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热门关键词：白介素 gibco ELISA试剂盒胎牛血清移液器 ※本公司产品仅供科研实验研究使用，不用于临床诊断 !

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细胞钙离子浓度荧光定量检测试剂盒产品说明书

发布时间：2026/8/20 13:02:23 阅读次数：32

细胞钙离子浓度荧光定量检测试剂盒产品说明书

主要用途

细胞钙离子浓度荧光定量检测试剂是一种旨在通过钙离子特异性荧光探针Fluo-4，与钙离子结合后，其荧光强度显著增强，在荧光分光光度仪下观察相对荧光峰值的变化，来测定细胞裂解悬液中总钙离子浓度的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种细胞（动物、人体等）裂解萃取样品中总钙离子的浓度检测。产品严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定，检测敏感。

技术背景

钙是人体中的一种重要电介质和矿物质，占1150克。其中99％的钙以氟磷灰石钙（calcium fluorophosphate apatite）形式存在于骨组织中。非骨组织钙成分主要存在于细胞内。钙具有两种主要形式：一种是非弥散型蛋白结合钙，其构成约40％至50％的血清中的总钙含量；另一种为弥散型游离钙，其进一步分成具有活性的复合钙（complexed calcium）和离子钙（ionized calcium）。钙对神经肌肉兴奋性（neuromuscular excitability）、血液凝固、酶的激活、离子跨膜运输、释放神经传导介质、信使传导等方面起着重要作用。钙的检测包括沉淀法、EDTA鳌合滴定法、火焰光度法（flame photometry）、原子吸收分光光度法等技术，但容易受到钠、钾、磷酸盐、硫酸盐的干扰，或者受限于仪器的特殊的要求。Fluo-4，一种与钙离子结合，其荧光强度迅速增强100倍的荧光探针，可以敏感测定微量游离钙离子水平。在荧光分光光度仪下，激发波长485nm，散发波长520nm，来定量测定细胞的钙浓度。

产品内容

清理液（Reagent A）毫升

裂解液（Reagent B）毫升

反应液（Reagent C）毫升

饱和液（Reagent D）毫升

阴性液（Reagent E）毫升

产品说明书 1份

保存方式

保存清理液（Reagent A）在4℃冰箱里；其余的保存在－20℃冰箱里；反应液（Reagent C）避免光照；有效保证6月

用户自备

1.5毫升离心管：用于样品操作的容器

15毫升锥形离心管：用于样品操作的容器

细胞刮脱棒：用于细胞脱离

DOUNCE匀浆器：用于样品制备

超声仪：用于样品制备

微型台式离心机：用于样品沉淀

培养箱：用于反应物孵育

黑色96孔板：用于样品荧光测定的容器

荧光酶标仪：用于样品荧光分析

实验步骤

一、 样品准备

1．准备好25cm²细胞培养瓶或60mm细胞培养皿的待测培养细胞（1 X 10⁶细胞）

2．小心加入xx毫升清理液（Reagent A），覆盖生长表面

3．小心抽去清理液

4．使用细胞刮脱棒轻柔刮脱细胞（注意：可以使用胰酶消化）

5．加入xx毫升清理液（Reagent A），混匀细胞

6．移入到预冷的15毫升锥形离心管（注意：悬浮细胞从这一步骤开始）

7．放进4℃台式离心机离心5分钟，速度为300g

8．小心抽去上清液

9．加入xx微升裂解液（Reagent B），充分混匀

10．涡旋震荡5秒，充分混匀

11．即刻放入预冷的DOUNCE匀浆器

12．在冰槽里用匀浆棒匀化细胞（约20至40下）

13．（或超声处理：100瓦，10秒一次，间隔1分钟，重复3次）

14．将所有细胞匀浆物移入1.5毫升离心管

15．放进4℃微型台式离心机离心10分钟，速度为16000g（或13000RPM，例如eppendorf 5415）

16．小心移取上清液到新的1.5毫升离心管

17．移取10微升进行蛋白定量检测（注意：建议使用 Bradford蛋白质浓度定量试剂盒－G&VS30030.1）

18．即刻放进－70℃保存或置于冰槽里继续后续操作

二、 测定准备

1．准备好上述制备的待测样品，置于冰槽里备用

2．设定好荧光酶标仪（22℃）：激发波长485nm，散发波长520nm

三、荧光测定

1．准备1个黑色96孔板，标记为：样品孔、空白对照孔、最大对照空

2．移取100微升（20微克蛋白）上述制备的样品到样品孔里

3．移取xx微升饱和液（Reagent D）到最大对照空里

4．移取xx微升阴性液（Reagent E）到空白对照空

5．分别加入xx微升反应液（Reagent C）到所有孔里

6．轻轻摇动黑色96孔板，混匀

7．室温下（22℃），孵育30分钟，避免光照

8．即刻放进荧光酶标仪测读：获得相对荧光单位（relative fluorescence unit；RFU）

9．计算样品钙离子浓度：纳摩尔（注意：不要遗忘乘上稀释倍数）

注意事项

1．本产品为20次操作

2．操作时，须戴手套

3．避免使用EDTA等处理样品

4．孵育反应完成后即刻进行荧光测定

5．如果待测样品浓度过高或过低，可以调整样品浓度

6．检测敏感度可达纳摩尔级钙浓度范围

7．样品浓度可以按照细胞数或蛋白量定义

8．本公司提供系列钙生化检测试剂产品

质量标准

1．本产品经鉴定性能稳定

2．本产品经鉴定检测敏感

使用承诺

上海极威生物科技有限公司秉着“信誉至上、客户满意、质量承诺”的宗旨为我们的用户提供优质产品和服务。用户收到货后，应按照产品说明书上的规定妥善保管并在有效期内使用。我们的产品在销售前已作严格的质量鉴定，保证说明书所述的使用效果。在货到后10天内若发现确属本产品的质量问题，请立即以书面形式（实验报告）与本公司联系，并将该产品退回，经检验确系产品质量所致，本公司负责更换产品。如系使用者错误操作所致，本公司不承担由此造成的损失。

友情提醒

IF IT DOESN’T WORK， RECHECK YOUR EXPERIMENT TO SEE WHAT YOU DID WRONG。

订购信息

单组分订购信息

编号名称规格

G&VS10157.1 细胞钙离子浓度荧光定量检测试剂盒 20次

G&VS10157.1A 清理液（Reagent A）毫升

G&VS10157.1B 裂解液（Reagent B）毫升

G&VS10157.1C 反应液（Reagent C）毫升

G&VS10157.1D 饱和液（Reagent D）毫升

G&VS10157.1E 阴性液（Reagent E）毫升

试剂盒订购信息

产品编号	名称	规格
G&VS50097.1	细胞钙离子浓度比色法定量检测试剂盒	20次
G&VS50097.2	组织钙离子浓度比色法定量检测试剂盒	20次
G&VS50097.3	体液钙离子浓度比色法定量检测试剂盒	20次
G&VS50097.4	食物钙离子浓度比色法定量检测试剂盒	20次
G&VS50097.5	环境钙离子浓度比色法定量检测试剂盒	20次
G&VS70036	血清钙比色法定量检测试剂盒	50次
G&VS10152	胞浆内钙离子浓度荧光检测试剂盒	20次
G&VS10153	线粒体内钙离子浓度荧光检测试剂盒	20次
G&VS10154	细胞内钙离子水平动态变化荧光检测试剂盒	20次
G&VS10157.1	细胞钙离子浓度荧光定量检测试剂盒	20次
G&VS10157.2	组织钙离子浓度荧光定量检测试剂盒	20次
G&VS10157.3	体液钙离子浓度荧光定量检测试剂盒	20次
G&VS10157.4	食物钙离子浓度荧光定量检测试剂盒	20次
G&VS10157.5	环境钙离子浓度荧光定量检测试剂盒	20次