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动物细胞/组织染色体(chromosome)粗提分离试剂盒产品说明书

发布时间:2026/8/17 11:38:39      阅读次数:40

 

动物细胞/组织染色体(chromosome粗提分离试剂盒产品说明书

 

主要用途

动物细胞/组织染色体(chromosome粗提分离试剂是一种旨在从动物细胞或组织中分离出完整而纯化的染色体组分的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。适合于动物组织和培养细胞的染色体的制备。可以被用于细胞遗传学、基因组学、染色体分型、细胞周期、蛋白组学等的研究。产品不含污染性蛋白酶和核酶,即到即用,性能稳定,分离产量和纯度佳。

 

技术背景

染色体(chromosome)是细胞复活的象征,染色体的分离是现代细胞遗传学研究的最常用的手段之一,由此进行染色体结构(包括大小、密度、构型)、细胞周期的生化特征、遗传图谱、基因转移、染色体蛋白磷酸化等方面的研究和分析。从任何组织或细胞分离染色体的技术方法基本上采用:第一,通过机械或化学方法破裂细胞;第二,通过低速差速离心去除残渣碎屑和未溶解的细胞核;第三,通过高速差速离心获得释放的染色体;第四,通过等密度离心获得纯度更高的染色体。 

 

产品内容

清理液(Reagent A   毫升

裂解液(Reagent B   毫升

强化液(Reagent C   毫升

净化液(Reagent D   毫升

保存液(Reagent E   毫升

产品说明书   1

 

保存方式

保存保存液(Reagent C)在-20冰箱里,其余的保存在4冰箱里,有效保证6

 

用户自备

HANK平衡盐缓冲溶液(G&VS12028)或PBS缓冲溶液(G&VS12033):用于清理细胞

胰蛋白酶乙二胺四乙酸混合液(G&VS12024):用于细胞脱离

完全细胞培养液(G&VS12052):用于细胞处理所需的培养基

15毫升锥形离心管:用于样品操作的容器

50毫升锥形离心管:用于样品操作的容器

1.5毫升离心管:用于样品保存的容器

4台式离心机:用于样品操作

DOUNCE匀浆器:用于裂解细胞

 

实验步骤

 

一、 动物组织染色体分离

1. 手术取出动物组织,并秤重以确定1克组织重量  

2. (选择步骤)放进预冷的50毫升锥形离心管

3. (选择步骤)加入xx毫升清理液(Reagent A清洗1

4. 即刻用刀片切碎组织

5. 放进一个预冷的15毫升锥形离心管

6. 加入xx毫升预冷的裂解液Reagent B

7. 涡旋震荡5秒,充分混匀

8. 在冰槽里孵育20分钟

9. 加入xx微升强化液(Reagent C,混匀

10. 在冰槽里孵育5分钟

11. 即刻放入预冷的DOUNCE匀浆器

12. 在冰槽里用匀浆棒匀化组织(约80下)(注意:参见注意事项7

13. 将所有组织匀浆物移入15毫升锥形离心管

14. 放进4台式离心机离心5分钟,速度为120g

15. 小心移出上清液到另一个新的预冷的15毫升锥形离心管——此步骤去除未溶解的细胞核和细胞

16. 放进4台式离心机离心10分钟,速度为2500g

17. 小心抽去上清液,保留沉淀颗粒

18. 加入xx毫升预冷的净化液(Reagent D,混匀颗粒群

19. 放进4台式离心机离心5分钟,速度为120g

20. 小心移出上清液到另一个新的预冷的15毫升锥形离心管

21. 放进4台式离心机离心10分钟,速度为2500g

22. 小心抽去上清液保留沉淀颗粒——此步骤获得染色体沉淀物

23. 加入xx保存液(Reagent E,充分混匀

24. 即刻移入1.5毫升离心管,放进-70冰箱里

 

二、动物细胞染色体分离

1. 准备51075cm2细胞培养瓶的细胞(5 X 109),直至细胞生长铺满整个培养表面

2. 分别加入10毫升用户自备的HANK平衡盐缓冲溶液或PBS缓冲溶液到每个细胞培养瓶,覆盖培养瓶表面,然后抽去

3. 重复实验步骤2一次

4. 加入3毫升用户自备的胰蛋白酶乙二胺四乙酸混合液,铺满整个细胞生长表面

5. 置入37培养箱3分种

6. 轻轻手击震动培养瓶,使细胞脱落,

7. 分别加入10毫升用户自备的完全细胞培养液

8. 移入一个50毫升锥形离心管

9. 放进台式离心机离心10分钟,速度为200g

10. 小心抽去上清液

11. 加入xx毫升预冷的清理液(Reagent A),混匀细胞

12. 放进台式离心机离心10分钟,速度为300g

13. 小心抽去上清液

14. 加入xx毫升预冷的裂解液Reagent B

15. 涡旋震荡5秒,充分混匀

16. 在冰槽里孵育20分钟

17. 加入xx微升强化液(Reagent C,混匀

18. 在冰槽里孵育5分钟

19. 即刻放入预冷的DOUNCE匀浆器

20. 在冰槽里用匀浆棒匀化细胞(约80下)(注意:参见注意事项7

21. 将所有细胞匀浆物移入15毫升锥形离心管

22. 放进4台式离心机离心5分钟,速度为120g

23. 小心移出上清液到另一个新的预冷的15毫升锥形离心管——此步骤去除未溶解的细胞核和细胞

24. 放进4台式离心机离心10分钟,速度为2500g

25. 小心抽去上清液,保留沉淀颗粒

26. 加入xx毫升预冷的净化液(Reagent D,混匀颗粒群

27. 放进4台式离心机离心5分钟,速度为120g

28. 小心移出上清液到另一个新的预冷的15毫升锥形离心管

29. 放进4台式离心机离心10分钟,速度为2500g

30. 小心抽去上清液,保留沉淀颗粒——此步骤获得染色体沉淀物

31. 加入xx保存液(Reagent E,充分混匀

32. 即刻移入1.5毫升离心管,放进-70冰箱里

 

注意事项

1. 本产品为20次(1克动物组织或5 X 109细胞)操作

2. 建议使用有丝分裂期的细胞为佳

3. 所有操作均须严格在4或以下状态进行

4. 操作时,须戴手套

5. 操作时,须无菌操作,避免污染母液,尤其是保存液(Reagent E

6. 建议使用足够的样品量

7. 建议严格控制操作时间

8. 通常匀化次数为80下(或细胞颗粒群/组织块状消失为止)达到80%的细胞裂解为理想状态,但不同的组织或细胞类型会存在差异。用户可以通过显微镜观察3微升匀浆物的细胞裂解程度:完整细胞呈现发亮的圆环。低于50%可以增加匀化次数

9. 通常染色体产率为40%

10. 如果需要获得99%以上纯度的微粒体,使用动物细胞/组织染色体(chromosome高纯分离试剂盒G&VS10143.1.2

11. 本公司提供系列染色体分析试剂产品

 

质量标准

1. 本产品经鉴定性能稳定

2. 本产品经鉴定分离的染色形态完整

3. 本产品经鉴定分离的染色体维持正常活性

4. 本产品经鉴定不含污染性蛋白酶和核酶

 

使用承诺

上海极威生物科技有限公司秉着信誉至上、客户满意、质量承诺的宗旨为我们的用户提供优质产品和服务。用户收到货后,应按照产品说明书上的规定妥善保管并在有效期内使用。我们的产品在销售前已作严格的质量鉴定,保证说明书所述的使用效果。在货到后10天内若发现确属本产品的质量问题,请立即以书面形式(实验报告)与本公司联系,并将该产品退回,经检验确系产品质量所致,本公司负责更换产品。如系使用者错误操作所致,本公司不承担由此造成的损失。

 

友情提醒

IF IT DOESN’T WORKRECHECK YOUR EXPERIMENT TO SEE WHAT YOU DID WRONG

 

订购信息

单组分订购信息

编号            名称                   规格

G&VS10143.1.1     动物细胞/组织染色体粗提分离试剂盒   20

G&VS10143.1.1A    清理液(Reagent A             毫升

G&VS10143.1.1B    裂解液(Reagent B            毫升

G&VS10143.1.1C    强化液(Reagent C             毫升

G&VS10143.1.1D    净化液(Reagent D            毫升

G&VS10143.1.1E    存液(Reagent E            毫升

G&VS12024      胰蛋白酶乙二胺四乙酸混合液                        毫升

G&VS12028        HANKS平衡盐缓冲溶液                               毫升

G&VS12033        PBS缓冲溶液                                                 毫升

G&VS12052        DMEM完全细胞培养基                               毫升

试剂盒订购信息

产品编号

名称

规格

G&VS10143.1.1

动物细胞/组织染色体(chromosome粗提分离试剂盒

20

G&VS10143.1.2

动物细胞/组织染色体(chromosome高纯分离试剂盒

10

G&VS10143.2.1

植物细胞染色体(chromosome粗提分离试剂盒

20

G&VS10143.2.2

植物细胞染色体(chromosome高纯分离试剂盒

10

G&VS10143.3.1

酵母细胞染色体(chromosome粗提分离试剂盒

20

G&VS10143.3.2

酵母细胞染色体(chromosome高纯分离试剂盒

10

G&VS10143.4.1

昆虫细胞染色体(chromosome粗提分离试剂盒

20

G&VS10143.4.2

昆虫细胞染色体(chromosome高纯分离试剂盒

10

G&VS10143.5.1

细菌染色体(chromosome粗提分离试剂盒

20

G&VS10143.5.2

细菌染色体(chromosome高纯分离试剂盒

10

 


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