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热门关键词：白介素 gibco ELISA试剂盒胎牛血清移液器 ※本公司产品仅供科研实验研究使用，不用于临床诊断 !

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冰冻切片过氧亚硝基阴离子活性氧（ONOO-）荧光测定试剂盒产品说明书

发布时间：2026/8/17 11:35:50 阅读次数：16

冰冻切片过氧亚硝基阴离子活性氧（ONOO^-）荧光测定试剂盒产品说明书

主要用途

冰冻切片过氧亚硝基阴离子活性氧（ONOO^-）荧光测定试剂是一种旨在通过透膜荧光染色剂二氢罗丹明123，在组织细胞氧化条件下，产生绿色荧光，来定量检测组织细胞内过氧亚硝基阴离子活性氧族的生成和增加的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。可以被用于一氧化氮代谢、细胞凋亡、信号传递、衰老、代谢和营养学等的研究。适宜于冰冻动物组织的分析。产品严格无菌，即到即用，操作简易，定性检测，性能稳定。

技术背景

超氧自由基阴离子（superoxide radical；O2^-）、过氧化氢（hydrogen peroxide；H2O2）、羟自由基或氢氧基（hydroxyl radical；OH^-）、过氧化基（peroxyl radical；ROO^-）、氢过氧自由基（hydroperoxyl；HOO）、烷氧自由基（alcoxyl radical）、氮氧基（nitric Oxide；NO^-）、过氧亚硝基阴离子（peroxynitrite anion；ONOO^-）次氯酸（hypochlorous acid；HOCl）、半醌自由基（semiquinone radical）、单线态氧气（singlet oxygen）等细胞内活性氧族（Reactive Oxygen Species；ROS）的产生和增多，将导致细胞衰老或凋亡。其中过氧亚硝基阴离子是由亚硝酸和过氧化氢反应或超氧阴离子与一氧化氮反应所产生，成为强力氧化剂和硝酸化剂，进而与细胞内的硫氢基（sulphydrils）、金属分子、二氧化碳、酪氨酸残基等目标分子反应，引起细胞，包括DNA和蛋白大分子的损伤，导致各种炎症、血管硬化和神经退行性病变等。作为过氧亚硝基阴离子的特异性荧光探针二氢罗丹明123（dihydrorhodamine 123；DHR），是一种完全自由通过细胞膜的染色剂。一旦受到过氧亚硝基阴离子的氧化，便释放出产生强力绿色荧光的罗丹明123（rhodamine 123）。据此测定组织细胞内过氧亚硝基阴离子活性氧族的浓度。

产品内容

清理液（Reagent A）毫升

染色液（Reagent B）微升

稀释液（Reagent C）毫升

产品说明书 1份

保存方式

保存染色液（Reagent B）在－20℃冰箱里，严格避免光照；其余的保存在4℃冰箱里，有效保证6月

用户自备

1.5毫升离心管：用于工作液配制的容器

培养箱或恒温水槽：用于染色孵育

荧光显微镜：用于观察荧光组织

实验步骤

实验开始前，将－20℃冰箱里的试剂盒中的染色液（Reagent B）置入冰槽里融化，稀释液（Reagent C）置于室温预热。然后移出xx微升染色液（Reagent B）到新的1.5毫升离心管，加入xx微升稀释液（Reagent C），混匀后，标记为染色工作液，置入暗室里。然后进行下列操作。

1．准备5片待测的厚为10微米的未经固着处理的冰冻切片

2．置于室温下，小心加上xx微升预冷的清理液（Reagent A），铺满整个切片表面

3．小心移去切片上的清理液（Reagent A）

4．小心加上xx微升室温预热的染色工作液，铺满整个切片表面

5．在37℃湿润培养箱里，孵育20分钟（注意：避免液体蒸发）

6．小心移去切片上的染色工作液，避免光照

7．小心加上xx微升清理液（Reagent A），铺满整个切片表面

8．小心移去切片上的清理液（Reagent A）

9．放上盖玻片或封片

10．即刻在荧光显微镜下观察（定性检测）：激发波长480nm或500nm，散发波长530nm――绿色荧光增强，表明过氧亚硝基阴离子活性氧族（ONOO^-）含量高

注意事项

1．本产品为20次操作

2．建议使用新鲜组织（手术切除后1小时内）制成的冰冻切片

3．操作时，须戴手套

4． 染色工作液避免光照

5．孵育时，须避免光照

6．建议组织染色完成后，即刻进行荧光定性分析

7．如果背景荧光强度过大，可以稀释染色工作液10至1000倍

8．可以使用2.5微摩尔尿酸或25微摩尔半胱氨酸（cysteine），观察细胞荧光减弱或消失现象

9．本公司提供过氧亚硝基阴离子解构剂和清除剂溶液

10．本公司提供系列活性氧检测试剂产品

质量标准

1．本产品经鉴定性能稳定

2．本产品经鉴定荧光清晰

使用承诺

上海极威生物科技有限公司秉着“信誉至上、客户满意、质量承诺”的宗旨为我们的用户提供优质产品和服务。用户收到货后，应按照产品说明书上的规定妥善保管并在有效期内使用。我们的产品在销售前已作严格的质量鉴定，保证说明书所述的使用效果。在货到后10天内若发现确属本产品的质量问题，请立即以书面形式（实验报告）与本公司联系，并将该产品退回，经检验确系产品质量所致，本公司负责更换产品。如系使用者错误操作所致，本公司不承担由此造成的损失。

友情提醒

IF IT DOESN’T WORK， RECHECK YOUR EXPERIMENT TO SEE WHAT YOU DID WRONG。

订购信息

单组分订购信息

编号名称规格

G&VS10149.2 冰冻切片过氧亚硝基阴离子活性氧荧光测定试剂盒 20次

G&VS10149.2A 清理液（Reagent A）毫升

G&VS10149.2B 染色液（Reagent B）微升

G&VS10149.2C 稀释液（Reagent C）毫升

试剂盒订购信息

产品编号	名称	规格
G&VS10149.1	细胞内过氧亚硝基阴离子活性氧（ONOO^-）荧光测定试剂盒	20次
G&VS10149.2	冰冻切片过氧亚硝基阴离子活性氧（ONOO^-）荧光测定试剂盒	20次
G&VS10149.3	活体组织过氧亚硝基阴离子活性氧（ONOO^-）荧光测定试剂盒	20次
G&VS10149.4	真菌/酵母细胞内过氧亚硝基阴离子活性氧（ONOO^-）荧光测定试剂盒	20次
G&VS10149.5	植物过氧亚硝基阴离子活性氧（ONOO^-）荧光测定试剂盒	20次
G&VS10149.6	体液过氧亚硝基阴离子活性氧（ONOO^-）荧光测定试剂盒	20次
G&VS12298	过氧亚硝基阴离子解构剂FeTMPyP pentachloride	1毫升
G&VS12299	过氧亚硝基阴离子清除剂硫化乙醇胍琥珀酸钠（Mercaptoethylguanidine sodium succinate）	1毫升