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热门关键词：白介素 gibco ELISA试剂盒胎牛血清移液器 ※本公司产品仅供科研实验研究使用，不用于临床诊断 !

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细胞BCL-2蛋白表达流式细胞仪检测试剂盒产品说明书

发布时间：2026/8/26 17:22:56 阅读次数：43

细胞BCL-2蛋白表达流式细胞仪检测试剂盒产品说明书

主要用途

细胞BCL-2蛋白表达流式细胞仪检测试剂是一种旨在使用抗BCL-2单克隆抗体以及荧光染料缀合物二抗，通过双重参数细胞流式仪定量检测样品中BCL-2表达水平的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。主要适用于各种活体细胞（人体、大鼠、小鼠等）的BCL-2表达水平的测定。广泛用于细胞凋亡的研究。产品严格无菌，即到即用，反应敏感，操作简捷，性能稳定。

技术背景

B细胞淋巴瘤/白血病2蛋白（B Cell Lymphoma/leukemia 2；BCL-2），由原癌基因（protooncogene）Bcl-2基因编码，位于染色体18上，为BCL-2家族成员之一，也是第一个发现的。BCL-2家族分为两大类，一类是抗凋亡的，主要有Bcl-2、Bcl-XL、Bcl-W、Mcl-1、CED9等，另一类是促细胞死亡的，主要包括Bax、Bak、Bcl-XS、Bad、Bik、Bid等。其中BCL-2是膜结合型整合蛋白，26Kd分子量，位于线粒体外膜、核膜的胞质面以及内质网膜上。BCL-2与滤泡性淋巴瘤（follicular lymphomas）细胞染色体14和18异位（translocation）有关。BCL-2有2个亚体：1G5M和1G50/IGJH。BCL-2为主要的细胞凋亡调节蛋白，促进细胞生存，在发育、组织稳态（homeostaisi）和防御外来病原菌中发挥重要作用。其抗凋亡功能受到蛋白水解处理和磷酸化调节。BCL-2的异常表达与癌症（黑色素瘤、乳腺癌、前列腺癌、慢性淋巴性白血病、肺癌等）、精神分裂症、自发免疫性疾病等有关。BCL-2的表达水平检测用于评价临床疾病的预后和治疗效果。通常使用免疫组化方法定量或定性检测BCL-2的蛋白表达水平。流式细胞术（FLOW CYTOMETRY）是七十年代发展起来的集计算机、激光、流体力学、细胞化学、细胞免疫学为一体的高科学技术。

产品内容

清理液（Reagent A）毫升

固着液（Reagent B）毫升

通透液（Reagent C）毫升

抗体液（Reagent D）毫升

染色液（Reagent E）毫升

复染液（Reagent F）毫升

产品说明书 1份

保存方式

保存固着液（Reagent B）、抗体液（Reagent D）、染色液（Reagent E）和复染液（Reagent F）在－20℃冰箱里，其余的保存在4℃冰箱里；抗体液（Reagent D）和染色液（Reagent E）严禁反复冻融；染色液（Reagent E）和复染液（Reagent F），避免光照；有效保证6月

用户自备

胰蛋白酶乙二胺四乙酸混合液（G&VS12024）：用于细胞脱离

完全细胞培养液（G&VS12052）：用于中和胰蛋白酶的处理

15毫升锥形离心管：用于样品操作的容器

1.5毫升离心管：用于细胞染色的容器

（微型）台式离心机：用于样品操作

细胞流式仪：用于细胞荧光分析

实验步骤

实验开始前，将－20℃冰箱里试剂盒中的试剂置入冰槽里融化。然后进行下列操作：

1．准备1个6孔细胞培养板的待测细胞（1 X 10⁶细胞/孔）

2．小心抽去培养液

3．加入xx毫升清理液（Reagent A），铺满培养孔表面

4．小心抽去清理液（Reagent A）

5．加入1毫升用户自备的胰蛋白酶乙二胺四乙酸混合液

6．放进37℃细胞培养箱孵育1分钟

7．加入3毫升用户自备的完全细胞培养液

8．移取细胞混匀液到15毫升锥形离心管（注意：悬浮细胞从这一步开始）

9．放进台式离心机离心8分钟，速度为500g

10．小心抽去上清液

11．加入xx毫升清理液（Reagent A），混匀细胞颗粒群

12．（选择步骤）细胞计数，调整细胞为1 X 10⁶细胞/毫升

13．放进台式离心机离心8分钟，速度为500g

14．小心抽去上清液

15．加入xx毫升固着液（Reagent B），混匀细胞颗粒群

16．室温下孵育20分钟

17．放进台式离心机离心8分钟，速度为500g

18．小心抽去上清液

19．加入xx毫升通透液（Reagent C），上下抽吸混匀

20．转移到1.5毫升离心管

21．室温下孵育10分钟

22．放进微型台式离心机离心8分钟，速度为500g

23．小心抽去上清液

24．加入xx毫升清理液（Reagent A），混匀细胞颗粒群

25．放进台式离心机离心8分钟，速度为500g

26．小心抽去上清液

27．用手指轻弹管底，使细胞颗粒松动

28．加入xx微升抗体液（Reagent D），充分混匀

29． 4℃温度下孵育30分钟

30．放进微型台式离心机离心8分钟，速度为500g

31．小心抽去上清液

32．加入xx毫升清理液（Reagent A），混匀细胞颗粒群

33．放进台式离心机离心8分钟，速度为500g

34．小心抽去上清液

35．重复实验步骤32至34一次

36．用手指轻弹管底，使细胞颗粒松动

37．加入xx微升染色液（Reagent E），充分混匀

38． 4℃温度下孵育30分钟，避免光照

39．放进微型台式离心机离心8分钟，速度为500g

40．小心抽去上清液

41．加入xx毫升清理液（Reagent A），混匀细胞颗粒群

42．放进台式离心机离心8分钟，速度为500g

43．小心抽去上清液

44．重复实验步骤41至43一次

45．加入xx微升复染液（Reagent F），用枪头充分混匀

46．移入到细胞流式仪专用测试管（可放进4℃冰箱里待测），避免光照

47．即刻进行细胞流式仪分析：波长488nm氩离子激光器，观察10000个细胞以上

48．建立地形图或散点图以及直方图分析（注意：波峰右移，表明BCL-2表达水平增高）

	染色液（Reagent E）	复染液（Reagent F）
荧光染料	异硫氰酸荧光素（FITC）	碘化丙啶（Propidium iodide；PI）
荧光颜色	绿色	红色
散发波长	530	575（使用phycoerythrin的信号检测）
流式仪通道	FL1	FL2
作用	BCL2的表达	DNA含量，即细胞量

注意事项

1．本产品为10次操作量

2．操作时，须戴手套，以防污染

3．孵育时，避免光照

4．用户可以进行细胞双染和三染，先进行CD抗体与细胞冰上孵育15分钟后，按照说明书11步开始后续操作

5．建议细胞染色完成后，即刻进行细胞流式仪分析。如果放进4℃冰箱里待测，不要超过3天

6．细胞流式仪分析前，须混匀内容物

7．细胞检测量不得少于5000个

8．建议测试阳性或阴性对照组

9．检测时，须弥补电子补偿，以去除双重参数的光谱重叠

10．告知流式仪技术员有关细胞类型

11．本公司提供系列蛋白表达分析试剂产品

质量标准

1．本产品经鉴定性能稳定

2．本产品经鉴定荧光清晰

使用承诺

上海极威生物科技有限公司秉着“信誉至上、客户满意、质量承诺”的宗旨为我们的用户提供优质产品和服务。用户收到货后，应按照产品说明书上的规定妥善保管并在有效期内使用。我们的产品在销售前已作严格的质量鉴定，保证说明书所述的使用效果。在货到后10天内若发现确属本产品的质量问题，请立即以书面形式（实验报告）与本公司联系，并将该产品退回，经检验确系产品质量所致，本公司负责更换产品。如系使用者错误操作所致，本公司不承担由此造成的损失。

友情提醒

IF IT DOESN’T WORK， RECHECK YOUR EXPERIMENT TO SEE WHAT YOU DID WRONG。

订购信息

单组分订购信息

编号名称规格

G&VS10212.1 细胞BCL2蛋白表达流式细胞仪检测试剂盒 10次

G&VS10212.1A 清理液（Reagent A）毫升

G&VS10212.1B 固着液（Reagent B）毫升

G&VS10212.1C 通透液（Reagent C）毫升

G&VS10212.1D 抗体液（Reagent D）毫升

G&VS10212.1E 染色液（Reagent E）毫升

G&VS10212.1F 复染液（Reagent F）毫升

试剂盒订购信息

产品编号	名称	规格
G&VS10212.1	细胞BCL2蛋白表达流式细胞仪检测试剂盒	10/20次
G&VS10212.2	载玻片细胞BCL2蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒	10/20次
G&VS10212.3	冰冻切片组织BCL2蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒	10/20次
G&VS10212.4	石蜡切片组织BCL2蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒	10/20次
G&VS10212.5	载玻片细胞BCL2蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒	10/20次
G&VS10212.6	冰冻切片组织BCL2蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒	10/20次
G&VS10212.7	石蜡切片组织BCL2蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒	10/20次
G&VS10212.8	细胞BCL2蛋白表达比色法定量检测试剂盒	10/50 次
G&VS10212.9	细胞BCL2蛋白表达荧光定量检测试剂盒	10/50 次
G&VS10212.10	BCL2蛋白表达西方杂交分析试剂盒	5次
G&VS10212.11	BCL2蛋白免疫共沉淀分析试剂盒	5次
G&VS10212.12	BCL2蛋白表达ELISA定量检测试剂盒	25次