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热门关键词：白介素 gibco ELISA试剂盒胎牛血清移液器 ※本公司产品仅供科研实验研究使用，不用于临床诊断 !

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胞浆内钙离子浓度荧光（Fura-2）检测试剂盒产品说明书

发布时间：2026/8/17 11:42:13 阅读次数：52

胞浆内钙离子浓度荧光（Fura-2）检测试剂盒产品说明书

主要用途

胞浆内钙离子浓度荧光（Fura-2）检测试剂是一种旨在通过胞浆钙离子特异性荧光探针Fura-2-AM，与钙离子结合后，其荧光强度显著增强，在荧光酶标仪下测量不同激发波长下相对荧光峰值的比值，来测定细胞浆总钙离子浓度的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种活体细胞（动物、人体等）或冰冻切片组织细胞浆钙离子的浓度检测。产品严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定，检测敏感。

技术背景

钙是人体中的一种重要电介质和矿物质，占1150克。其中99％的钙以氟磷灰石钙（calcium fluorophosphate apatite）形式存在于骨组织中。非骨组织钙成分主要存在于细胞内。钙具有两种主要形式：一种是非弥散型蛋白结合钙，其构成约40％至50％的血清中的总钙含量；另一种为弥散型游离钙，其进一步分成具有活性的复合钙（complexed calcium）和离子钙（ionized calcium）。钙对神经肌肉兴奋性（neuromuscular excitability）、血液凝固、酶的激活、离子跨膜运输、释放神经传导介质、信使传导等方面起着重要作用。在细胞内，钙离子主要储存在线粒体和内质网等细胞器中。其中细胞浆钙离子在调节钙离子通道，维持细胞内环境钙离子平衡方面起着重要作用。细胞浆钙的检测包括沉淀法、EDTA鳌合滴定法、火焰光度法（flame photometry）、原子吸收分光光度法等技术，但容易受到钠、钾、磷酸盐、硫酸盐的干扰，或者受限于仪器的特殊的要求，以及需要细胞浆分离。Fura-2 AM（acetoxy-methyl ester），一种具有细胞膜通透性，与钙离子结合产生荧光的染料，通过其不同激发波长340nm/380nm产生的荧光信号比（散发波长510nm）来精确测定细胞浆内钙离子水平。

产品内容

清理液（Reagent A）毫升

染色液（Reagent B）微升

介导液（Reagent C）微升

饱和液（Reagent D）毫升

阴性液（Reagent E）毫升

裂解液（Reagent F）微升

产品说明书 1份

保存方式

保存染色液（Reagent B）和介导液（Reagent C）在－20℃冰箱里，避免光照；其余的保存在4℃冰箱里；有效保证6月

用户自备

1.5毫升离心管：用于工作液配制的容器

细胞培养箱：用于染色孵育

黑色96孔板：用于样品操作的容器

荧光酶标仪：用于荧光分析

（共聚焦）荧光显微镜：用于荧光染色观察

实验步骤

一、 测定准备

1．设定好荧光酶标仪：激发波长340nm和380nm，散发波长510nm；增益倍数100至200

2．测定开始前，将－20℃冰箱里的试剂盒中的染色液（Reagent B）室温下融化，然后分别移出xx微升介导液（Reagent C）和xx微升染色液（Reagent B）到新的1.5毫升离心管，标记为染色工作液，并放在暗室里备用。然后进行下列操作。

二、荧光酶标仪检测

1．准备1个黑色96孔板，标记为：细胞样品孔、空白对照孔（不含细胞）、最大对照孔（含细胞）

2．小心抽去细胞样品孔和最大对照孔的培养液

3．加入xx微升清理液（Reagent A）到细胞样品孔里

4．加入xx微升饱和液（Reagent D）到最大对照孔里

5．加入xx微升阴性液（Reagent E）到空白对照孔里

6．分别加入10微升染色工作液到所有孔里

7．轻轻摇动黑色96孔板，混匀

8．放进37℃细胞培养箱里孵育60分钟，避免光照

9．小心抽去细胞样品孔里的上清液

10．小心加入xx微升清理液（Reagent A）到细胞样品孔里

11．重复实验步骤9和10一次

12．放进37℃细胞培养箱里孵育30分钟

13．加入xx微升裂解液（Reagent F）到最大对照孔里

14．放进37℃细胞培养箱里孵育15分钟

15．即刻放进荧光酶标仪测读：获得相对荧光单位（relative fluorescence unit；RFU）包括样品RFU340nm、样品RFU380nm、空白对照孔RFU340nm、空白对照孔RFU380nm、最大对照孔RFU340nm、最大对照孔RFU380nm

16．计算样品细胞浆钙离子浓度

{【（样品RFU340nm/样品RFU380nm）－（空白对照孔RFU340nm/空白对照孔RFU380nm）】÷【（最大对照孔RFU340nm/最大对照孔RFU380nm－样品RFU340nm/样品RFU380nm）】}X（空白对照孔RFU380nm/最大对照孔RFU380nm） X 140（纳摩尔/升；解离常数）

三、（共聚焦）或荧光显微镜检测

1．准备1个待测的细胞爬片样品

2．小心加上xx微升清理液（Reagent A），覆盖样品表面

3．小心移去样品上的清理液（Reagent A）

4．移取xx微升清理液（Reagent A）到新的1.5毫升离心管

5．加入xx微升染色工作液，混匀

6．小心加上上述含有染色工作液的溶液到样品上，覆盖样品表面

7．放进37℃细胞培养箱里孵育60分钟，避免光照

8．小心移去样品上的染色工作液

9．小心加上xx微升新鲜的清理液（Reagent A）

10．小心移去清理液（Reagent A）

11．小心加上xx微升新鲜的清理液（Reagent A）

12．放进37℃细胞培养箱里孵育30分钟

13．小心移去清理液（Reagent A）

14．盖上盖玻片

15．即刻在（共聚焦）荧光显微镜下进行观察：激发波长340至400nm，散发波长510nm（细胞浆钙离子呈现蓝色或绿色荧光）（注意：见注意事项9）

四、冰冻切片检测

1．准备1个待测的冰冻切片

2．小心加上xx微升清理液（Reagent A），覆盖切片样品表面

3．小心移去样品上的清理液（Reagent A）

4．移取xx微升清理液（Reagent A）到新的1.5毫升离心管

5．加入xx微升染色工作液，混匀

6．小心加上上述含有染色工作液的溶液到切片样品上，覆盖样品表面

7．放进37℃细胞培养箱里孵育60分钟，避免光照

8．小心移去切片上的染色工作液

9．小心加上xx微升新鲜的清理液（Reagent A）

10．小心移去清理液（Reagent A）

11．小心加上xx微升新鲜的清理液（Reagent A）

12．放进37℃细胞培养箱里孵育30分钟

13．小心移去清理液（Reagent A）

14．盖上盖玻片

15．即刻在（共聚焦）荧光显微镜下进行观察：激发波长340至400nm，散发波长510nm（组织细胞浆钙离子呈现蓝色或绿色荧光）（注意：见注意事项9）

注意事项

1．本产品为20次（显微镜）或60次（96孔板）操作

2．操作时，须戴手套

3．可以使用荧光分光光度仪检测

4．如果细胞内酯酶缺失，则建议使用微注射（microinjection）技术

5．避免使用EDTA等处理样品

6．孵育反应完成后即刻进行荧光测定

7．如果待测样品浓度过高或过低，可以调整样品浓度

8．检测敏感度可达纳摩尔级钙浓度范围

9．荧光显微镜检测注意事项：

1）建议使用激发和散发波长滤波器MS-455LD和OI-19-EM，可以精准在340nm和380nm激发，510nm散发，获得蓝色荧光和绿色荧光等

2）基础荧光为深蓝色荧光，如果胞浆内钙离子浓度高，显示绿色荧光增强，参考图像如下：（上图为基础钙离子荧光；中图为钙离子增强绿色荧光；下图为高浓度钙离子绿色荧光）

3）可以使用专用软件分析出图像中的钙离子浓度

4）如果没有特定滤波器和软件，使用蓝光和绿光进行定性初步观察，注意绿色荧光的差异

10．可以使用通用UV2A或2B模块，避免使用2E/C模块

11．本产品不适宜于细胞流式仪检测

12．本公司提供系列钙生化检测试剂产品

质量标准

1．本产品经鉴定性能稳定

2．本产品经鉴定检测敏感

使用承诺

上海极威生物科技有限公司秉着“信誉至上、客户满意、质量承诺”的宗旨为我们的用户提供优质产品和服务。用户收到货后，应按照产品说明书上的规定妥善保管并在有效期内使用。我们的产品在销售前已作严格的质量鉴定，保证说明书所述的使用效果。在货到后10天内若发现确属本产品的质量问题，请立即以书面形式（实验报告）与本公司联系，并将该产品退回，经检验确系产品质量所致，本公司负责更换产品。如系使用者错误操作所致，本公司不承担由此造成的损失。

友情提醒

IF IT DOESN’T WORK， RECHECK YOUR EXPERIMENT TO SEE WHAT YOU DID WRONG。

订购信息

单组分订购信息

编号名称规格

G&VS10152.1 胞浆内钙离子浓度荧光（Fura-2）检测试剂盒 20次

G&VS10152.1A 清理液（Reagent A）毫升

G&VS10152.1B 染色液（Reagent B）微升

G&VS10152.1C 介导液（Reagent C）微升

G&VS10152.1D 饱和液（Reagent D）毫升

G&VS10152.1E 阴性液（Reagent E）毫升

G&VS10152.1F 裂解液（Reagent F）毫升

试剂盒订购信息

产品编号	名称	规格
G&VS50097.1	细胞钙离子浓度比色法定量检测试剂盒	20次
G&VS50097.2	组织钙离子浓度比色法定量检测试剂盒	20次
G&VS50097.3	体液钙离子浓度比色法定量检测试剂盒	20次
G&VS50097.4	食物钙离子浓度比色法定量检测试剂盒	20次
G&VS50097.5	环境钙离子浓度比色法定量检测试剂盒	20次
G&VS70036	血清钙比色法定量检测试剂盒	50次
G&VS10152.1	胞浆内钙离子浓度荧光（Fura-2）检测试剂盒	20次
G&VS10152.2	胞浆内钙离子浓度荧光（Fura-red）检测试剂盒	20次
G&VS10152.3	细菌胞浆内钙离子浓度荧光（Fura-2）检测试剂盒	20次
G&VS10153	线粒体内钙离子浓度荧光检测试剂盒	20次
G&VS10154	细胞内钙离子水平动态变化荧光检测试剂盒	20次
G&VS10267	内质网内钙离子浓度荧光检测试剂盒	20次
G&VS10157.1	细胞钙离子浓度荧光定量检测试剂盒	20次
G&VS10157.2	组织钙离子浓度荧光定量检测试剂盒	20次
G&VS10157.3	体液钙离子浓度荧光定量检测试剂盒	20次
G&VS10157.4	食物钙离子浓度荧光定量检测试剂盒	20次
G&VS10157.5	环境钙离子浓度荧光定量检测试剂盒	20次
G&VS80045.1	石蜡样品冯库萨（VON KOSSA）钙染色试剂盒	50次
G&VS80045.2	冰冻样品冯库萨（VON KOSSA）钙染色试剂盒	50次
G&VS80045.3	细胞冯库萨（VON KOSSA）钙染色试剂盒	50次
G&VS80045.4	全组织冯库萨（VON KOSSA）钙染色试剂盒	10次
G&VS80046.1	石蜡样品茜素红（ALIZARIN RED S）钙染色试剂盒	50次
G&VS80046.2	冰冻样品茜素红（ALIZARIN RED S）钙染色试剂盒	50次
G&VS80046.3	细胞茜素红（ALIZARIN RED S）钙染色试剂盒	50次
G&VS80046.4	全组织茜素红（ALIZARIN RED S）钙染色试剂盒	10次