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植物细胞周期G1后期同步(SYNCHRONY)处理试剂盒产品说明书

发布时间:2026/8/12 15:57:22      阅读次数:54

植物细胞周期G1期同步(SYNCHRONY)处理试剂盒产品说明书

 

主要用途

植物细胞周期G1期同步(SYNCHRONY)处理试剂是一种旨在使植物激素缺陷和赛里西克立博双重处理诱导活体细胞样品同步处于细胞周期G1期状态权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种代表性植物悬浮细胞(例如拟南芥MM1MM2d、烟草细胞BY-2等)以及转化后细胞的细胞周期G1期同步化处理。产品严格无菌,即到即用,性能稳定,作用显著。

 

技术背景

细胞周期同步化(cell cycle synchrony)是通过外在的化学处理,使所有或绝大部分细胞处于同一细胞生长周期的特定阶段(G0G1SG2M等),同步实施相同的生化代谢活动,便于创造参数可控、目标明确的研究条件,来发现内源性或外源性因子产生的细胞变化的关联性,确定细胞周期特异性基因表达和分子分布,以及细胞结构状况,例如成膜体(phragmoplast)等快速生长的植物细胞的细胞周期分为4个周期:G1growth 1;生长期148小时)、SsynthesisDNA复制;5小时)、G2growth 2;生长期224小时)、Mmitosis;细胞有丝分裂;23小时)期。细胞周期依赖性激酶(cyclin dependent kinaseCDK)复合体调节细胞进入不同周期。通过使用不同的抑制剂达到特定周期的阻滞与释放(arrest and release),直至所有细胞同步。M期同步处理方法是通过羟基脲(hydroxyurea植物激素缺陷赛里西克立博(Seliciclib roscovitine双重处理:首先植物激素缺陷,致细胞周期阻滞,使细胞诱导处于G0期;然后赛里西克立博(Seliciclib roscovitine 抑制细胞周期蛋白依赖性激酶cyclin dependent kinaseCDK致细胞周期阻滞,使细胞诱导处于G1期。

产品内容

处理液(Reagent A      毫升  

产品说明书                      1

 

保存方式

保存-20冰箱里有效保证6

 

用户自备

 Murashige & Skoog基础培养基G&VS12323):用于植物细胞培养的营养基

50毫升锥形离心管:用于培养细胞的容器

恒温摇床:用于细胞孵育

20微米尼龙网:用于清洗

小型漏斗:用于清洗的装置

4℃台式离心机:用于样品操作

 

实验步骤

1. 准备120毫升的植物悬浮细胞

2. 转移到50毫升锥形离心管

3. 使用用户自备的MSMurashige and Skoog medium完全培养基MS+蔗糖、二氯苯氧乙酸(2,4-Dichlorophenoxyaceticacid2,4-D)、呋喃甲基腺嘌呤(kinetin

4. 放进27摇床孵育7天,速度为130RPM(注意:根据细胞特点,采取光照或暗室)

5. 准备1个小型漏斗,内衬20微米尼龙网,置于50毫升锥形离心管上

6. 所有细胞内容液移入到小型漏斗里过滤

7. 加入20毫升用户自备的MS基础培养基,清洗过滤5分钟

8. 重复实验步骤7四次

9. 转移细胞到新的50毫升锥形离心管

10. (替代过滤步骤59)放进台式离心机离心5分钟,速度为400g(注意:如果细胞难以沉淀,可以增加到3000g

11. (替代过滤步骤59)小心抽去上清液

12. (替代过滤步骤59)加入20毫升用户自备的MS基础培养基,混匀

13. (替代过滤步骤59)放进台式离心机离心5分钟,速度为400g(注意:如果细胞难以沉淀,可以增加到3000g

14. (替代过滤步骤59)小心抽去上清液

15. (替代过滤步骤59)重复实验步骤1214四次

16. 加入20毫升用户自备的MS基础培养液+蔗糖

17. 放进27摇床孵育1小时,速度为130RPM(注意:根据细胞特点,采取光照或暗室)

18. 移取4毫升悬浮细胞到新的50毫升锥形离心管

19. 加入16毫升新鲜的MS基础培养基+3%蔗糖

20. 加入xx微升处理液(Reagent A

21. 放进27摇床孵育24小时,速度为130RPM(注意:根据细胞特点,采取光照或暗室)

22. 准备1个小型漏斗,内衬20微米尼龙网,置于50毫升锥形离心管上

23. 所有细胞内容液移入到小型漏斗里过滤

24. 加入20毫升用户自备的MS基础培养基,清洗过滤5分钟

25. 重复实验步骤24四次

26. 转移细胞到新的50毫升锥形离心管

27. (替代过滤步骤2226)放进台式离心机离心5分钟,速度为400g(注意:如果细胞难以沉淀,可以增加到3000g

28. (替代过滤步骤2226)小心抽去上清液

29. (替代过滤步骤2226)加入20毫升用户自备的MS基础培养基,混匀

30. (替代过滤步骤2226)放进台式离心机离心5分钟,速度为400g(注意:如果细胞难以沉淀,可以增加到3000g

31. (替代过滤步骤2226)小心抽去上清液

32. (替代过滤步骤2226)重复实验步骤2931四次

33. 加入20毫升用户自备的MS完全培养液

34. 放进27摇床孵育,速度为130RPM――细胞进入G1

35. 继续后续操作,包括细胞流式仪鉴定(注意:建议使用植物细胞流式细胞仪细胞周期红色荧光分析试剂盒――G&VS10405

 

注意事项

1. 本产品为10次操作

2. 本产品适用于快速生长(倍增时间24小时内),且分散充分的植物悬浮细胞

3. 拟南芥PSB-DT87,以及其它植物悬浮细胞均可使用

4. 本产品可以达到95%以上细胞同步出现G1

5. 操作时,须戴手套

6. 操作时,须严格无菌操作

7. 用户可以根据需求,使用不同的细胞用量,相应调整试剂用量

8. 用户可以根据不同细胞类型,采取光照或暗室培养

9. 建议使用过滤清洗为优选

10. 通常情况下,同步化处理后的细胞周期和时间关系参考如下

处理后时间

细胞周期阶段

特征

02小时

G1后期

95%

 11. 本公司提供系列细胞周期分析试剂产品

 

质量标准

1. 本产品经鉴定性能稳定

2. 本产品经鉴定无细菌、病毒和支原体污染

使用承诺

上海极威生物科技有限公司秉着信誉至上、客户满意、质量承诺的宗旨为我们的用户提供优质产品和服务。用户收到货后,应按照产品说明书上的规定妥善保管并在有效期内使用。我们的产品在销售前已作严格的质量鉴定,保证说明书所述的使用效果。在货到后10天内若发现确属本产品的质量问题,请立即以书面形式(实验报告)与本公司联系,并将该产品退回,经检验确系产品质量所致,本公司负责更换产品。如系使用者错误操作所致,本公司不承担由此造成的损失。

 

友情提醒

IF IT DOESN’T WORKRECHECK YOUR EXPERIMENT TO SEE WHAT YOU DID WRONG

 

订购信息

单组分订购信息

编号                      名称                                                                               规格

G&VS10140.4       植物细胞周期G1期同步(SYNCHRONY)处理试剂盒 10

G&VS10140.4A    处理液(Reagent A                                                      毫升

 

试剂盒订购信息

产品编号

名称

规格

G&VS10140.1

植物细胞周期G0期同步(SYNCHRONY)处理试剂盒

10

G&VS10140.2

植物细胞周期G1早期同步(SYNCHRONY)处理试剂盒

10

G&VS10140.3

植物细胞周期G1期同步(SYNCHRONY)处理试剂盒

10

G&VS10140.4

植物细胞周期G1后期同步(SYNCHRONY)处理试剂盒

10

G&VS10140.5

植物细胞周期S早期同步(SYNCHRONY)处理试剂盒

10

G&VS10140.6

植物细胞周期S期同步(SYNCHRONY)处理试剂盒

10

G&VS10140.7

植物细胞周期S后期同步(SYNCHRONY)处理试剂盒

10

G&VS10140.8

植物细胞周期G2期同步(SYNCHRONY)处理试剂盒

10

G&VS10140.9

植物细胞周期M期同步(SYNCHRONY)处理试剂盒

10

G&VS10140.10

通用型植物样品细胞周期G1/SG2/M期同步(SYNCHRONY)处理试剂盒

10

G&VS10405

植物细胞流式细胞仪细胞周期红色荧光分析试剂盒

20

G&VS10406

植物细胞有丝分裂指数(mitotic indexMI)荧光染色分析试剂盒

20

G&VS10407

植物细胞BrdU标记指数(labeling index)分析试剂盒

10

 


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