VS10140.10 | 通用型植物样品细胞周期G1/S和G2/M期同步（SYNCHRONY）处理试剂盒 | 10次 |
| G&VS10405 | 植物细胞流式细胞仪细胞周期红色荧光分析试剂盒 | 20次 |
| G&VS10406 | 植物细胞有丝分裂指数（mitotic index；MI）荧光染色分析试剂盒 | 20次 |
| G&VS10407 | 植物细胞BrdU标记指数（labeling index）分析试剂盒 | 10次 |
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